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食品中副溶血弧菌荧光定量PCR方法快速检测 被引量：27
1
作者 翁文川 焦红 +3 位作者 王方金 程刚 王伟毅 谢钧宪 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1359-1361,共3页
目的利用荧光定量PCR技术,建立食品中副溶血弧菌污染的快速、准确的定量检测方法。方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列设计合成副溶血弧菌FQ-PCR诊断试剂盒,研究其灵敏度、特异性,并应用于模拟食品样本检测。结果在31株不同菌株的检测中,... 目的利用荧光定量PCR技术,建立食品中副溶血弧菌污染的快速、准确的定量检测方法。方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列设计合成副溶血弧菌FQ-PCR诊断试剂盒,研究其灵敏度、特异性,并应用于模拟食品样本检测。结果在31株不同菌株的检测中,8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其他23株弧菌科及其他菌属的菌株均为阴性;纯菌条件下定量检测低限10 cfu/ml;对模拟样本直接进行,检测低限为103cfu/g,经培养增菌后,检测低限则达到2 cfu/g。结论该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,检验周期仅需36 h,扩增与检测在封闭单管进行,可避免常规PCR方法易污染缺陷,具有很好的推广应用前景。 展开更多
关键词 荧光定量PCR 副溶血弧菌 定量检测
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食品中副溶血弧菌FQ-PCR快速检测方法的研究 被引量：7
2
作者 焦红 翁文川 +3 位作者 王方金 程刚 王伟毅 谢钧宪 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期457-460,共4页
目的利用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量方法。方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准... 目的利用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量方法。方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线。以副溶血弧菌菌株8株及同源、非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测。同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测。结果该方法有良好的特异性:8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其它24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,16株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性:阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间相关系数达到0.9871。在纯培养的条件下,其检测低限为10cfuml。对32个模拟样本直接进行定量检测,则检测低限在102cfug;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfug。结论该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景。 展开更多
关键词 荧光定量PCR副溶血弧菌 定量检测试剂盒
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食品中金属离子的微波消解-高效毛细管电泳法测定 被引量：8
3
作者 李辉 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期94-96,共3页
采用微波消解 -高效毛细管电泳法测定食品中的K、Na、Ca、Mg等金属离子 ;考察了微波消解的最佳条件 ;研究了背景电解质、缓冲液pH值、操作温度和分离电压等对电泳分离中运行电流、电渗迁移率、峰形等参数的影响 ,确定了金属离子电泳分... 采用微波消解 -高效毛细管电泳法测定食品中的K、Na、Ca、Mg等金属离子 ;考察了微波消解的最佳条件 ;研究了背景电解质、缓冲液pH值、操作温度和分离电压等对电泳分离中运行电流、电渗迁移率、峰形等参数的影响 ,确定了金属离子电泳分离的最佳实验条件 ;该法已应用于食品中金属离子的测定 ,并与原子吸收法进行比较 。 展开更多
关键词 微波消解 高效毛细管电泳 食品 金属离子 测定 分析
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水解衍生-酶联免疫分析在动物肌肉中呋喃唑酮代谢物残留量检测中的应用 被引量：8
4
作者 秦燕 朱柳明 +2 位作者 庄逸林 林峰 相大鹏 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期685-688,共4页
目的:优化并评估了水解衍生-酶联免疫方法在测定动物肌肉中抗生素呋喃唑酮代谢后结合残留物中的应用。方法:样品中的呋喃唑酮代谢物3-氨基-唑烷酮(3-amino-2-oxazolidone,AOZ)的蛋白结合残留物经酸水解释放 AOZ,经2-硝基苯甲醛(2-nitrob... 目的:优化并评估了水解衍生-酶联免疫方法在测定动物肌肉中抗生素呋喃唑酮代谢后结合残留物中的应用。方法:样品中的呋喃唑酮代谢物3-氨基-唑烷酮(3-amino-2-oxazolidone,AOZ)的蛋白结合残留物经酸水解释放 AOZ,经2-硝基苯甲醛(2-nitrobenzaldehyde,NBA)衍生生成3{[(2-nitrophenyl)methylene]-amino}-2-oxazolidinone(NPAOZ)后,调 pH 至7.2-7.4,经乙酸乙酯萃取后,10min/4000r·min^(-1)离心取上层氮气流于30℃吹干并用缓冲液溶解,正己烷脱脂后取下层水相进行 NPAOZ 的竞争性酶联免疫吸附分析(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。结果:方法定量检测限为200ng·kg^(-1),样本加标水平为1.0μg·kg^(-1)时,回收率在85%以上。实际样本对照实验显示 AOZ 质量浓度>1.0μg·kg^(-1)时,方法与 LC-MS-MS 结果的相对误差<25%。结论:此方法可实现动物肌肉中呋喃唑酮代谢物残留量的高通量筛选。 展开更多
关键词 呋喃唑酮 动物肌肉 代谢物 酶联免疫分析 残留量 衍生 酶联免疫吸附分析 酶联免疫方法 乙酸乙酯萃取 高通量筛选 蛋白结合 质量浓度 对照实验 相对误差 残留物 抗生素 唑烷酮 酸水解 苯甲醛 缓冲液 竞争性 正己烷 检测限
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鸡肝中链霉素残留的2种免疫分析法 被引量：14
5
作者 秦燕 鲍伦军 朱柳明 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期88-91,共4页
研究对比了鸡肝中链霉素残留的酶联免疫分析(ELISA)和CharmII放射免疫分析(RIA).ELISA分析中,链霉素标准在0 5～128 0μg/L的范围内呈良好线性,定量检测限为30μg/kg.RIA分析中,链霉素标准在25～500μg/L的分析浓度范围内相关性较好,筛... 研究对比了鸡肝中链霉素残留的酶联免疫分析(ELISA)和CharmII放射免疫分析(RIA).ELISA分析中,链霉素标准在0 5～128 0μg/L的范围内呈良好线性,定量检测限为30μg/kg.RIA分析中,链霉素标准在25～500μg/L的分析浓度范围内相关性较好,筛选水平为200μg/kg.2种方法的检测限、精密度、回收率等指标符合鸡肝链霉素残留监控的最大允许限量要求.ELISA方法对二氢链霉素的交叉反应率为155%. 展开更多
关键词 鸡 肝脏 链霉素 酶联免疫分析 放射免疫分析 抗生素
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饲料中八种磺胺药物的高效液相色谱测定 被引量：19
6
作者 秦燕 张美金 +1 位作者 林海丹 陈捷 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期88-91,共4页
结合液、液分配和固相萃取,建立了同时分析食用动物饲料中磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺甲基异唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶和磺胺喹啉8种磺胺类药物的高效液相色谱方法。比较和优化了不同的... 结合液、液分配和固相萃取,建立了同时分析食用动物饲料中磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺甲基异唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶和磺胺喹啉8种磺胺类药物的高效液相色谱方法。比较和优化了不同的提取方法和净化参数,方法对饲料中磺胺的检出限为0.20×10-6(w),八种磺胺添加水平为1×10-6(w)时,回收率在68%以上,相对标准偏差小于12%。 展开更多
关键词 磺胺 饲料 高效液相色谱
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副溶血性弧菌tdh基因的分子信标PCR技术检测 被引量：2
7
作者 万成松 谭翰清 温文川 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1475-1477,共3页
目的采用分子信标PCR技术进行副溶血性弧菌tdh基因检测。方法在反应体系中加入分子信标探针。对13株副溶血性弧菌和其他细菌分别进行tdh基因实时和终点法荧光检测。结果2株副溶血性弧菌和阳性质粒的终点法检测荧光值分别为114．9，95．2... 目的采用分子信标PCR技术进行副溶血性弧菌tdh基因检测。方法在反应体系中加入分子信标探针。对13株副溶血性弧菌和其他细菌分别进行tdh基因实时和终点法荧光检测。结果2株副溶血性弧菌和阳性质粒的终点法检测荧光值分别为114．9，95．2，90．0。实时PCR检测的CT值分别为26．2，26．8，32．0。其他肠道细菌终点法检测荧光值为47．0～69．1；CT值〉32．0或无值，与琼脂糖电泳分析结果一致。结论分子信标PCR技术可以准确、快速、实时、简便地进行副溶血性弧菌tdh基因检测。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌(VP) 分子信标 tdh基因 实时PCR
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