端粒酶永生化的人单克隆神经前体细胞系诱导表达多巴胺D_2受体 被引量：4

1

作者 扈启宽 林昌盛 +4 位作者 白云 白洁 何其华 沈丽 李凌松 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期271-273,共3页

目的 :检测人神经前体细胞系HNG12 10 E能否诱导表达多巴胺D2 受体mRNA和受体蛋白 ,表达的受体是否有生理功能。方法 :细胞因子诱导分化 ,RT PCR和免疫荧光染色检测D2 的表达 ;Fluo 3测定多巴胺刺激产生的胞浆Ca2 + 。结果 :RT PCR显示... 目的 :检测人神经前体细胞系HNG12 10 E能否诱导表达多巴胺D2 受体mRNA和受体蛋白 ,表达的受体是否有生理功能。方法 :细胞因子诱导分化 ,RT PCR和免疫荧光染色检测D2 的表达 ;Fluo 3测定多巴胺刺激产生的胞浆Ca2 + 。结果 :RT PCR显示D2 mRNA诱导后阳性 ,免疫荧光结果显示诱导后D2 受体蛋白在细胞膜表面阳性 ,Fluo3法测定胞浆Ca2 + ,结果显示诱导后的细胞对 5mmol·L-1多巴胺递质反应使胞浆Ca2 + 快速上升。结论 :从mRNA、蛋白和生理功能 3个层次均证明HNG12 10 E细胞系诱导后表达D2 。 展开更多

关键词 神经前体细胞 端粒酶永生化 多巴胺D2受体 细胞分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

一种有效提高纳豆激酶表达量的方法 被引量：3

2

作者 潘秋辉 谢秋玲 +3 位作者 洪岸 蒲含林 刘翠兰 廖美德 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期59-63,共5页

为提高纳豆激酶在大肠杆菌中的表达量 ,在不改变蛋白质序列的前提下 ,对纳豆激酶氨基端编码前 2 0个氨基酸的序列进行改造 ,以降低此区域的GC含量及稀有密码子数量 ,其中有 3个位点直接采用T ,另有 4个位点采取不确定突变的方式 ,产生 ... 为提高纳豆激酶在大肠杆菌中的表达量 ,在不改变蛋白质序列的前提下 ,对纳豆激酶氨基端编码前 2 0个氨基酸的序列进行改造 ,以降低此区域的GC含量及稀有密码子数量 ,其中有 3个位点直接采用T ,另有 4个位点采取不确定突变的方式 ,产生 1 6种组合 ,由此而得 1 6条序列 ,利用生物信息软件DNASISv2 5对这些序列的二级结构进行模拟 ,取得自由能绝对值最低的 6条序列设计引物 ,克隆至表达载体pET 3c,导入大肠杆菌BL2 1 (DE3) ,IPTG诱导表达 ,其中有 3株菌形成明显高效表达。 展开更多

关键词 纳豆激酶 表达量 翻译起始区 密码子偏好性

在线阅读 下载PDF 职称材料

脑细胞生长肽对GM耳毒性的预防作用 被引量：3

3

作者 康颂建 史献君 +2 位作者 魏佑震 洪岸 江新泉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期90-93,共4页

目的 :观察脑细胞生长肽 (cerebralcellgrowthpeptide ,CCGP)对庆大霉素 (gentamicin ,GM )引起的豚鼠耳中毒的预防作用。方法 :用脑干听觉诱发电位 (brainstemauditoryevokedpotential,BAEP)和组织化学方法分别检测动物听阈的变化和耳... 目的 :观察脑细胞生长肽 (cerebralcellgrowthpeptide ,CCGP)对庆大霉素 (gentamicin ,GM )引起的豚鼠耳中毒的预防作用。方法 :用脑干听觉诱发电位 (brainstemauditoryevokedpotential,BAEP)和组织化学方法分别检测动物听阈的变化和耳蜗毛细胞线粒体内琥珀酸脱氢酶 (succinatedehydrogenase ,SDH)及溶酶体内的酸性磷酸酶 (acidphosphatase ,ACP)活性变化 ,并在三组动物进行耳蜗受损毛细胞计数。 结果 :CCGP能降低GM引起的BAEP反应阈的上升幅度 ,保护耳蜗毛细胞SDH和维持溶酶体的完整性 ,减轻毛细胞的损伤。结论 :CCGP能降低GM的耳毒性 ;保护耳蜗毛细胞SDH ,维持毛细胞的能量代谢 ,减少溶酶体损伤 ,降低溶酶体内水解酶逸出引起的毛细胞自溶性损伤 ,可能是CCGP预防GM耳毒性的机制之一。 展开更多

关键词 脑细胞生长肽 庆大霉素 耳毒性

在线阅读 下载PDF 职称材料

由BMP-4基因转入C2C12细胞引起的成肌细胞到成骨细胞的表型转变(英文) 被引量：2

4

作者 汪炬 孙奋勇 +3 位作者 戴云 余榕捷 孙晋华 李明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期719-723,共5页

目的 :研究BMP - 4基因对C2C12细胞分化的影响。方法 :BMP - 4基因在pCI-neo质粒中构建后转入C2C12细胞。转入pCI-neo -BMP - 4重组质粒的细胞、转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在相同的条件下培养。结果 :转入pCI-neo质粒的细... 目的 :研究BMP - 4基因对C2C12细胞分化的影响。方法 :BMP - 4基因在pCI-neo质粒中构建后转入C2C12细胞。转入pCI-neo -BMP - 4重组质粒的细胞、转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在相同的条件下培养。结果 :转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在增殖期和分化期均不表达BMP - 4 ,在未分化期表现为典型的星形形态 ,并相互融合成细长而多核的肌小管。而转入pCI -neo -BMP - 4重组质粒的细胞在增殖期和分化期均大量表达BMP - 4 ,形态上不形成肌小管 ,而是形成类似成骨细胞的形态 ,并高水平表达碱性磷酸酶、在培养基中分泌骨钙素。结论 :表明将BMP - 4基因转入C2C12细胞可改变其肌源的分化途径 ,而分化为成骨细胞系 ,且这种分化转向是基因水平上的。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白质类 C2C12细胞 碱性磷酸酶 骨钙素

在线阅读 下载PDF 职称材料

碱性成纤维生长因子对大鼠视神经损伤的保护作用 被引量：10

5

作者 胡爱莲 孙葆忱 +2 位作者 董冬生 刘守彬 李校坤 《眼科新进展》 CAS 2000年第4期252-254,共3页

目的　探讨碱性成纤维生长因子 (b FGF)对视神经损伤的保护作用。方法　用精确校准方法在成年鼠造成部分视神经损伤模型 ,球后注射生理盐水、VB1 2 、b FGF。伤后 1h和 4wk测量闪光视神经诱发电位 (F- VEP)。结果　伤后 1h,F- VEP潜伏... 目的　探讨碱性成纤维生长因子 (b FGF)对视神经损伤的保护作用。方法　用精确校准方法在成年鼠造成部分视神经损伤模型 ,球后注射生理盐水、VB1 2 、b FGF。伤后 1h和 4wk测量闪光视神经诱发电位 (F- VEP)。结果　伤后 1h,F- VEP潜伏期延长且电位幅值降低 ,与正常比较有明显差异。伤后 4wk时生理盐水和 VB1 2 组对刺激没有应答 ,b FGF组 F- VEP接近正常。结论　 b FGF对视神经损伤后视神经节细胞和轴索退变有明显的保护作用。 展开更多

关键词 碱性成纤维生长因子 视神经损伤 视觉诱发电位

在线阅读 下载PDF 职称材料

提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺 被引量：1

6

作者 王莉馨 刘雅娟 +2 位作者 林剑 范洪学 金宁一 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第2期142-142,共1页

目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液... 目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果 :获得了重组质粒pLX2 ,pLX3 ,诱导后与表达质粒pLX1( 7.78% )相比 ,表达量分别为 8.0 3 % ,9.9% ,经纯化后获得的bFGF纯度达 98% ,ED50 为 2 .2 9ng/ml。结论 :调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量 。 展开更多

关键词 BFGF ATG SD序列 基因表达 纯化 碱性成纤维细胞因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

外用重组成纤维细胞生长因子(γFGF)临床等方面的开发和应用 被引量：1

7

作者 李校坤 杨晓明 +7 位作者 许华 黄亚东 郑青 洪岸 林剑 付小兵 郭振荣 郭立君 《医学研究通讯》 2002年第10期24-26,共3页

医药产业在发达国家成为支柱产业之一,占国内GNP的20～30%.现今发达国家有近4000家企业和科研机构从事生物医药产品的研究开发,生物医药产业创造的利润远高于其他传统产业创造的利润,并带动其他相关产业的发展,提供就业机会.

关键词 γFGF 重组成纤维细胞生长因子 医药产品 产品开发

在线阅读 下载PDF 职称材料

脑细胞生长肽对耳蜗琥珀酸脱氢酶的影响 被引量：1

8

作者 史献君 魏佑震 +2 位作者 康颂建 洪岸 李亚鲁 《泰山医学院学报》 CAS 2002年第4期324-326,共3页

目的　观察脑细胞生长肽 (CCGP)对庆大霉素 (GM )引起的耳蜗内琥珀酸脱氢酶 (SDH)的影响。方法　分别用脑干听觉诱发电位 (BAEP)和组织化学方法检测动物听阈的变化和耳蜗毛细胞线粒体内SDH活性变化。结果　CCGP能降低GM引起的BAEP反应... 目的　观察脑细胞生长肽 (CCGP)对庆大霉素 (GM )引起的耳蜗内琥珀酸脱氢酶 (SDH)的影响。方法　分别用脑干听觉诱发电位 (BAEP)和组织化学方法检测动物听阈的变化和耳蜗毛细胞线粒体内SDH活性变化。结果　CCGP能降低GM引起的BAEP反应阈的上升幅度和耳蜗毛细胞SDH活性 ;CCGP能保护耳蜗毛细胞SDH的活性 ,减轻了毛细胞的损伤。结论　CCGP能保护SDH的活性。保护耳蜗毛细胞SDH的活性 ,维持毛细胞的能量代谢 ,减轻毛细胞的损伤 。 展开更多

关键词 脑细胞生长肽 耳蜗 琥珀酸脱氢酶 影响 庆大霉素

在线阅读 下载PDF 职称材料

脑细胞生长肽对豚鼠耳蜗毛细胞内酸性磷酸酶的影响

9

作者 康颂建 史献君 +2 位作者 魏佑震 洪岸 李亚鲁 《泰山医学院学报》 CAS 2002年第3期189-191,共3页

目的　观察脑细胞生长肽 (Cerebraicellgrowthpeptide ,CCGP)对庆大霉素 (Gentamicin ,GM )引起的耳中毒豚鼠耳蜗毛细胞内酸性磷酸酶 (Acidphosphatase ,ACP)的影响。方法　分别用脑干听觉诱发电位 (Brainstemauditoryevokedpotential,B... 目的　观察脑细胞生长肽 (Cerebraicellgrowthpeptide ,CCGP)对庆大霉素 (Gentamicin ,GM )引起的耳中毒豚鼠耳蜗毛细胞内酸性磷酸酶 (Acidphosphatase ,ACP)的影响。方法　分别用脑干听觉诱发电位 (Brainstemauditoryevokedpotential,BAEP)和组织化学方法检测动物听阈的变化和耳蜗毛细胞溶酶体的变化。结果　CCGP能降低GM引起的BAEP反应阈的上升幅度 ,能保护耳蜗毛细胞溶酶体的完整性 ,减轻了毛细胞的损伤。结论　CCGP能降低GM的耳毒性。保护耳蜗毛细胞溶酶体的完整性 ,降低溶酶体水解酶逸出引起的毛细胞自溶性损伤 。 展开更多

关键词 脑细胞生长肽 耳蜗 庆大霉素 耳毒性 酸性磷酸酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

司马迁的义利观

10

作者 宁东俊 《华夏文化》 1998年第4期52-53,共2页

义利观是行为主体对客观世界和理想境界的评价性观点。具体而言，义利观总是基于人的客观需要，体现了人的理想，蕴含着一般的评价标准，形成一定的价值取向，外化为具体的行为规范，并作为稳定的思想定势，影响着经济思想的演进。不同... 义利观是行为主体对客观世界和理想境界的评价性观点。具体而言，义利观总是基于人的客观需要，体现了人的理想，蕴含着一般的评价标准，形成一定的价值取向，外化为具体的行为规范，并作为稳定的思想定势，影响着经济思想的演进。不同历史时期，不同个体行为，不同社会形... 展开更多

关键词 司马迁 经济思想 “义”与“利” 义利观 农工商虞 相互关系 价值取向 道德规范 物质生产 《史记·货殖列传》

在线阅读 下载PDF 职称材料

碱性成纤维细胞生长因子保护兔全脑缺血再灌流损伤的研究 被引量：6

11

作者 马岳峰 张茂 +5 位作者 江观玉 徐善祥 干建新 陶祥洛 洪岸 李校坤 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期23-26,共4页

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对全脑缺血-再灌流损伤的保护作用及机制。方法24只大白兔随机均分为假手术组(A组)、对照组(B组)和bFGF组(C组);C组再灌流后输入bFGF持续6h,B组应用等量生理盐水,A组仅分离血管。分别测定缺血前、... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对全脑缺血-再灌流损伤的保护作用及机制。方法24只大白兔随机均分为假手术组(A组)、对照组(B组)和bFGF组(C组);C组再灌流后输入bFGF持续6h,B组应用等量生理盐水,A组仅分离血管。分别测定缺血前、缺血30min及再灌流0.5、1、3、6h后血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100B蛋白及肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素1(IL1)、白细胞介素8(IL8)的水平,并比较脑水含量和病理损害情况。结果B组和C组的NSE、S100B于再灌流1h开始增高,6h达峰值,再灌流3h、6h时B组明显高于C组;TNFα缺血30min后升高,再灌流后和IL1、IL8一起升高,6h达峰值。TNFα、IL1在3h、6h时C组较B组为低,IL8差异无显著性。B、C两组脑水含量差异无显著性,后者病理损害轻。结论bFGF对全脑缺血-再灌流损伤有保护作用,其机制与减少再灌流过程中炎症因子生成及介导的损伤有关。 展开更多

关键词 碱性成纤维细胞生长因子 脑缺血-再灌流损伤 神经元特异性烯醇化酶 炎症介质

原文传递

碱性成纤维细胞生长因子对兔全脑缺血再灌注后血清炎症因子的影响 被引量：1

12

作者 马岳峰 张茂 +5 位作者 江观玉 徐善祥 干建新 陶祥洛 洪岸 李校坤 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期449-451,共3页

关键词 碱性成纤维细胞生长因子 全脑缺血再灌注 炎症因子 心脏骤停 FGF 血清 肿瘤 发现 脏器 坏死

原文传递