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半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对脑缺血再灌注大鼠Bcl-2、Bax和Beclin-1的表达及细胞凋亡的影响 被引量：12
1
作者 陈萌 田焕娜 +2 位作者 吴晓光 王爱乐 陈元操 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期417-420,F0003,共5页
目的:应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测Bcl-2、Bax、Beclin-1阳性细胞的表达,探讨自噬蛋白Beclin-1与凋亡之间的关系。方法:成年雄性SD大鼠随机分成假手术组(Sham组),缺血再灌注组(I/R... 目的:应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测Bcl-2、Bax、Beclin-1阳性细胞的表达,探讨自噬蛋白Beclin-1与凋亡之间的关系。方法:成年雄性SD大鼠随机分成假手术组(Sham组),缺血再灌注组(I/R组),Cys C低、中、高浓度组。用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血2 h再灌注24 h。采用免疫印迹半定量检测损伤中心脑皮质组织凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Beclin-1的表达;免疫组织化学检测Bcl-2、Bax和Beclin-1阳性细胞数;TUNEL染色法检测脑组织细胞凋亡。结果:与I/R组相比,Cys C低、中浓度组Bcl-2的表达有不同程度的升高,Bax的表达降低,细胞凋亡减少;而Cys C高浓度组Bcl-2的表达明显降低,Bax的表达显著上升,细胞凋亡增加;Cys C各浓度组Beclin-1的表达都有不同程度的升高。凋亡细胞与Beclin-1表达的相关性分析显示,Cys低、中浓度组细胞的自噬和凋亡呈负相关;Cys C高浓度组细胞的自噬和凋亡呈正相关。结论:Cys C在一定浓度范围内,随自噬蛋白Beclin-1表达的升高可抑制细胞的凋亡,对缺血再灌注损伤脑组织具有保护作用。其作用机制和Bcl-2的表达上调,Bax的表达下调有关;而Cys C较高浓度则无上述作用。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 调亡 自噬 BECLIN-1 BCL-2 BAX 大鼠
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抑制mTOR通路对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的影响 被引量：3
2
作者 陈萌 郭森 +2 位作者 王爱乐 李海艳 杜超 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期246-250,共5页
目的：应用哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,m TOR）抑制剂Cystatin C,探讨其对局灶性脑缺血再灌注大鼠自噬的影响。方法：成年雄性SD大鼠60只（体质量260~280 g）,随机分为假手术组（sham）、缺血再灌注组（I/... 目的：应用哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,m TOR）抑制剂Cystatin C,探讨其对局灶性脑缺血再灌注大鼠自噬的影响。方法：成年雄性SD大鼠60只（体质量260~280 g）,随机分为假手术组（sham）、缺血再灌注组（I/R）、Cystatin C组（根据不同浓度分为低、中、高3个亚组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）,每组12只。I/R组和Cystatin C组采用线栓法制备大鼠右侧脑缺血再灌注损伤模型。缺血2 h再灌注24 h,观察神经功能缺损评分、测定脑梗死体积;应用Western Blot技术检测损伤脑皮质中自噬标志物LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ和Beclin-1的变化。结果：与I/R组相比,Cystatin CⅠ、Ⅱ组大鼠神经功能缺损评分和脑梗死体积减少,而Cystatin CⅢ组大鼠神经功能缺损评分和脑梗死体积增大。I/R组脑皮质中自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1表达明显升高（P〈0.05）;Cystatin C各组脑皮质中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的表达逐步升高,且与浓度呈正相关。结论：m TOR抑制剂Cystatin C干预脑缺血再灌注大鼠可诱导脑皮质组织自噬,Cystatin CⅠ、Ⅱ组可减轻脑组织损伤,而Cystatin CⅢ组则加重脑组织损伤。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 mTOR 自噬 CYSTATIN C LC3 BECLIN-1 大鼠
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MST1过表达抑制宫颈癌细胞系SiHa的增殖、迁移和侵袭 被引量：2
3
作者 郑小影 郝云涛 +4 位作者 马卫军 韩莉 赵淑敏 连相尧 张玉娟 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第3期351-354,共4页
目的探讨哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)对子宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法Western blot检测正常宫颈上皮细胞H8与宫颈癌细胞SiHa中MST1的表达;构建p J3H-HA-MST1质粒并转染SiHa细胞系,Western blot检测MST1、Ki-67和... 目的探讨哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)对子宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法Western blot检测正常宫颈上皮细胞H8与宫颈癌细胞SiHa中MST1的表达;构建p J3H-HA-MST1质粒并转染SiHa细胞系,Western blot检测MST1、Ki-67和MMP9的蛋白表达;MTS、划痕实验和Transwell分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 SiHa细胞的MST1蛋白表达水平明显低于H8细胞(P<0.05);SiHa细胞转染MST1质粒后,MST1蛋白表达明显升高,而Ki-67和MMP9蛋白表达水平显著下降(P<0.05),SiHa细胞的增殖被明显抑制(P<0.05),同时细胞的迁移和侵袭能力也显著降低(P<0.01)。结论 MST1过表达可以抑制宫颈癌细胞SiHa的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 哺乳动物不育系20样激酶1 宫颈癌 增殖 迁移 侵袭
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思维导图在《医用电子显微学》教学设计中的应用 被引量：1
4
作者 陈萌 赵淑敏 《承德医学院学报》 2015年第3期262-263,共2页
思维导图是一种依据辐射状的思维方式建立起来的图形工具,它可以充分利用记忆、阅读、思维的规律,协调左右脑的功能;同时,运用图像、文字（音频、视频）并重的技巧,把各级主题的关系用相互隶属以及相关的层级图形表现出来,通过关键词与... 思维导图是一种依据辐射状的思维方式建立起来的图形工具,它可以充分利用记忆、阅读、思维的规律,协调左右脑的功能;同时,运用图像、文字（音频、视频）并重的技巧,把各级主题的关系用相互隶属以及相关的层级图形表现出来,通过关键词与图像、颜色等建立起记忆链接。 展开更多
关键词 思维导图 教学设计 医用电子显微学
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胱抑素C对缺血再灌注损伤大鼠脑水肿和微血管的影响 被引量：3
5
作者 陈萌 梁秀军 +1 位作者 王江南 马凯旋 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2022年第4期292-296,共5页
目的观察胱抑素C(Cys C)干预对脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质AQP4、MMP-2和血脑屏障的形态学变化并探讨其影响机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和Cys C低、中、高浓度组。采用改良线拴法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺... 目的观察胱抑素C(Cys C)干预对脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质AQP4、MMP-2和血脑屏障的形态学变化并探讨其影响机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和Cys C低、中、高浓度组。采用改良线拴法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血2 h再灌注24 h后采用干湿重法测定脑组织含水量、检测脑组织EB含量,评价血脑屏障通透性改变程度。在电镜下观察各组大鼠脑皮质微血管的形态结构;Western blot法检测水AQP4表达,免疫组化法进行MMP-2光密度值检测。结果与缺血再灌注组比较,Cys C低、中浓度组血脑屏障损伤程度明显减轻,毛细血管张开数量增多;AQP4蛋白表达降低,MMP-2表达的OD值也显著减少。而Cys C高浓度组血脑屏障损伤严重;AQP4蛋白表达明显升高,MMP-2蛋白表达OD值也明显增大。结论Cys C在一定浓度下干预能减轻缺血再灌注对血脑屏障的损伤,其机制可能与AQP4蛋白表达降低及MMP-2表达OD值减少有一定的关系。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 AQP4蛋白 血脑屏障 MMP-2蛋白
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脑缺血再灌注损伤大鼠Beclin-1与Bcl-xL、Caspase-2的表达及Cystatin C干预作用的影响 被引量：5
6
作者 陈萌 梁秀军 +2 位作者 王爱乐 常晓栋 杨嘉磊 《中风与神经疾病杂志》 北大核心 2017年第9期801-806,共6页
目的探讨大鼠脑缺血再灌注后自噬蛋白Beclin-1与凋亡蛋白Bcl-xL、Caspase-2表达的变化以及Cystatin C对其的干预作用。方法 Sprague-Dawley大鼠雄性60只随机分成假手术组(sham)、模型组(model)、Cystatin C低(low)、中(middle)、高(high... 目的探讨大鼠脑缺血再灌注后自噬蛋白Beclin-1与凋亡蛋白Bcl-xL、Caspase-2表达的变化以及Cystatin C对其的干预作用。方法 Sprague-Dawley大鼠雄性60只随机分成假手术组(sham)、模型组(model)、Cystatin C低(low)、中(middle)、高(high)浓度组,每组12只。用线栓法制备大鼠右侧局灶性脑缺血2 h再灌注24 h模型。各组大鼠进行神经损伤严重程度评分(mNSS),Western Blot检测损伤区脑皮质组织中凋亡相关蛋白Bcl-xL、Caspase-2的表达;免疫荧光法检测Beclin-1蛋白表达的平均荧光强度;TUNEL法观察神经细胞的凋亡指数(AI)。结果与模型组相比,Cystatin C低、中浓度组中Bcl-xL的表达较模型组明显升高(P<0.05),Caspase-2的表达降低(P<0.05);而Cystatin C高浓度组Bcl-xL表达明显降低,Caspase-2的表达则显著上升(P<0.05);Cystatin C低、中、高浓度组Beclin-1的表达逐渐升高(P<0.05)。结论应用低、中浓度的Cystatin C干预脑缺血再灌注损伤大鼠后,自噬的增强能够促进Bcl-xL的表达,抑制Caspase-2的表达;而高浓度的Cystatin C使Caspase-2的表达增强,Bcl-xL的表达降低。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 自噬 Caspase-2 BCL-XL BECLIN-1
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半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑皮质caspase-9、脑红蛋白表达和过氧化损伤的影响
7
作者 陈萌 梁秀军 +2 位作者 吴晓光 马凯旋 陈元操 《解剖学杂志》 CAS 2021年第1期40-44,F0002,共6页
目的:探讨不同浓度半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)对大鼠损伤大脑皮质组织caspase-9和脑红蛋白(NGB)的表达、氧化损伤和脑组织形态学的影响。方法:大鼠按照随机数字表分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、CysC低、中、高浓度组。... 目的:探讨不同浓度半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)对大鼠损伤大脑皮质组织caspase-9和脑红蛋白(NGB)的表达、氧化损伤和脑组织形态学的影响。方法:大鼠按照随机数字表分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、CysC低、中、高浓度组。线栓法制备右侧局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,缺血2h再灌注24 h后行H-E染色,观察脑组织形态学变化;免疫组织化学法检测caspase-9的阳性细胞数;免疫组织荧光法检测皮质神经元NGB阳性细胞数;免疫印迹检测脑皮质组织中caspase-9蛋白的表达。羟胺法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,化学比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量。结果:与I/R组相比,CysC低、CysC中浓度组caspase-9表达较I/R组明显减少;而CysC高浓度组caspase-9的表达明显升高,与I/R无明显差别。CysC低、CysC中浓度组caspase-9阳性细胞数较I/R组明显减少,NGB阳性细胞数较I/R组显著增多,SOD和GSH-PX活力升高,MDA含量下降;而CysC高浓度组caspase-9阳性细胞数增多,NGB阳性细胞数减少,SOD和GSH-PX活力降低,MDA含量升高;CysC高浓度组与I/R组相比,差异无统计学意义。结论:CysC低、中浓度可能通过上调NGB的表达,下调caspase-9的表达,减轻脑缺血再灌注后的自由基损伤。而浓度过高则作用相反。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 大脑皮质 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9 脑红蛋白 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 丙二醛
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胱抑素C对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质紧密连接的影响
8
作者 李伟祥 马凯旋 +4 位作者 王江南 张雨欣 苏亚 孙颢琳 陈萌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期499-504,共6页
目的:观察胱抑素C(Cys C)干预对脑缺血再灌注损伤(IRI)后大鼠脑皮质毛细血管内皮细胞紧密连接超微结构的形态学变化并探讨其影响机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IRI)和胱抑素C(Cys C)干预组(根据药物... 目的:观察胱抑素C(Cys C)干预对脑缺血再灌注损伤(IRI)后大鼠脑皮质毛细血管内皮细胞紧密连接超微结构的形态学变化并探讨其影响机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IRI)和胱抑素C(Cys C)干预组(根据药物浓度不同分为低、中、高3个亚组分别为Cys C-L、Cys C-M和Cys C-H),采用改良线拴法建立大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h模型。透射电镜下观察内皮细胞紧密连接超微结构的改变,Western Blot观察损伤侧脑皮质ZO-1蛋白表达变化,免疫荧光检测Hsp20的表达与分布。结果:与Sham组相比,IRI组电镜下可见毛细血管内皮细胞紧密连接开放,ZO-1蛋白表达明显减少(P <0. 01),Hsp20细胞数目增多。与IRI组比较,Cys C-L、Cys C-M组紧密连接开放程度明显减轻,ZO-1蛋白表达增加(P <0. 01),Hsp20阳性细胞数也显著增多。而Cys C-H组紧密连接结构消失,毛细血管内皮细胞间完全开放、松散;ZO-1蛋白表达明显降低,Hsp20阳性细胞数也明显减少。结论:Cys C在一定浓度下干预能减轻脑IRI对紧密连接超微结构的破坏,其机制可能与ZO-1蛋白表达增加及Hsp20阳性细胞个数增多有一定的关系。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 ZO-1蛋白 紧密连接 Hsp20蛋白 免疫荧光组织化学 大鼠
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