类产碱假单胞菌防治草地蝗虫的研究 被引量：7

1

作者 杨志荣 朱文 +6 位作者 葛绍荣 侯若彤 刘世贵 汪志刚 李韬 闫省三 王贵林 《中国生物防治》 CSCD 1996年第2期55-57,共3页

一株从内地黄脊竹蝗虫尸中分离到的类产碱假单胞菌致病菌,经室内的感染试验表明,对青海、四川草地的优势种蝗虫具有较好的感染致死作用。用10^(10)活菌体/mL剂量的菌剂处理玉米,喂饲以中华坳蝗为主的草地蝗虫,死亡率达80.3%。对不同种... 一株从内地黄脊竹蝗虫尸中分离到的类产碱假单胞菌致病菌,经室内的感染试验表明,对青海、四川草地的优势种蝗虫具有较好的感染致死作用。用10^(10)活菌体/mL剂量的菌剂处理玉米,喂饲以中华坳蝗为主的草地蝗虫,死亡率达80.3%。对不同种蝗虫的感染致死率有明显差异,对东亚飞蝗的致死率为48%。对草地粘虫、草原毛虫、黑绒鳃金龟等害虫也有一定致死力。田间小区的治蝗效果达80%以上。 展开更多

关键词 类产碱假单胞菌 草地 蝗虫 生物防治

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产气肠杆菌几丁质酶的分离纯化及性质研究 被引量：17

2

作者 唐亚雄 赵建 +2 位作者 丁诗华 刘世贵 杨志荣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期82-86,共5页

从自然罹病死亡的草原毛虫 (Gynephorapruoergnesis)体内分离到一株产气肠杆菌(Enterobacteraerogenes) ,它在几丁质的诱导下能产生较高活性的几丁质酶。发酵液经硫酸铵盐析、DEAE纤维素柱层析和SephadexG - 1 0 0柱层析分离出几丁质酶... 从自然罹病死亡的草原毛虫 (Gynephorapruoergnesis)体内分离到一株产气肠杆菌(Enterobacteraerogenes) ,它在几丁质的诱导下能产生较高活性的几丁质酶。发酵液经硫酸铵盐析、DEAE纤维素柱层析和SephadexG - 1 0 0柱层析分离出几丁质酶。用SDS PAGE测得该酶的分子量为 42 5kD。水解几丁质的Km 值为 2 88mg/mL- 1 。酶反应的最适温度为55℃ ,最适pH值为 6 0 ,金属离子对几丁质酶活性影响较大 ,其中Zn2 +、Ba2 +、Ca2 +和Mn2 +对酶有较强的激活作用 ,而Hg2 +、Co2 +和Mg2 +则有较强的抑制作用。 展开更多

关键词 产气肠杆菌 几丁质酶 纯化 酶学性质

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CpG序列和猪白细胞介素6基因转染表达对猪囊尾蚴基因疫苗免疫影响的研究 被引量：6

3

作者 李江凌 高荣 +9 位作者 武梅 孟明杰 龙章富 唐漫书 沈翼 谢鸿观 王丽焕 巫雪艳 殷雪 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第6期26-30,共5页

以猪囊尾蚴VTS76抗原基因和质粒VPIL 6、pUCl8 CpG免疫接种小鼠 ,检测了小鼠的体液及细胞免疫反应。结果发现 ,VPIL 6或pUC CpG与VTS76共同免疫小鼠的特异性抗体滴度、IgG含量、淋巴细胞白细胞介素 2诱生活性、脾细胞增殖反应和血液免... 以猪囊尾蚴VTS76抗原基因和质粒VPIL 6、pUCl8 CpG免疫接种小鼠 ,检测了小鼠的体液及细胞免疫反应。结果发现 ,VPIL 6或pUC CpG与VTS76共同免疫小鼠的特异性抗体滴度、IgG含量、淋巴细胞白细胞介素 2诱生活性、脾细胞增殖反应和血液免疫细胞数量显著高于VTS76免疫组和对照组。证明VPIL 6和CpG序列能显著增强动物对DNA疫苗的细胞和体液免疫反应 。 展开更多

关键词 疫苗 免疫 免疫应答 猪白细胞介素-6基因 CPG序列 猪囊尾蚴 抗原基因 免疫增强剂 基因表达

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藏猪γ-干扰素基因cDNA的克隆及序列分析 被引量：7

4

作者 李惠 高荣 +8 位作者 武梅 丁晓涛 王丽焕 李平 李波 余庆 郑勇 刘崑 刘世贵 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期48-51,共4页

将藏猪外周血淋巴细胞进行体外培养 ,在ConA的刺激下培养 70h后 ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR技术扩增藏猪淋巴细胞γ 干扰素cDNA(TPγ INF) ,并克隆到 pMD T载体上 ,进行测序。结果显示 :克隆的TPγ INFcDNA全长为 5 45个碱基... 将藏猪外周血淋巴细胞进行体外培养 ,在ConA的刺激下培养 70h后 ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR技术扩增藏猪淋巴细胞γ 干扰素cDNA(TPγ INF) ,并克隆到 pMD T载体上 ,进行测序。结果显示 :克隆的TPγ INFcDNA全长为 5 45个碱基 ,ORF为 5 0 1个碱基 ,编码 16 6个氨基酸 ,分子量为 19.4ku ,等电点为 10 .2 9。此cDNA与牛、马的γ INF同源性分别为86 %和 81% ,与猪的γ INF同源性为 10 0 % ,证明克隆到了藏猪的γ 干扰素cDNA。 展开更多

关键词 藏猪 r-干扰素基因 CDNA 基因克隆 序列分析 同源性比较

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藏猪白细胞介素-2基因的克隆及序列分析 被引量：10

5

作者 高荣 李惠 +6 位作者 武梅 王丽焕 丁晓涛 李平 李波 余庆 刘世贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第6期3-5,共3页

将藏猪外周血淋巴细胞在伴刀豆球蛋白 A(Con A)的刺激下体外培养 70 h后 ,提取激活淋巴细胞总 RNA,应用RT- PCR技术扩增出藏猪淋巴细胞白细胞介素 - 2 c DNA (TPIL - 2 ) ,克隆到 p MD- T载体上并测序。测序结果显示 ,克隆的TPIL- 2 c ... 将藏猪外周血淋巴细胞在伴刀豆球蛋白 A(Con A)的刺激下体外培养 70 h后 ,提取激活淋巴细胞总 RNA,应用RT- PCR技术扩增出藏猪淋巴细胞白细胞介素 - 2 c DNA (TPIL - 2 ) ,克隆到 p MD- T载体上并测序。测序结果显示 ,克隆的TPIL- 2 c DNA全长为 5 0 3个碱基 ,开放阅读框 (ORF)为 4 6 5个碱基 ,编码 15 4个氨基酸 ,分子量为 17.4 kd,等电点为 5 .38;疏水氨基酸 4 0 .3% ,亲水氨基酸 37.0 % ,碱性氨基酸 11% ,酸性氨基酸 11.7%。此 c DNA与报道猪的 IL - 2同源性为 10 0 % ,证实克隆到了藏猪白细胞介素 - 2基因 c DNA。 展开更多

关键词 藏猪 白细胞介素-2 基因克隆 序列分析 免疫系统

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成华猪淋巴细胞白细胞介素-4基因的克隆及序列分析 被引量：4

6

作者 武梅 高荣 +9 位作者 李江凌 龙章富 唐漫书 刘昆 郑勇 沈翼 谢鸿观 王丽焕 巫雪艳 刘世贵 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期8-11,共4页

将猪外周淋巴细胞进行体外培养 ,在伴刀豆球蛋白A(ConA)的刺激下培养 48h ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 4(IL 4)基因 ,并克隆到pMD T载体测序。测序结果表明 ,IL 4基因的cDNA长度为 413bp ,开放阅读... 将猪外周淋巴细胞进行体外培养 ,在伴刀豆球蛋白A(ConA)的刺激下培养 48h ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 4(IL 4)基因 ,并克隆到pMD T载体测序。测序结果表明 ,IL 4基因的cDNA长度为 413bp ,开放阅读框为 40 2bp ,编码 13 4个氨基酸 ,分子量 15 .0ku ,等电点 8.2 4;与人和小鼠的IL 4基因编码的氨基酸序列的同源性分别为 60 %和 42 %。 展开更多

关键词 成华猪 淋巴细胞 白细胞 介素-4 序列分析 基因克隆

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藏猪白细胞介素4基因cDNA的克隆及序列分析 被引量：5

7

作者 李惠 高荣 +8 位作者 武梅 王丽焕 丁晓涛 李平 李波 余庆 郑勇 刘崑 刘世贵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期475-478,共4页

目的 :克隆藏猪白细胞介素 4基因cDNA。方法 :从体外ConA刺激 70小时的藏猪外周血淋巴细胞中提取总RNA ,应用RT PCR技术扩增 ,pMD T载体连接 ,常规转化后 ,进行酶切及序列测定进行鉴定。结果 :研究表明克隆得到的IL 4基因cDNA与成华猪的... 目的 :克隆藏猪白细胞介素 4基因cDNA。方法 :从体外ConA刺激 70小时的藏猪外周血淋巴细胞中提取总RNA ,应用RT PCR技术扩增 ,pMD T载体连接 ,常规转化后 ,进行酶切及序列测定进行鉴定。结果 :研究表明克隆得到的IL 4基因cDNA与成华猪的IL 4同源性达到 99% ,与长白杂交猪的同源率为 98%。结论 :从藏猪外周血淋巴细胞中成功地分离到IL 4基因。 展开更多

关键词 藏猪 白细胞介素4 基因CDNA 克隆 序列分析

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阳离子脂质体包裹CpG对猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗免疫效应的影响 被引量：3

8

作者 龙章富 高荣 +10 位作者 孟民杰 武梅 李江凌 沈翼 巫雪艳 王丽焕 谢鸿观 殷雪 刘昆 郑勇 刘世贵 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第3期15-19,共5页

对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细... 对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细胞介素 2 (IL 2 )诱生活性和免疫细胞数量、血液IgG含量较仅注射三联疫苗的小鼠显著增加。说明阳离子脂质体包裹CpG能增强小鼠对三联疫苗的体液和细胞免疫应答反应 。 展开更多

关键词 阳离子脂质体 CPG 猪瘟 猪肺疫 猪丹毒 三联疫苗 免疫效应

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猪囊尾蚴抗原基因TS11的真核表达研究

9

作者 沈翼 高荣 +9 位作者 沈斌 武梅 孟民杰 唐漫书 李江凌 郑勇 刘崑 魏竹波 王克非 刘世贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期6-9,共4页

将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因... 将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的 m RNA;其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别 ,在转染真核细胞 2 4 h后 ,即可检测到正确表达的猪囊尾蚴抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的 DNA疫苗奠定了可靠的基础。 展开更多

关键词 猪囊尾蚴 抗原基因 TS11基因 真核表达 蛋白表达产物 人畜共患病

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猪带绦虫不同阶段及羊囊尾蚴蛋白质分析

10

作者 魏竹波 高荣 +6 位作者 沈斌 孟民杰 王克非 付玉梅 卓麟 朱锦 刘世贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第8期11-13,共3页

利用浓度梯度 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对猪囊尾蚴的囊液和虫体 ,猪带绦虫成虫的头颈节、成节、孕节 ,猪带绦虫的虫卵以及羊囊尾蚴的蛋白成分进行了对比分析。结果发现 :囊液、虫体、头颈节、成节、孕节、虫卵、羊囊尾蚴分别有35条 (15 .... 利用浓度梯度 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对猪囊尾蚴的囊液和虫体 ,猪带绦虫成虫的头颈节、成节、孕节 ,猪带绦虫的虫卵以及羊囊尾蚴的蛋白成分进行了对比分析。结果发现 :囊液、虫体、头颈节、成节、孕节、虫卵、羊囊尾蚴分别有35条 (15 .0～ 15 0 .4kd)、44条 (15 .0～ 133.7kd)、2 2条 (13.3～ 163.9kd)、19条 (13.3～ 90 .1kd)、19条 (13.3～ 90 .1kd)、30条 (13.3～ 99.4)和 38条 (15 .0～ 133.4kd)蛋白带 ;其中 15 .0 kd和 35 .5 kd两条共同抗原蛋白带 ,在猪带绦虫各阶段和羊囊尾蚴中含量最大的蛋白带同时也是阶段性的共同抗原蛋白带。这些结果为下一步的保护性抗原筛选奠定了基础。 展开更多

关键词 SDS-PAGE 猪带绦虫 羊囊尾蚴 蛋白质

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蚧镰孢菌的生长及产孢研究 被引量：1

11

作者 王辉 杨志荣 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第S1期137-141,共5页

蚧镰孢菌孢子萌发及产孢的最适温度是 2 8℃ ,菌生长的适温是 2 4℃～ 2 6℃。孢子萌发受 pH值影响较小 ,菌生长以 pH6.5～ 8.5为最适 ,而 pH8.5时产孢最多。菌的生长也可以调节培养液的pH值 ,使其达到最适生长的 pH范围。光照对该菌的... 蚧镰孢菌孢子萌发及产孢的最适温度是 2 8℃ ,菌生长的适温是 2 4℃～ 2 6℃。孢子萌发受 pH值影响较小 ,菌生长以 pH6.5～ 8.5为最适 ,而 pH8.5时产孢最多。菌的生长也可以调节培养液的pH值 ,使其达到最适生长的 pH范围。光照对该菌的生长及产孢也有一定影响。蚧镰孢菌能利用多种碳源和氮源 ,也能以几丁质为唯一碳源和氮源生长 ,但生长很差。Ca2 +、Fe2 +等金属离子以及硫胺素、核黄素、叶酸等维生素的加入可使产孢量增加 ,而维生素的作用更明显。该菌的产孢高峰期一般在 2 1天左右 ,而且在相同条件下 ,接种量越大 ,产生最大量孢子所需的时间越短。 展开更多

关键词 蚧镰孢菌 菌生长 产孢

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青藏高寒草地常见有毒豆科植物 被引量：6

12

作者 曾英 刘世贵 《四川草原》 1995年第1期47-49,54,共4页

有毒豆科植物的主要有毒成分是植物毒蛋白、神经毒氨基酸、生物碱、甙类、有毒黄酮、蒽醌类和其它有毒成分。详细论述了青藏高寒草地几种常见的有毒豆科植物的毒性及家畜采食后的中毒症状。

关键词 青藏高寒草地 有毒豆科植物 有毒成分 豆科植物

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青藏高寒草甸部分豆科植物根瘤菌的初步研究 被引量：2

13

作者 曾英 刘世贵 张兆清 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期32-34,共3页

本文首次对青藏高原川西北高寒草地部分豆科植物进行了根瘤菌共生调查和性质研究，在若尔盖、红原、松潘等地海拔在３０００～３５００ｍ的草地上采集豆科植物根瘤样品５０多份，分别与２４种不同的豆科植物共生结瘤，从中分离到２ｌ株... 本文首次对青藏高原川西北高寒草地部分豆科植物进行了根瘤菌共生调查和性质研究，在若尔盖、红原、松潘等地海拔在３０００～３５００ｍ的草地上采集豆科植物根瘤样品５０多份，分别与２４种不同的豆科植物共生结瘤，从中分离到２ｌ株根瘤菌。研究发现，高原高寒草地豆科植物种类不如低海拔地区多，根瘤亦不发达，普遍偏小，且无效根瘤较多。由于气温低，根瘤菌对根的感染力不够强。但根瘤菌对低温和紫外线等不利因素有较强的抵抗力。对ＫＣｌ、ＮａＣｌ、ＣａＣｌ２、ＬｉＣｌ等盐类有较强的耐受力。 展开更多

关键词 豆科植物 根瘤菌 青藏高原 高寒草地

全文增补中