目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)的代谢产物通过激活炎症小体(NOD-,LRR-and pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)促进神经炎症反应的作用及机制。方法使用P.gingivalis上清处理小胶质细胞HMC3,采...目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)的代谢产物通过激活炎症小体(NOD-,LRR-and pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)促进神经炎症反应的作用及机制。方法使用P.gingivalis上清处理小胶质细胞HMC3,采用CCK8、实时荧光定量PCR、Western Blot等方法分别检测P.gingivalis上清对小胶质细胞HMC3的细胞活力、细胞NLRP3信号通路激活以及线粒体功能验证。结果P.gingivalis上清在5%时,显著激活小胶质细胞HMC3的NLRP3,增加相关凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated spotlike protein containing a CARD,ASC)、胱天蛋白酶1(Caspase1)、炎症因子(IL-1β)(P<0.05);且线粒体功能相关蛋白表达和线粒体膜电位降低。加入NLRP3的抑制剂(MCC950)后,10nM MCC950显著增强细胞活力,抑制相关胱天蛋白酶1(Caspase1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、炎症因子(IL-1β)(P<0.05)的表达;同时恢复了线粒体功能。结论P.gingivalis通过激活NLRP3促进小胶质细胞炎症反应发生,其机制可能与线粒体功能有关。展开更多
文摘目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)的代谢产物通过激活炎症小体(NOD-,LRR-and pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)促进神经炎症反应的作用及机制。方法使用P.gingivalis上清处理小胶质细胞HMC3,采用CCK8、实时荧光定量PCR、Western Blot等方法分别检测P.gingivalis上清对小胶质细胞HMC3的细胞活力、细胞NLRP3信号通路激活以及线粒体功能验证。结果P.gingivalis上清在5%时,显著激活小胶质细胞HMC3的NLRP3,增加相关凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated spotlike protein containing a CARD,ASC)、胱天蛋白酶1(Caspase1)、炎症因子(IL-1β)(P<0.05);且线粒体功能相关蛋白表达和线粒体膜电位降低。加入NLRP3的抑制剂(MCC950)后,10nM MCC950显著增强细胞活力,抑制相关胱天蛋白酶1(Caspase1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、炎症因子(IL-1β)(P<0.05)的表达;同时恢复了线粒体功能。结论P.gingivalis通过激活NLRP3促进小胶质细胞炎症反应发生,其机制可能与线粒体功能有关。
