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海藻糖的生物合成与分解途经及其生物学功能 被引量:13
1
作者 杨平 李敏惠 +2 位作者 潘克俭 王玉明 苏晓庆 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期233-236,共4页
海藻糖是一类在干旱、低温、热击或脱水等逆境环境下具有独特抗逆保护作用的二糖,广泛分布于藻类、细菌、真菌和动植物体内。近年来,随着对海藻糖研究的深入,海藻糖已经被广泛应用到食品、医药、化妆品和分子生物学研究等领域。该文简... 海藻糖是一类在干旱、低温、热击或脱水等逆境环境下具有独特抗逆保护作用的二糖,广泛分布于藻类、细菌、真菌和动植物体内。近年来,随着对海藻糖研究的深入,海藻糖已经被广泛应用到食品、医药、化妆品和分子生物学研究等领域。该文简述了海藻糖在生物体内的代谢途径、生物学功能和研究进展,并对灭蚊真菌Pythiumsp.GY1938菌株海藻糖代谢酶基因的研究前景加以展望。 展开更多
关键词 海藻糖 海藻糖酶 真菌
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HIF-1α和VEGF在结肠癌组织和SW480细胞中表达的生物学意义 被引量:5
2
作者 潘克俭 赖雁 +1 位作者 梁素华 樊元春 《川北医学院学报》 CAS 2007年第4期316-319,共4页
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在结肠癌组织中的表达与肿瘤组织学分级关系,以及HIF-1α和VEGF之间的相关性;缺养环境对人结肠癌SW480细胞中HIF-1α和VEGF表达的影响。方法用免疫组织化学方法染色显示... 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在结肠癌组织中的表达与肿瘤组织学分级关系,以及HIF-1α和VEGF之间的相关性;缺养环境对人结肠癌SW480细胞中HIF-1α和VEGF表达的影响。方法用免疫组织化学方法染色显示结肠癌组织中HIF-1α和VEGF的表达,分析HIF-1α、VEGF表达随结肠癌组织学分级的变化及二者之间的关系;RT-PCR研究SW480细胞HIF-1α和VEGF表达在常氧与缺氧时的差异。结果HIF-1α和VEGF蛋白均在结肠癌组织中表达,且表达水平随结肠癌组织学分级提高而上升;各级结肠癌组织中HIF-1α和VEGF的表达呈正相关性;缺氧诱导SW480细胞的VEGF mRNA表达上升。结论HIF-1α和VEGF的表达随结肠癌恶性程度的增高而增强。 展开更多
关键词 结肠癌 HIF-lα VEGF 缺氧
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中国人和日本人膳食组成、体力活动及血脂含量比较:成都-福研究 被引量:1
3
作者 傅明德 刘秉文 +1 位作者 张祖辉 吴兆丰 《华西医科大学学报》 CSCD 1996年第1期26-30,共5页
对中国成都326例成人,116例大学生以及日本福冈300例成人,4529例大学生的膳食组成、体力活动及血脂含量进行了比较研究。结果表明:中国人摄取较多的碳水化合物,其谷物热量/总热量及多不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸比值均... 对中国成都326例成人,116例大学生以及日本福冈300例成人,4529例大学生的膳食组成、体力活动及血脂含量进行了比较研究。结果表明:中国人摄取较多的碳水化合物,其谷物热量/总热量及多不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸比值均较高,而且中国人体力活动指数也较高;但是中国人脂肪及蛋白质摄入量则较低,动物脂肪/总脂肪的比值也较低(P<0.001).血脂分析表明,除女性甘油三酯含量外,中国成人血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇的水平显著低于相应的日本人(P<0.001)。 展开更多
关键词 膳食组成 体力活动 血脂 中国 日本
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可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及性质研究 被引量:9
4
作者 李灵玲 张涛 余蓉 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期177-179,共3页
目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶(PP)并研究其部分酶学性质。方法将PP偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上,制备得到水溶性固定化PP,并测定游离和水溶性固定化PP最适作用pH、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳... 目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶(PP)并研究其部分酶学性质。方法将PP偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上,制备得到水溶性固定化PP,并测定游离和水溶性固定化PP最适作用pH、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性。结果最适作用pH分别为6.0、5.0,最适作用温度分别为60℃、70℃,Km值分别为2.53、3.07 mg.m l-1;可溶性固定化PP在60℃条件下,保温12 h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30 d后活性保留达90%以上;在pH6时稳定性最好,pH4-7范围内也较稳定(相对活性>80%)。结论可溶性固定化PP能够在大于pH5.5的溶液中完全溶解,最适作用pH范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热和酸碱的稳定性均明显增强。 展开更多
关键词 可溶性固定化酶 木瓜蛋白酶 酶学性质 偶联
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昆虫抗菌肽及其基因工程研究进展 被引量:9
5
作者 李敏惠 杨平 何正波 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期437-440,共4页
昆虫抗菌肽是一类具有免疫效应的小分子多肽,它具有热稳定、抗菌谱广、无免疫原性、作用机制独特等特性,是昆虫能够抵御自然界中许多有害微生物侵染的重要因素.近年来,随着有关抗菌肽作用机理及功能研究的深入,其在医药领域的应用越来... 昆虫抗菌肽是一类具有免疫效应的小分子多肽,它具有热稳定、抗菌谱广、无免疫原性、作用机制独特等特性,是昆虫能够抵御自然界中许多有害微生物侵染的重要因素.近年来,随着有关抗菌肽作用机理及功能研究的深入,其在医药领域的应用越来越引起人们的关注.本文就昆虫抗菌肽的分类、生物功能、基因工程研究进展等作一综述. 展开更多
关键词 抗菌肽 昆虫 基因工程
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高校研究型中心实验室建设与管理的新探索 被引量:6
6
作者 李敏惠 杨平 邹强 《实验技术与管理》 CAS 2008年第3期103-104,128,共3页
在实验室管理体制的改革探索过程中,建立具有多功能技术平台的中心实验室,是当前高校研究型实验室改进管理弊端的必由之路。文章以成都医学院院级实验室——科研实验中心为例,详细介绍了该中心“开放、共享”的特点,以及“共建、共... 在实验室管理体制的改革探索过程中,建立具有多功能技术平台的中心实验室,是当前高校研究型实验室改进管理弊端的必由之路。文章以成都医学院院级实验室——科研实验中心为例,详细介绍了该中心“开放、共享”的特点,以及“共建、共管、共用”的人性化管理模式。 展开更多
关键词 实验室 管理 高校
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HIF-1α基因表达下调对人结肠癌SW480细胞增殖和VEGF表达的影响 被引量:3
7
作者 潘克俭 罗凤鸣 +3 位作者 刘小菁 姚文柱 王玉明 李亚 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2007年第17期1583-1586,共4页
目的:研究转录因子-缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在缺氧条件下对人结肠癌SW480细胞增殖的作用,以及HIF-1α对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,研究HIF-1α调节SW480细胞增殖的机制.方法:构建针对HIF-1α的pSu-per-EGFPsiRNA表达载体,转... 目的:研究转录因子-缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在缺氧条件下对人结肠癌SW480细胞增殖的作用,以及HIF-1α对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,研究HIF-1α调节SW480细胞增殖的机制.方法:构建针对HIF-1α的pSu-per-EGFPsiRNA表达载体,转染SW480细胞,抑制HIF-1α的表达,RT-PCR和WesternBlot检测抑制结果;MTT法检测HIF-1α被抑制后,SW480在缺氧培养条件下的增殖情况;RT-PCR和WesternBlot检测VEGF的表达.结果:缺氧培养条件下,HIF-1α和VEGF表达明显上升;转染pSuper-EGFPsiRNA表达载体后,SW480细胞HIF-1αmRNA和蛋白质的表达大幅下降;SW480细胞增殖下降(P<0.05);而在缺氧培养条件下有较高表达的VEGF,其mRNA和蛋白质的表达也大幅下降.结论:HIF-1α在缺氧条件下,对SW480细胞在增殖有影响,其机制可能是通过在缺氧时上调节VEGF等细胞生长因子的表达,进而调节肿瘤细胞生长. 展开更多
关键词 缺氧诱导因子 血管内皮生长因子类 RNA干扰 SW480细胞增殖
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新分离的灭蚊真菌(Pythium sp.GY1938)对家蝇幼虫的安全性检测 被引量:9
8
作者 杨平 刘萍 +1 位作者 苏晓庆 吴建伟 《贵阳医学院学报》 CAS 2006年第3期203-204,207,共3页
目的:检测新分离的灭蚊真菌(Pythiumsp.代号GY1938)对非靶生物家蝇(Musca dom esticaV ic ina)幼虫的安全性。方法:用分别拌以高(1%)、中(0.5%)和低(0.1%)剂量该真菌菌丝悬液的家蝇饲料饲养家蝇幼虫,并以不加真菌的家蝇饲料饲养的家蝇... 目的:检测新分离的灭蚊真菌(Pythiumsp.代号GY1938)对非靶生物家蝇(Musca dom esticaV ic ina)幼虫的安全性。方法:用分别拌以高(1%)、中(0.5%)和低(0.1%)剂量该真菌菌丝悬液的家蝇饲料饲养家蝇幼虫,并以不加真菌的家蝇饲料饲养的家蝇幼虫作对照。待幼虫成熟后,拣出幼虫并计数,计算幼虫拣出率。并观察幼虫的外形,称体重。结果:实验组家蝇幼虫的外形和体重与对照组无显著性差异。结论:灭蚊真菌Pyth-ium sp.GY1938对家蝇没有毒性作用。 展开更多
关键词 灭蚊 真菌 安全 家蝇 害虫防治 生物学
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Pythium sp.GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因的克隆与序列分析 被引量:4
9
作者 杨平 李敏惠 苏晓庆 《成都医学院学报》 CAS 2006年第1期5-8,共4页
目的克隆Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因。方法在已经克隆得到的Pythi- um sp.GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶cDNA片段的基础上,首先通过PCR扩增得到与其相对应的基因组DNA片段,然后分别通过Mini基因组DNA文库法和Panhandle... 目的克隆Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因。方法在已经克隆得到的Pythi- um sp.GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶cDNA片段的基础上,首先通过PCR扩增得到与其相对应的基因组DNA片段,然后分别通过Mini基因组DNA文库法和Panhandle PCR法扩增其上游和下游未知片段,最后通过PCR法扩增得到类枯草菌素蛋白酶基因片段。结果克隆得到1 519bp Pr1蛋白酶基因序列YP1977.DNAassist软件分析其中含有一个969bp的完整的开放阅读框,编码323个氨基酸,NCBI BlastX比对结果显示,该阅读框可能编码的氨基酸序列与多个物种的Pr1蛋白酶都具有较高的同源性。结论YP1977很可能是Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因的部分片段,但仍需要进一步通过构建表达系统加以验证。 展开更多
关键词 类枯草菌素蛋白酶 克隆 基因组文库 锅柄聚合酶链式反应
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五种破壁方法提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense总RNA效果的比较 被引量:2
10
作者 杨平 陈慧娟 +3 位作者 钟文英 邓未 黄杰 李敏惠 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2011年第4期242-246,共5页
为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法,我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁,再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA,最后通过... 为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法,我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁,再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA,最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高,OD260/OD280=2.093±0.264,RNA浓度为(0.134±0.021)μg/μL,RNA制备效率为(26.76±4.10)μg/g菌丝体,并且该方法操作简便,重复性最好,是制备P.guiyangense菌株总RNA的首选破壁方法。 展开更多
关键词 贵阳腐霉Pythium guiyangense 破壁 总RNA
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二硫苏糖醇和β-巯基乙醇在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应 被引量:2
11
作者 杨平 李敏惠 +4 位作者 常山 何建荣 罗兴艳 刘阳 邹强 《医学研究生学报》 CAS 2009年第9期916-919,共4页
目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品... 目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品和未还原蛋白样品间隔上样进行电泳,通过观察未还原样品的电泳条带来判断是否受到邻近泳道还原剂的扩散影响。结果:还原剂DTT或2-ME可扩散到邻近泳道,使未还原蛋白样品发生部分还原,扩散效应的强弱与还原剂的含量成正相关。结论:SDS-PAGE电泳过程中DTT和2-ME均存在扩散效应,在同一块凝胶上同时分离还原蛋白和未还原蛋白时,至少应该在2个泳道间设置一空白泳道,以规避扩散效应。 展开更多
关键词 还原剂 扩散效应 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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用SDS-PAGE和Vorum银染法比较真菌菌丝体破壁效果 被引量:2
12
作者 李敏惠 潘克俭 +3 位作者 宋丽萍 钟文英 邹珂珂 杨平 《生物技术通讯》 CAS 2011年第6期867-869,共3页
目的:研究不同处理方法对丝状真菌Pythium sp.GY1938菌丝体破壁效果的差异。方法:采用7种方法对真菌菌丝体进行破壁处理,将制备的胞内可溶蛋白质样品通过SDS-PAGE和Vorum法银染处理,比较不同破壁方法处理后蛋白质释放效果的优劣。结果:... 目的:研究不同处理方法对丝状真菌Pythium sp.GY1938菌丝体破壁效果的差异。方法:采用7种方法对真菌菌丝体进行破壁处理,将制备的胞内可溶蛋白质样品通过SDS-PAGE和Vorum法银染处理,比较不同破壁方法处理后蛋白质释放效果的优劣。结果:方法VI(石英砂、液氮、研磨)的破壁效果最好,蛋白质的分离效率和提取质量最高。结论:方法VI适合于丝状真菌Pythium sp.GY1938蛋白组学研究中目的蛋白的提取。 展开更多
关键词 丝状真菌 PYTHIUM sp.GY1938 破壁 银染
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ABCA1基因变异与血浆高密度脂蛋白胆固醇水平的关系 被引量:1
13
作者 李亚 王玉明 +1 位作者 贺勇 潘克俭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期2347-2349,共3页
目的探讨腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ATP-binding transporter A1,ABCA1)基因多态性与汉族人群血浆高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术检测... 目的探讨腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ATP-binding transporter A1,ABCA1)基因多态性与汉族人群血浆高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术检测376例无血缘关系的正常汉族人ABCA1基因M883I、R1587K和R219K多态性。结果研究人群中KK1587基因型者HDL-C水平明显低于RR1587和RK1587基因型者(P<0.05)。按性别分层后,仅女性KK1587基因型者HDL-C水平低于RR1587和RK1587基因型者(P<0.01)。一般线性模型分析显示,R1587K多态对女性个体HDL-C水平变异的贡献度为2.3%(P<0.01)。结论ABCA1基因M883I和R219K多态与汉族人群HDL-C水平无关,但K1587等位基因以隐性作用方式与女性HDL-C水平降低有关。 展开更多
关键词 腺苷三磷酸结合盒转运体A1基因 冠状动脉粥样硬化性心脏病 高密度脂蛋白胆固醇
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可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质研究 被引量:1
14
作者 刘桦 林玲 +1 位作者 王玉明 何浪 《成都医学院学报》 CAS 2006年第1期37-40,43,共5页
目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶并对其部分酶学性质进行研究。方法将木瓜蛋白酶偶联在亲水性高分子聚合物羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上制备得到水溶性固定化木瓜蛋白酶。在相同的条件下测定游离的木瓜蛋白酶和水溶性固定化木... 目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶并对其部分酶学性质进行研究。方法将木瓜蛋白酶偶联在亲水性高分子聚合物羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上制备得到水溶性固定化木瓜蛋白酶。在相同的条件下测定游离的木瓜蛋白酶和水溶性固定化木瓜蛋白酶的活力,得到两种状态的酶的最适作用pH值和最适作用温度,再于它们各自的最适条件下测定活力,得到各自的Km值;在相同的条件下测定两种状态的酶的热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性。结果游离木瓜蛋白酶和可溶性固定化木瓜蛋白酶的最适作用pH值分别为6.0和5.0,最适作用温度分别为60℃和70℃,Km值分别为2.53、3.07mg·ml^(-1);可溶性固定化木瓜蛋白酶在60%条件下,保温12h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30d后活性保留达90%以上;在pH6.0时稳定性最好,在pH4.0~7.0范围内也比较稳定(相对活性>80%)。结论可溶性固定化木瓜蛋白酶能够在pH5.5以上的溶液中完全溶解,最适作用pH值范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热稳定性和酸碱稳定性均明显增强。 展开更多
关键词 可溶性固定化酶 木瓜蛋白酶 酶学性质
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昆虫抗菌肽及其基因工程研究进展 被引量:1
15
作者 李敏惠 杨平 《成都医学院学报》 CAS 2006年第1期66-70,76,共6页
昆虫抗菌肽是一类具有免疫效应的小分子多肽,它具有热稳定、抗菌谱广、无免疫原性、作用机制独特等特性,是昆虫能够抵御自然界中有害微生物侵染的重要因素。近年来,随着有关抗菌肽作用机理及功能研究的深入,其在医药领域的研究越来越引... 昆虫抗菌肽是一类具有免疫效应的小分子多肽,它具有热稳定、抗菌谱广、无免疫原性、作用机制独特等特性,是昆虫能够抵御自然界中有害微生物侵染的重要因素。近年来,随着有关抗菌肽作用机理及功能研究的深入,其在医药领域的研究越来越引起人们的关注。本文就昆虫抗菌肽的分类、生物功能、基因工程研究进展以及在医药领域的应用等作一综述。 展开更多
关键词 昆虫 抗菌肽 基因工程
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PLA表位肽免疫微球诱导CTL对肝癌细胞的杀伤作用
16
作者 陈玮 潘克检 +1 位作者 蔡美英 魏大鹏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第3期167-170,共4页
目的:考察两种载肽聚乳酸((polylatic acid,PLA)免疫微球M1(hAFP158~166)和M2(hAFP218~226)在体外诱导特异性CTL的能力及其对肝癌细胞的杀伤作用。方法:制备分别荷载表位肽hAFP158~166、hAFP218~226的PLA免疫微球M1和M2... 目的:考察两种载肽聚乳酸((polylatic acid,PLA)免疫微球M1(hAFP158~166)和M2(hAFP218~226)在体外诱导特异性CTL的能力及其对肝癌细胞的杀伤作用。方法:制备分别荷载表位肽hAFP158~166、hAFP218~226的PLA免疫微球M1和M2,体外刺激HLA—A2^+健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC)作为效应细胞,实验分为3组:对照组、hAFP表达组和hAFP阴性组。采用标准^(51)Cr释放法检测CTL杀伤活性。结果:两种免疫微球在体外均能刺激人PBMC增殖,形成大量可见克隆;两者诱导的效应细胞对hAFP^+的荷肽他细胞、HepG-2和Alexander的杀伤率均达75%以上,均显著高于不表达hAFP的膀胱癌细胞BTT和未荷肽的他细胞,差异非常显著(P<0,01),而两者杀伤活性之间没有明显差异(P>0.05)。结论:两种载肽聚乳酸免疫微球均能在体外诱导产生特异性CTL,并对表达靶抗原的肝癌细胞有较强杀伤作用。 展开更多
关键词 肝癌细胞 聚乳酸微球 AFP CTL表位肽
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RNAi的触发机制及其在哺乳动物基因功能分析中的应用
17
作者 杨平 李敏惠 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期15-19,共5页
RNAi是外源和内源性dsRNA在细胞内诱导具有同源序列的基因瞬时或稳定表达抑制的现象,是一种在实验室中进行基因功能分析的强大工具。本文将对RNAi的触发机制、哺乳动物细胞内触发RNAi的3种触发子(siRNA、shRNA、shRNAmir)及RNAi在基因... RNAi是外源和内源性dsRNA在细胞内诱导具有同源序列的基因瞬时或稳定表达抑制的现象,是一种在实验室中进行基因功能分析的强大工具。本文将对RNAi的触发机制、哺乳动物细胞内触发RNAi的3种触发子(siRNA、shRNA、shRNAmir)及RNAi在基因功能分析中的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 RNAI SIRNA SHRNA shRNAmir
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高糖诱导血管内皮细胞表达结缔组织生长因子的影响
18
作者 张磊 王西岩 潘克俭 《西部医学》 2009年第5期719-721,共3页
目的观察高糖对血管内皮细胞表达结缔组织生长因子(connective tissue growth facotr,CTGF)的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(human umibilical vein endotheial cells,HUVECs),分别在含正常葡萄糖(5.5 mM)、高糖(25 mM葡萄糖)、25... 目的观察高糖对血管内皮细胞表达结缔组织生长因子(connective tissue growth facotr,CTGF)的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(human umibilical vein endotheial cells,HUVECs),分别在含正常葡萄糖(5.5 mM)、高糖(25 mM葡萄糖)、25 mM甘露醇及高糖加转化生长因子β1(transforming frowth factorβ1,TGFβ1)中和抗体的培养基中培养24、48或72小时,并在相应时间点收集细胞总RNA及总蛋白。分别用半定量RT-PCR及Western Blot方法检测CTGF mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与正常葡萄糖培养及25mM甘露醇对照组相比,高糖刺激24小时后,HUVECs的CTGF mRNA及蛋白表达水平均显著增加,并且这种作用持续到48小时。TGFβ1的中和抗体能部分阻断高糖的这种刺激作用。结论高糖能诱导HUVECs表达CTGF,而内皮细胞CTGF的表达增加可能是高糖参与动脉粥样硬化等心血管疾病发生的机制之一。 展开更多
关键词 高糖 血管内皮细胞 结缔组织生长因子
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几种差异序列分析方法的比较及其研究前景
19
作者 李敏惠 杨平 曹月青 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期1008-1010,共3页
分离和鉴定不同生物基因的差异序列,有助于功能基因的分离,揭开物种间进化的规律,阐明某些疾病相关基因的作用机理。本文简述了几种近年来常用的筛选差异基因的方法,特别是最新发表的杂交监控差异分析法(HMDA)的原理、适用范围及其特点... 分离和鉴定不同生物基因的差异序列,有助于功能基因的分离,揭开物种间进化的规律,阐明某些疾病相关基因的作用机理。本文简述了几种近年来常用的筛选差异基因的方法,特别是最新发表的杂交监控差异分析法(HMDA)的原理、适用范围及其特点,重点探讨了HMDA法在真核基因组差异序列筛选中的技术性突破及其研究前景。 展开更多
关键词 基因组 差异序列 杂交监控差异分析法
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固态发酵贵州绿僵菌产壳聚糖酶的亲和层析纯化及其性质研究 被引量:5
20
作者 杨俐 张涛 +1 位作者 李晓红 余蓉 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期713-716,共4页
目的寻找壳聚糖酶新酶源并简化壳聚糖酶纯化工艺。方法将贵州绿僵菌固态发酵物粗提液经交联壳聚糖树脂层析,以5‰Cu2+洗脱,洗脱液透析浓缩后经Superdex75层析。结果该菌株在发酵120h时,每克干培养基酶活力可达(83.09±2.9)U。经亲... 目的寻找壳聚糖酶新酶源并简化壳聚糖酶纯化工艺。方法将贵州绿僵菌固态发酵物粗提液经交联壳聚糖树脂层析,以5‰Cu2+洗脱,洗脱液透析浓缩后经Superdex75层析。结果该菌株在发酵120h时,每克干培养基酶活力可达(83.09±2.9)U。经亲和层析和分子筛分离可获得电泳纯的壳聚糖酶,酶活力回收率为43.52%。每克干培养基可获壳聚糖酶328μg,比活达106.39U/mg。酶蛋白相对分子质量为50.3×103。结论固态发酵贵州绿僵菌生产壳聚糖酶可作为壳聚糖酶的新酶源。用交联壳聚糖树脂亲和层析、Cu2+洗脱和分子筛分离的方法可以纯化壳聚糖酶。 展开更多
关键词 贵州绿僵菌 固态发酵 壳聚糖酶 亲和层析 交联壳聚糖树脂 CU2+
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