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嗜肺军团菌lvgA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 刘明杰 陈建平 +2 位作者 廖涛 芦殿香 陈宪 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期605-608,共4页
本实验采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增得到军团菌毒力基因(L eg ionellav iru lence gene,lvg A gene),并将其定向连接入克隆载体pUC 18,构建重组质粒pU lvgA,重组子经限制性内切酶分析、聚合酶链式反应及测序鉴定后... 本实验采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增得到军团菌毒力基因(L eg ionellav iru lence gene,lvg A gene),并将其定向连接入克隆载体pUC 18,构建重组质粒pU lvgA,重组子经限制性内切酶分析、聚合酶链式反应及测序鉴定后,再将lvgA基因亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pG lvgA,转化宿主菌JM 109,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印记分析鉴定。实验结果表明,成功扩增出627 bp的lvgA基因,构建了重组质粒pU lvgA及原核表达重组质粒pG lvgA,并使53.7 KD a的G ST-lvgA融合蛋白质在原核系统中得到了有效的表达。 展开更多
关键词 军团菌 lvgA基因 聚合酶链式反应 基因表达
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成都地区部分健康人群和肺科患者血清军团菌抗体检测 被引量:8
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作者 廖涛 陈建平 +1 位作者 陆晓军 刘明杰 《寄生虫病与感染性疾病》 CAS 2005年第1期3-6,共4页
目的了解成都地区不同人群军团菌感染情况.方法采用微量凝集试验对393份健康人及肺科住院患者血清标本进行Lp1~8型及Lm型军团菌抗体效价测定.结果所测军团菌各种型均有阳性出现,1人感染2~3个血清型者占10.82%.健康人群军团菌抗体阳性... 目的了解成都地区不同人群军团菌感染情况.方法采用微量凝集试验对393份健康人及肺科住院患者血清标本进行Lp1~8型及Lm型军团菌抗体效价测定.结果所测军团菌各种型均有阳性出现,1人感染2~3个血清型者占10.82%.健康人群军团菌抗体阳性率为31.60%(73/231),肺科住院患者为35.80%(58/162).健康人Lp1型阳性率最高(17.31%),其次为Lp6型(11.26%),Lp8型最低(0.43%).肺科患者中Lp1阳性率最高(12.35%),其次为Lp6(5.56%).结论成都地区普遍存在不同种型的军团菌感染. 展开更多
关键词 军团菌 感染 抗体效价 微量凝集试验
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日本血吸虫疫苗候选分子的研究进展 被引量:7
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作者 张莉 陈建平 《寄生虫病与感染性疾病》 CAS 2005年第1期31-34,共4页
关键词 日本血吸虫病 患者 治疗 虫卵肉芽肿 疫水 阻断传播 研究进展 重寄生 疫苗 感染率
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军团病诊断技术的研究进展 被引量:5
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作者 张雷 陈建平 《寄生虫病与感染性疾病》 CAS 2003年第3期131-134,共4页
关键词 军团病 诊断技术 研究进展 急性细菌性传染病 细菌培养 血清学诊断
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军团菌外膜蛋白抗原基因的克隆并在原核系统中表达 被引量:1
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作者 芦殿香 陈建平 +4 位作者 张雷 王涛 刘明杰 田玉 陈宪 《寄生虫病与感染性疾病》 CAS 2004年第4期149-151,共3页
目的 克隆军团菌外膜蛋白抗原基因 omp M,构建重组质粒 p LPM,并在原核系统中表达。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从军团菌基因组 DNA中扩增得到 omp M基因 ,导入载体 p UC1 8,在 JM1 0 9中表达 ,并用SDS-PAGE进行鉴定。结果 扩增出 7... 目的 克隆军团菌外膜蛋白抗原基因 omp M,构建重组质粒 p LPM,并在原核系统中表达。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从军团菌基因组 DNA中扩增得到 omp M基因 ,导入载体 p UC1 8,在 JM1 0 9中表达 ,并用SDS-PAGE进行鉴定。结果 扩增出 773 bp的 omp M基因 ;构建重组质粒 p LPM;表达出 2 5 k Da的蛋白质。结论 成功扩增军团菌 omp M基因 ,构建重组质粒 p LPM,并在原核系统中得到了表达。 展开更多
关键词 军团菌 ompM PCR 基因表达
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军团菌MOMPS基因的克隆并在原核系统中表达
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作者 张雷 陈建平 +2 位作者 王涛 张莉 田玉 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期379-382,共4页
以军团菌DNA为模板,PCR扩增获得军团菌主要外膜蛋白基因(M a jor ou ter m em brane prote in gene,om pS),与原核表达质粒pUC 18定向重组,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL 21,并用限制性酶酶切分析、聚合酶链式反应、核酸序列分析、十二... 以军团菌DNA为模板,PCR扩增获得军团菌主要外膜蛋白基因(M a jor ou ter m em brane prote in gene,om pS),与原核表达质粒pUC 18定向重组,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL 21,并用限制性酶酶切分析、聚合酶链式反应、核酸序列分析、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、W estern印迹进行鉴定。实验结果表明我们扩增出了军团菌914 bp的om pS基因,成功构建了重组质粒pLPom pS,并在原核系统中得到了表达。 展开更多
关键词 军团菌 主要外膜蛋白基因(ompS) 克隆 表达
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嗜肺军团菌热休克蛋白60基因真核表达载体的构建及鉴定
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作者 廖涛 陈建平 刘明杰 《川北医学院学报》 CAS 2005年第3期241-243,共3页
目的构建嗜肺军团菌热休克蛋白60(HSP60)基因的真核表达载体pcDNA3.1/HSP60,并对其进行鉴定。方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术从嗜肺军团菌扩增得到HSP60基因,并将其克隆至载体pUC18进行序列测定。将重组质粒pUC18/LpHSP60中的目的基... 目的构建嗜肺军团菌热休克蛋白60(HSP60)基因的真核表达载体pcDNA3.1/HSP60,并对其进行鉴定。方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术从嗜肺军团菌扩增得到HSP60基因,并将其克隆至载体pUC18进行序列测定。将重组质粒pUC18/LpHSP60中的目的基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组子pcDNA3.1/HSP60,通过限制性内切酶酶切及PCR进行鉴定。结果克隆的LpHSP60基因序列与GenBank公布的一致性为98%,限制性内切酶酶切及PCR分析表明HSP60基因已成功插入pcDNA3.1中。结论成功构建了LpHSP60基因的真核表达载体,为进一步研究军团菌病HSP60基因DNA疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 嗜肺军团菌 热休克蛋白60 真核表达载体
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