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三七总皂苷抗细胞凋亡作用与MIF/AMPK的关系研究 被引量：1
1
作者 陈少贤 刘居理 +6 位作者 刘晓颖 林秋雄 麦丽萍 朱杰宁 单志新 余细勇 杨敏 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期216-217,共2页
目的我们前期的研究表明三七总皂苷(panaxnotoginseng saponin,PNS)能够抗SGOD(serum,glucoseand oxygen deprivation)诱导的H9c2细胞凋亡,本论文我们进一步探讨PNS抗缺血诱导的心肌细胞凋亡的可能作用机制。方法将心肌H9c2细胞株分为... 目的我们前期的研究表明三七总皂苷(panaxnotoginseng saponin,PNS)能够抗SGOD(serum,glucoseand oxygen deprivation)诱导的H9c2细胞凋亡,本论文我们进一步探讨PNS抗缺血诱导的心肌细胞凋亡的可能作用机制。方法将心肌H9c2细胞株分为正常对照组(control),模型组(model)和PNS组。DCFH-DA和JC-1荧光探针分别检测细胞内活性氧的水平和线粒体膜电位,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡率,Western blot检测MIF,AMPK和磷酸化AMPK(p-AMPK)以及cleaved caspase-3蛋白的表达水平。结果与model组比较PNS能够稳定线粒体膜电位,降低胞内ROS水平;PNS抗细胞凋亡的作用能够被MIF拮抗剂ISO-1显著逆转(P=0.000);Western blot结果显示SGOD处理后能够明显的升高胞内活化的caspase-3蛋白(cleaved caspase-3)的表达水平,同时升高MIF和p-AMPK蛋白的表达水平,而PNS能够显著的降低cleaved caspase-3的蛋白水平,并进一步促进MIF和p-AMPK蛋白的表达。结论 PNS能够抗线粒体途径介导的心肌细胞凋亡,其抗凋亡的机制与激活MIF/AMPK有关。本研究将为进一步探讨PNS保护心脏的分子机制及将PNS更好地应用于临床治疗提供有意义的实验依据。 展开更多
关键词 心肌细胞凋亡 抗细胞凋亡 线粒体膜电位 表达水平 三七总皂苷 蛋白水平 检测 探讨 正常对照组 荧光探针
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大蒜素对大鼠离体肾内动脉血管张力的影响 被引量：1
2
作者 邝素娟 邓春玉 +7 位作者 张光燕 饶芳 单志新 林秋雄 杨敏 余细勇 钱卫民 吴书林 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期218-218,共1页
目的观察大蒜素(Allicin)对离体肾内动脉经血管收缩剂预收缩张力的影响,探讨其对微血管的作用机制。方法显微操作下取SD大鼠肾内动脉,制备成1.8～2.0 mm长的血管条,用两根不锈钢丝穿过血管腔,固定于微血管测定仪的浴槽内,置于37℃通有... 目的观察大蒜素(Allicin)对离体肾内动脉经血管收缩剂预收缩张力的影响,探讨其对微血管的作用机制。方法显微操作下取SD大鼠肾内动脉,制备成1.8～2.0 mm长的血管条,用两根不锈钢丝穿过血管腔,固定于微血管测定仪的浴槽内,置于37℃通有混合气体(95%O_2+5%CO_2)的生理盐溶液中。平衡1小时后,分别给予受体依赖性血管收缩剂苯肾上腺素(phenylephrine,PE)1μmol·L^(-1)、5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)2μmol·L^(-1)、血栓素A2类似物U46619 100 nmol·L^(-1)和非受体依赖性血管收缩剂60mmol·L^(-1) KCL预收缩血管,采用累积给药法加入大蒜素,观察不同浓度的大蒜素对血管张力的影响。结果大蒜素对PE、5-HT、U46619预收缩内皮完整的血管环,均呈浓度依赖性的舒张血管作用;对PE预收缩用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME(100 mmol·L^(-1))孵育30 min保留内皮的血管环以及采用机械法去除内皮的血管环,均呈浓度依赖性的舒张血管作用,与内皮完整组无比较统计学差异;对KCL预收缩内皮完整的血管环,各浓度的大蒜素均无明显的舒张血管作用。结论大蒜素对PE、5-HT、U46619预收缩的血管环具有浓度依赖性舒张作用,对KCL预收缩的血管环无舒张作用。提示其舒张血管的作用与受体途经有关,与L型钙通道途经无关,并且对PE预收缩血管的舒张作用不依赖于内皮功能的完整性。 展开更多
关键词 大蒜素 预收缩 血管收缩剂 肾内动脉 血管环 浓度依赖性 血管张力 血管条 内皮功能 微血管
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野生型和A294G突变型血管紧张素转换酶2基因真核表达质粒构建与鉴定
3
作者 雷和平 姚轻舟 +4 位作者 刘居理 林秋雄 邓春玉 朱杰宁 余细勇 《岭南心血管病杂志》 2011年第5期402-405,共4页
目的构建人野生型和突变型(A294G)血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)基因真核表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增人ACE2基因,与pcDNA3.1真核表达载体连接,构建pcDNA3.1-hACE2重组质粒,通过... 目的构建人野生型和突变型(A294G)血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)基因真核表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增人ACE2基因,与pcDNA3.1真核表达载体连接,构建pcDNA3.1-hACE2重组质粒,通过酶切和测序进行鉴定;以此野生型ACE2真核表达载体为模板,在pyrobest DNA高保真聚合酶的作用下利用体外定点突变法构建ACE2基因突变型重组质粒,用Dpn I限制性内切酶处理聚合酶链反应产物,直接转化DH5α感受态细胞,挑取克隆并提取相应质粒,测序加以验证。结果测序结果证实,野生型和突变型ACE2基因分别插入到pcDNA3.1+中,野生型ACE2基因序列与NCBI网站人ACE2基因全长编码序列(NCBI参考序列:NM_021804.2)相应片段一致,突变型(A294G)ACE2基因除第294位碱基A被G替代以外,其余序列与野生型一致。结论成功构建了人野生型和突变型ACE2的真核表达质粒,为下一步研究突变型ACE2的生物学功能以及ACE2在疾病发病机制中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 基因 血管紧张素转换酶2 点突变 质粒
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影响维持性血液透析患者血色素达标相关因素分析 被引量：1
4
作者 劳海燕 杨敏 +3 位作者 万波 郑志伟 刘双信 张燕丽 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期168-169,共2页
目的研究维持性血液透析治疗的慢性肾功能不全患者血色素达标情况,探讨影响维持性血液透析患者血色素达标的因素。方法选择在广东省人民医院血液净化中心进行维持性血液透析治疗1年以上,每周透析2-3次的慢性肾功能衰竭患者218例,根据血... 目的研究维持性血液透析治疗的慢性肾功能不全患者血色素达标情况,探讨影响维持性血液透析患者血色素达标的因素。方法选择在广东省人民医院血液净化中心进行维持性血液透析治疗1年以上,每周透析2-3次的慢性肾功能衰竭患者218例,根据血色素达标情况分为两组,即血色素达标组(68例)和血色素未达标组(150例)。回顾性调查分析两组患者的临床资料,采用单因素相关分析影响维持性血液透析患者血色素达标的相关因素。结果 218例入选的患者中,血色素达标患者有68例,达标率为31.19%。两组患者在应用输血治疗人数比例(P=0.047)、红细胞计数(P=0.000)、红细胞压积(P=0.000)、血清铁(P=0.047)和甘油三酯(P=0.045)上有显著差异;单因素相关分析显示两组患者在Hb与绝对网织红细胞计数(r=0.133,P=0.050)、平均红细胞血红蛋白含量(r=0.133,P=0.032)、红细胞计数(r=0.866,P=0.000)、红细胞压积(r=0.867,P=0.000)、血清铁(r=0.155,P=0.022)、白蛋白(r=0.155,P=0.022)、甘油三酯(r=0.191,P=0.005)正相关,与C-反应蛋白(r=-0.178,P=0.009)负相关。结论输血、营养不良、炎症状态、铁代谢障碍是影响维持性血液透析患者血色素达标的危险因素。 展开更多
关键词 维持性 血色素 血液透析患者 单因素相关分析 血液透析治疗 达标率 红细胞压积 甘油三酯 网织红细胞计数 血清铁
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AGT和CYP11B2基因型与非洛地平降压疗效无相关性
5
作者 钟诗龙 余细勇 +2 位作者 陈纪言 林曙光 冯颖青 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期218-219,共2页
目的研究原发性高血压患者血管紧张素原(AGT)基因A-6G(c.-44G>A,rs5051)及醛固酮合成酶(CYP11B2)基因T-344C(g.4660T>C,rs1799998)多态性对钙离子拮抗剂(CCB)非洛地平降压疗效的影响。方法采用前瞻性的设计,选择清洗期结束后血压... 目的研究原发性高血压患者血管紧张素原(AGT)基因A-6G(c.-44G>A,rs5051)及醛固酮合成酶(CYP11B2)基因T-344C(g.4660T>C,rs1799998)多态性对钙离子拮抗剂(CCB)非洛地平降压疗效的影响。方法采用前瞻性的设计,选择清洗期结束后血压符合要求的高血压患者接受5 mg/天非洛地平治疗。患者在治疗2、4、8周后进行随访。采用PCR结合直接测序或限制性内切酶(RFLP)的方法检测AGT基因启动子区A-6G多态性和CYP11B2基因T-344C多态性。结果治疗前,不同AGTA-6G基因型之间或者不同CYP11B2 T-344C基因型之间收缩压(SBP)和舒张压(DBP)的差异无统计学意义(P>0.05),治疗后各组患者的血压下降明显(所有P<0.01)。不同AGT A-6G基因型之间第8周的SBP和DBP以及8周后SBP和DBP降幅的差异无统计学意义(P>0.05)。AGTA-6G基因型对剂量方案调整没有明显的影响,分别有31.8%、35.7%和33.3%携带AA、AG和GG基因型的患者在第4周末需增加剂量(P=0.9329)。不同CYP11B2 T-344C基因型之间第8周的SBP和DBP以及8周后SBP和DBP降幅的差异无统计学意义(P>0.05)。GYP11B2基因型对剂量方案调整没有明显的影响,分别有26.6%、31.2%和35.62%携带CC、TC和TT基因型的患者在第4周末需增加剂量(P=0.6891)。结论不同AGT A-6G和CYP11B2 T-344C基因型对非洛地平的降压疗效没有明显影响。 展开更多
关键词 基因型 非洛地平 降压疗效 多态性 高血压患者 基因启动子 统计学意义 方案调整 血管紧张素原 醛固酮合成酶
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Ⅱ型糖尿病合并高血压大鼠的心肌细胞钙瞬变异常
6
作者 刘晓颖 符永恒 +4 位作者 张梦珍 刘福成 邝素娟 邓春玉 余细勇 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期218-218,共1页
目的建立Ⅱ型糖尿病合并高血压大鼠模型,评价动物心功能情况并测定模型大鼠心肌细胞钙瞬变特征。方法 STZ20 mg/kg一次性尾静脉推注后用自行设计配制的高脂饲料喂养SD大鼠,并给予0.02%L-Name溶液作为日常饮水,期间监测处理前后大鼠空腹... 目的建立Ⅱ型糖尿病合并高血压大鼠模型,评价动物心功能情况并测定模型大鼠心肌细胞钙瞬变特征。方法 STZ20 mg/kg一次性尾静脉推注后用自行设计配制的高脂饲料喂养SD大鼠,并给予0.02%L-Name溶液作为日常饮水,期间监测处理前后大鼠空腹血糖(FPG)、OGTT2h血糖(PG2h)及尾静脉血压。12周后麻醉大鼠,Mmode超声心动图测定心功能各项指标。完毕处死大鼠,分离心肌细胞用Fluo-4AM荧光指示剂负载后60HZ电刺激记录钙瞬变变化。结果 (1)饲喂12周后,模型组大鼠FPG>7.0 mmol/L(p,PG2h>11.1 mmol/L(P<0.01),尾静脉收缩压>140 mm Hg并显著高于对照组;(2)超声心动图监测分析结果:模型组左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)升高,左室后壁舒张末期厚度(LVPWd),左室射血分数(EF)及左室收缩百分率(EFS)下降(P<0.05);(3)电刺激后模型组心肌细胞钙瞬变达峰时程和半数衰减时程均显著长于对照组(P<0.05)。 展开更多
关键词 钙瞬变 大鼠心肌细胞 超声心动图 糖尿病合并高血压 心功能 模型组 尾静脉 电刺激 左室舒张末期内径 对照组
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b-3受体调控高糖诱导心脏MIF表达
7
作者 郑猛 刘晓颖 +2 位作者 符永恒 麦丽萍 余细勇 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期217-217,共1页
目的探讨高血糖对心肌炎性因子MIF和b3受体的影响。方法 6周龄雄性SD大鼠予低剂量链脲菌素,高脂、高糖喂养8周制作2型糖尿病模型。胸取左心室游离壁心肌,免疫组化法、western blot、免疫荧光检测心肌细胞MIF和b3AR蛋白表达量。H9C2细胞... 目的探讨高血糖对心肌炎性因子MIF和b3受体的影响。方法 6周龄雄性SD大鼠予低剂量链脲菌素,高脂、高糖喂养8周制作2型糖尿病模型。胸取左心室游离壁心肌,免疫组化法、western blot、免疫荧光检测心肌细胞MIF和b3AR蛋白表达量。H9C2细胞敲除b3AR后,高糖(30mM)处理48 h,检测MIF和b3AR。结果与对照组比较,链脲菌素干预组血糖、MIF及b3AR蛋白均明显增高(P<0.01)。高糖组H9C2细胞MIF及b3AR蛋白均增高,与野生型H9C2细胞比较,b3AR-/-组MIF减少。结论高糖通过上调心肌b3AR,导致MIF增加。 展开更多
关键词 高糖 链脲菌素 心肌细胞 受体 高血糖 免疫组化法 糖尿病模型 炎性因子 蛋白表达 荧光检测
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