抑制氯通道阻抑鼻咽癌细胞周期和细胞增殖 被引量：21

1

作者 王立伟 陈丽新 +7 位作者 朱林燕 毛建文 孙雪荣 聂思槐 张瑾 钟平 蔡波 李攀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期715-718,共4页

目的 :研究Cl-通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩 (RVD)、增殖及细胞周期分布中的作用。方法 :活细胞图像分析低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)RVD ,用台盼蓝拒染法检测细胞存活率 ,MTT法检测细胞增殖能力。用流式细胞仪测定细胞周期不同时相... 目的 :研究Cl-通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩 (RVD)、增殖及细胞周期分布中的作用。方法 :活细胞图像分析低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)RVD ,用台盼蓝拒染法检测细胞存活率 ,MTT法检测细胞增殖能力。用流式细胞仪测定细胞周期不同时相细胞百分率。结果 :Cl-通道抑制剂硝基苯丙胺基苯甲酸 (NPPB)剂量依赖性抑制RVD和细胞增殖 ,10 0 μmol/LNPPB明显阻抑细胞周期进程 ,使细胞停滞于G1期 ,G1期细胞百分率从 5 4 %提高到71% ,但对细胞存活率没有显著影响。结论 :阻抑Cl-通道可阻滞细胞于G1期而抑制细胞增殖。提示Cl-通道和RVD的激活是促进细胞从G1期进入S期和维持增殖所必需的因素。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 肿瘤细胞 氯化物通道 细胞周期

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迁移的鼻咽癌细胞容积激活性氯电流(英文) 被引量：8

2

作者 毛建文 王立伟 +6 位作者 孙雪荣 朱林燕 李攀 钟平 聂思槐 Tim JACOB 陈丽新 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期525-530,共6页

用膜片钳技术研究了Transwell小室趋化迁移后的鼻咽癌CNE-2Z细胞容积激活性CT电流。47％低渗刺激迁移后的CNE-2Z细胞诱发容积激活性氯电流,与未迁移细胞相比,其特性以及其对氯通道阻断剂的敏感性发生明显的变化,此电流的密度明显高于未... 用膜片钳技术研究了Transwell小室趋化迁移后的鼻咽癌CNE-2Z细胞容积激活性CT电流。47％低渗刺激迁移后的CNE-2Z细胞诱发容积激活性氯电流,与未迁移细胞相比,其特性以及其对氯通道阻断剂的敏感性发生明显的变化,此电流的密度明显高于未迁移细胞,而且该电流几乎完全被氯通道阻断剂adenosine-5'-triphosphate(ATP,10 mmol/L)、5-nitro-2-3-phenylpropylamino benzoic acid(NPPB,100μmol/L)和他莫昔芬(30μmol/L)抑制,其中NPPB和他莫昔芬对迁移细胞的抑制作用明显强于未迁移细胞。迁移后的CNE-2Z细胞容积激活性氯通道对阴离子的通透性为:Br>Cl>I>葡萄糖酸,与未迁移细胞(I>Br>Cl>葡萄糖酸)不同。结果提示,容积激活性氯通道可能参与CNE-2Z细胞的迁移过程。 展开更多

关键词 肿瘤细胞 培养的 氯通道 细胞迁移 膜片钳技术

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Cl^-在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中的作用 被引量：12

3

作者 陈丽新 王立伟 +7 位作者 朱林燕 聂思槐 张谨 钟平 罗海兵 蔡波 李攀 Tim Jacob 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期490-493,共4页

目的 :研究鼻咽癌细胞的调节性容积回缩 (RVD)及Cl-在其中所起的作用。方法 :活细胞图像分析低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)在细胞外低渗刺激时的细胞容积改变 ,用离子置换法和通道阻断法阐明Cl-在RVD中所起的作用。结果 :细胞外低渗刺激... 目的 :研究鼻咽癌细胞的调节性容积回缩 (RVD)及Cl-在其中所起的作用。方法 :活细胞图像分析低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)在细胞外低渗刺激时的细胞容积改变 ,用离子置换法和通道阻断法阐明Cl-在RVD中所起的作用。结果 :细胞外低渗刺激使细胞膨胀并诱发RVD。在 16 0 - 2 30mOsmol/L范围内 ,RVD与细胞膨胀程度正相关。用葡萄糖酸取代灌流液Cl-时RVD增强 ,细胞内Cl-耗竭时RVD消失。氯通道阻断剂阻抑RVD ,但不同的阻断剂对RVD的阻抑率有明显差异。结论 :Cl-是CNE - 2Z细胞RVD的关键离子 ,Cl-通道激活 ,Cl-外流是RVD的主要机制。 展开更多

关键词 调节性容积回缩 RVD 肿瘤细胞培养 氯离子通道 鼻咽肿瘤

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人胎儿鼻咽上皮细胞的背景氯电流 被引量：13

4

作者 孙雪荣 王立伟 +4 位作者 毛建文 朱林燕 聂思槐 钟平 陈丽新 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期349-354,共6页

采用膜片钳和图像分析技术,研究人胎儿鼻咽上皮细胞背景电流的特性及其与容积激活性氯电流的关系。在等张溶液中,可记录到一背景电流,该电流呈微弱的外向整流性,无明显时间依赖性失活,其翻转电位为(?0.73±1.7)mV(n=21),接近氯离子... 采用膜片钳和图像分析技术,研究人胎儿鼻咽上皮细胞背景电流的特性及其与容积激活性氯电流的关系。在等张溶液中,可记录到一背景电流,该电流呈微弱的外向整流性,无明显时间依赖性失活,其翻转电位为(?0.73±1.7)mV(n=21),接近氯离子平衡电位(?0.9mV)。细胞外高张刺激(440mOsmol/L)明显抑制此电流(59.6±7.1)%,而低张刺激(160mOsmol/L)则诱发细胞产生容积激活性氯电流。氯通道阻断剂tamoxifen和5-硝基-2-(3-苯丙胺基)苯甲酸[5-nitro-2-(3-phenylpropylamino)benzoicacid,NPPB]显著地抑制背景电流并使细胞基础容积增大。上述结果表明,人胎儿鼻咽上皮细胞的背景Cl?电流是背景电流的重要成分,此Cl?电流与容积激活性氯电流及细胞基础容积调节有关。 展开更多

关键词 上皮细胞 背景电流 氯通道

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阻断氯通道对鼻咽癌细胞凋亡和细胞增殖的影响 被引量：12

5

作者 范爱辉 陈丽新 +2 位作者 毛建文 聂思槐 王立 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1804-1806,共3页

目的研究阻断氯通道对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞凋亡和细胞增殖的影响,探讨氯通道在CNE-2Z细胞凋亡中的作用。方法用顺铂(CDDP)诱导细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖。结果顺铂(1.5μg/ml)处理细胞48 h后可检测出凋亡... 目的研究阻断氯通道对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞凋亡和细胞增殖的影响,探讨氯通道在CNE-2Z细胞凋亡中的作用。方法用顺铂(CDDP)诱导细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖。结果顺铂(1.5μg/ml)处理细胞48 h后可检测出凋亡峰,氯通道阻断剂NPPB(50μmol/L)阻抑顺铂诱导的细胞凋亡及细胞增殖抑制。结论氯通道参与了CNE-2Z细胞凋亡过程的调控。 展开更多

关键词 肿瘤细胞 细胞凋亡 细胞增殖 氯通道

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MDR1基因在睫状体色素上皮细胞容积激活性氯电流中的作用(英文) 被引量：9

6

作者 陈丽新 王立伟 Tim JACOB3 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-6,共6页

用膜片钳、反义寡核苷酸、免疫荧光及激光共聚焦显微镜等技术 ,研究MDR1基因在牛睫状体色素上皮(pigmentedciliaryepithelial,PCE)细胞容积激活性氯电流中的作用。PCE细胞表达MDR1基因产物 P糖蛋白 (P gp)。反义MDR1寡核苷酸抑制MDR1基... 用膜片钳、反义寡核苷酸、免疫荧光及激光共聚焦显微镜等技术 ,研究MDR1基因在牛睫状体色素上皮(pigmentedciliaryepithelial,PCE)细胞容积激活性氯电流中的作用。PCE细胞表达MDR1基因产物 P糖蛋白 (P gp)。反义MDR1寡核苷酸抑制MDR1基因的表达 (P gp免疫荧光减少 93 % ) ,延缓容积激活性氯电流的出现 (潜伏期延长10 9% ) ,并导致激活率降低 62 %及电流峰值减小 5 6%。而核酸转染剂阳离子脂质体和非配对性的寡核苷酸对电流没有显著性影响。上述观察结果表明 。 展开更多

关键词 睫状体色素上皮细胞 氯通道 寡核苷酸 反义 基因表达 MDR1 容积激活性氯电流

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他莫昔芬对不同生长周期鼻咽癌细胞容积激活性电流的作用 被引量：3

7

作者 罗海兵 王立伟 +5 位作者 毛建文 焦成钢 范爱辉 聂思槐 李攀 陈丽新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期226-230,共5页

目的:研究Cl-通道抑制剂他莫昔芬(tamoxifen)对G1期和S期鼻咽癌细胞容积激活性电流的抑制效应。方法:运用血清饥饿法或化学药物双阻断法分别将鼻咽癌低分化上皮细胞(CNE-2Z)同步化至G1或S期,用膜片钳技术研究不同细胞周期细胞容积激活... 目的:研究Cl-通道抑制剂他莫昔芬(tamoxifen)对G1期和S期鼻咽癌细胞容积激活性电流的抑制效应。方法:运用血清饥饿法或化学药物双阻断法分别将鼻咽癌低分化上皮细胞(CNE-2Z)同步化至G1或S期,用膜片钳技术研究不同细胞周期细胞容积激活性氯通道对阴离子的通透性及他莫昔芬对CNE-2Z细胞容积激活性电流的作用。结果:47%低渗刺激下,G1期和S期细胞产生容积激活性电流,G1期的电流密度大于S期。10-30μmol/L他莫昔芬能完全抑制G1期和S期容积激活性电流,但随浓度升高,达到完全抑制效应所需要的时间缩短。G1期或S期细胞电流被完全抑制的时间有明显差异,在相同浓度他莫昔芬作用下,G1期细胞达到最大抑制效应时间明显短于S期细胞。G1期与S期细胞容积激活性氯通道对阴离子的通透性均为I->Cl->葡萄糖酸根离子,但G1期细胞对I-的通透性高于S期,S期细胞对葡萄糖酸的通透性高于G1期。结论:CNE-2Z细胞G1期与S期的容积激活性电流密度及对阴离子的通透性有差异,G1期和S期细胞对他莫昔芬敏感性不同,提示CNE-2Z细胞对他莫昔芬敏感的容积激活性氯通道在不同生长周期中表达有差异。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 氯化物通道 他莫昔芬 细胞周期

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渗透压、细胞容积与鼻咽癌细胞增殖 被引量：2

8

作者 王立伟 陈丽新 +6 位作者 毛建文 朱林燕 聂思槐 钟平 孙雪荣 蔡波 李攀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1349-1352,共4页

目的 :研究渗透压、细胞容积与鼻咽癌细胞增殖的关系。方法 :用MTT法检测在不同渗透压培养条件下低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)的增殖能力 ,流式细胞仪测定细胞周期分布 ,活细胞图像分析测量细胞容积 ,台盼蓝拒染法检测细胞存活率。结果 ... 目的 :研究渗透压、细胞容积与鼻咽癌细胞增殖的关系。方法 :用MTT法检测在不同渗透压培养条件下低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)的增殖能力 ,流式细胞仪测定细胞周期分布 ,活细胞图像分析测量细胞容积 ,台盼蓝拒染法检测细胞存活率。结果 :高渗 (370、4 4 0mOsmol/L)培养增大细胞容积和促进细胞增殖 ,细胞容积分别增大8 7%、2 7 8% ,增殖率分别提高 2 2 2 %和 33 9% ;而低渗 (16 0、2 30mOsmol/L)培养减小细胞容积和抑制增殖 ,细胞容积分别减小 12 8%和 4 1% ,增殖率分别降低 34 0 %和 15 6 % ;细胞容积与细胞增殖率呈正相关。非等渗长期培养条件下 ,细胞周期各时相分布没有显著差异。低渗培养降低细胞生存率。结论 :胞外渗透压、细胞容积与鼻咽癌细胞增殖密切相关 ,低渗培养可能通过减小细胞容积。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 渗透压 细胞大小 细胞增殖

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鼻咽上皮细胞的调节性容积回缩能力及机制 被引量：1

9

作者 孙雪荣 陈丽新 +5 位作者 毛建文 朱林燕 聂思槐 钟平 李攀 王立伟 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期353-358,共6页

用图像分析系统和通道阻断法研究了原代人胎儿鼻咽上皮细胞的调节性容积回缩(regulatoryvolumedecrease,RVD)能力及其机制。结果发现,低渗刺激可诱发鼻咽上皮细胞产生RVD,在160-240mOsmol/L范围内,RVD强弱与渗透压呈“S”形负相关(r=-0.... 用图像分析系统和通道阻断法研究了原代人胎儿鼻咽上皮细胞的调节性容积回缩(regulatoryvolumedecrease,RVD)能力及其机制。结果发现,低渗刺激可诱发鼻咽上皮细胞产生RVD,在160-240mOsmol/L范围内,RVD强弱与渗透压呈“S”形负相关(r=-0.99,P<0.05),与细胞肿胀程度呈“S”形正相关(=0.99,P<0.05)。Cl^-通道阻断剂tamoxifen(20μmol/L),ATP(10mmol/L)或NPPB(100μmol/L)对RVD阻抑率分别为100%(P<0.01),76.3%(P<0.01)和62.7%(P<0.01)。本研究表明,鼻咽上皮细胞受到低渗刺激时可产生RVD,Cl^-通道开放是其RVD的关键机制。 展开更多

关键词 鼻咽上皮细胞 调节性容积回缩能力 图像分析系统 通道阻断法 氯离子通道

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氯通道在不同生长周期的鼻咽癌细胞迁移中的作用 被引量：4

10

作者 李辉 王立伟 +6 位作者 毛建文 何庆丰 孙雪荣 聂思槐 钟平 李攀 陈丽新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1783-1786,共4页

目的:研究不同生长周期的鼻咽癌低分化上皮细胞(CNE-2Z)的迁移能力及氯通道在迁移过程中所起的作用。方法:运用血清饥饿法、化学药物双阻断法、有丝分裂药物阻断及摇落法分别将CNE-2Z细胞同步化至细胞周期的G1、S、M期,流式细胞仪检测... 目的:研究不同生长周期的鼻咽癌低分化上皮细胞(CNE-2Z)的迁移能力及氯通道在迁移过程中所起的作用。方法:运用血清饥饿法、化学药物双阻断法、有丝分裂药物阻断及摇落法分别将CNE-2Z细胞同步化至细胞周期的G1、S、M期,流式细胞仪检测其同步化效果。结合应用迁移小室和图像分析法,测定迁移率。台盼蓝活细胞染色法测定药物的细胞毒性。结果:不同生长周期的细胞迁移能力不同,G1期细胞迁移能力最强,随后是M期,S期迁移能力最弱。氯通道阻断剂(ATP、NPPB、tamoxifen)抑制CNE-2Z细胞迁移,但不同的氯通道阻断剂对不同生长周期CNE-2Z细胞迁移的阻滞效应不相同。结论:CNE-2Z细胞的迁移能力与其所在的生长周期密切相关,氯通道在各期CNE-2Z细胞的迁移过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 细胞运动 氯通道 细胞周期

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ATP激活鼻咽癌细胞氯电流并减小细胞容积(英文) 被引量：2

11

作者 何庆丰 王立伟 +6 位作者 毛建文 孙雪荣 李攀 钟平 聂思槐 Tim JACOB 陈丽新 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期691-696,共6页

采用全细胞膜片钳技术和细胞容积测量技术,在低分化鼻咽癌细胞株CNE-2Z上观察ATP 诱导的Cl- 电流的特性及其对细胞容积的影响。细胞外微摩尔水平的ATP 以剂量依赖性的方式激活一个具有弱外向整流特性,没有时间依赖性失活的电流,此电流... 采用全细胞膜片钳技术和细胞容积测量技术,在低分化鼻咽癌细胞株CNE-2Z上观察ATP 诱导的Cl- 电流的特性及其对细胞容积的影响。细胞外微摩尔水平的ATP 以剂量依赖性的方式激活一个具有弱外向整流特性,没有时间依赖性失活的电流,此电流的反转电位 [(-0.05 ± 0.03) mV]接近Cl- 的平衡电位(-0.9 mV)。用葡萄糖酸置换细胞外液Cl- 后, ATP 激活的电流明显减小并且反转电位发生改变。氯通道抑制剂NPPB (200 μmol/L)可以抑制这一电流 [(81.03 ± 9.3)%] 。此电流亦可被嘌呤受体(P2Y) 拮抗剂反应蓝 2 抑制 [(67.39 ± 5.06)%]。50 μmol/L 的 ATP 使在等渗状态下的细胞容积缩小, 替代和耗竭细胞外、内的Cl- 后, ATP 的这一作用消失。这些结果提示细胞外微摩尔水平的 ATP 可通过兴奋 P2Y 受体激活氯通道而产生与细胞容积调节相关的Cl- 电流。 展开更多

关键词 氯通道 腺苷三磷酸 受体 嘌呤的 膜片钳技术 细胞大小

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