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新疆西天山野果林杏鬃球蚧寄生蜂资源调查
1
作者 曹竹君 张振宇 +2 位作者 康宁 赵倩 胡红英 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期971-983,共13页
【目的】研究新疆西天山野果林外来入侵物种杏鬃球蚧Sphaerolecanium prunastri Fonscolombe的寄生蜂资源,为利用本土寄生蜂防治该外来入侵害虫提供重要依据。【方法】野外采集寄主并进行室内饲养,获得杏鬃球蚧寄生性天敌,并运用形态学... 【目的】研究新疆西天山野果林外来入侵物种杏鬃球蚧Sphaerolecanium prunastri Fonscolombe的寄生蜂资源,为利用本土寄生蜂防治该外来入侵害虫提供重要依据。【方法】野外采集寄主并进行室内饲养,获得杏鬃球蚧寄生性天敌,并运用形态学、DNA条形码鉴定物种。【结果】共获得寄生蜂7种,其中中国新记录3种(食蚧点刻跳小蜂Discodes coccophagus Ratzeburg、园囿花翅跳小蜂Microterys hortulanus Erdos、提亚长尾啮姬小峰Aprostocetus trjapitzini Kostjukov),同时提供了7种寄生蜂的28S rDNA及COI基因序列及其Genebank登录号。【结论】松毛虫楔缘金小蜂Pachyneuron solitarium(Hartig)为野樱桃李Prunus divaricata Ldb上的优势寄生蜂,园囿花翅跳小蜂为野杏树Armeniaca vulgaris Lamarck上的优势寄生蜂。 展开更多
关键词 杏鬃球蚧 小蜂总科 新记录种 DNA条形码 生物防治
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新疆甘蓝型油菜下胚轴的组织培养和植株再生研究 被引量：23
2
作者 王艳 曾幼玲 +2 位作者 张富春 贺宾 高燕 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2005年第1期24-28,共5页
以新疆甘蓝型油菜(BrassicanapusL.)1khp11品系下胚轴为外植体,不同浓度6-BA与NAA激素组合的分化培养基诱导芽苗的分化,研究发现下胚轴在不同激素及浓度的6-BA与NAA组合中再生频率、分化率存在显著差异。通过种子实生无菌苗苗龄、诱导... 以新疆甘蓝型油菜(BrassicanapusL.)1khp11品系下胚轴为外植体,不同浓度6-BA与NAA激素组合的分化培养基诱导芽苗的分化,研究发现下胚轴在不同激素及浓度的6-BA与NAA组合中再生频率、分化率存在显著差异。通过种子实生无菌苗苗龄、诱导分化前2,4-D的预培养、添加AgNO3等因素的系统分析:五日无菌种子实生苗的下胚轴通过3d短时间的预培养,在最适分化培养基MS0+3.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+3.5mg/LAgNO3中,再生频率和分化率分别为35%和122.5%,初步建立了甘蓝型油菜1khp11品系下胚轴的高频率再生植株体系,为开展优良性状甘蓝型油菜的生物技术育种工作提供了条件保证。 展开更多
关键词 下胚轴 甘蓝型油菜 6-BA 分化培养 预培养 再生频率 分化率 无菌 诱导分化 MS
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新疆雪莲组织培养体系的优化 被引量：11
3
作者 胡雪梅 秦丽 +6 位作者 贺宾 闫建庆 高燕 多力坤.沙比尔 沙红 兰海燕 张富春 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第3期333-335,F0003,共4页
以新疆雪莲无菌苗的根、茎、叶为外植体,对各种不同激素配比条件下新疆雪莲的再生体系进行了探讨,结果表明:培养基MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L对愈伤组织诱导效果较好;而再生芽的诱导培养基为MS+6-BA0.4mg/L+NAA0.05mg/L+水解乳蛋白5... 以新疆雪莲无菌苗的根、茎、叶为外植体,对各种不同激素配比条件下新疆雪莲的再生体系进行了探讨,结果表明:培养基MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L对愈伤组织诱导效果较好;而再生芽的诱导培养基为MS+6-BA0.4mg/L+NAA0.05mg/L+水解乳蛋白500mg/L;生根培养基为1/4MS+NAA 0.3 mg/L。 展开更多
关键词 新疆雪莲 组织培养 优化
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新疆家蚕抗菌肽诱导人胃癌细胞AGS凋亡的研究 被引量：4
4
作者 吴艳玲 夏丽洁 张富春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期186-193,共8页
目的探讨新疆家蚕抗菌肽（cecropinXJ）是否通过诱导人胃癌细胞AGS凋亡产生抗肿瘤的作用。方法选择0．01～1000mg·L^-1浓度范围内的cecropinXJ与人胃癌细胞AGS和人正常胃上皮细胞GES-1共培养24h，采用MTT法检测cecropinXJ对AGS细胞... 目的探讨新疆家蚕抗菌肽（cecropinXJ）是否通过诱导人胃癌细胞AGS凋亡产生抗肿瘤的作用。方法选择0．01～1000mg·L^-1浓度范围内的cecropinXJ与人胃癌细胞AGS和人正常胃上皮细胞GES-1共培养24h，采用MTT法检测cecropinXJ对AGS细胞和GES-1细胞增殖的影响；透射电镜观察细胞超微结构变化；Hoechst染色观察细胞凋亡情况；流式细胞术检测细胞内活性氧和线粒体膜电位的变化；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Westernblot检测Bax、Bcl-2、caspase-3以及细胞色素CmRNA和蛋白水平的表达变化。结果CecropinXJ在体外能明显抑制胃癌AGS细胞的增殖（P〈0．05），并具有浓度依赖性，IC90值为61．19mg·L^-1，但对GES-1细胞无明显的抑制增殖作用。经cecropinXJ处理24h后，AGS细胞核固缩，呈现典型细胞凋亡特征，同时细胞内活性氧增加，线粒体膜电位下降。qRT-PCR和Westernblot结果表明，cecropinXJ能够引起Bcl-2表达下调，Bax表达上调，促进细胞色素C的释放并活化caspase-3。CecropinXJ促进caspase-3活性呈剂量依赖，经caspase-3和caspase-9特异性抑制剂处理后可降低cecropinXJ介导的AGS细胞死亡率。结论CecropinXJ可通过下调Bcl-2表达，上调Bax表达和活化caspase-3诱导AGS细胞凋亡，是其抗肿瘤机制之一。 展开更多
关键词 新疆家蚕抗菌肽(cecropinXJ) 胃癌 AGS细胞 细胞凋亡 Bcl-2 BAX CASPASE-3 抗肿瘤
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新疆阿魏菇的干燥工艺优化及活性成分初步鉴定 被引量：3
5
作者 王为兰 陈开旭 +3 位作者 马纪 马正海 张富春 郑秀芬 《北方园艺》 CAS 北大核心 2016年第4期137-142,共6页
以新疆阿魏菇子实体为试材,采用热风干燥、真空冷冻干燥及自然干燥3种不同的干燥方式,研究不同干燥方式对阿魏菇子实体切片性状的影响;采用系统预试法,研究不同溶剂对阿魏菇提取液活性成分的影响,初步鉴定阿魏菇子实体含有的生物活性成... 以新疆阿魏菇子实体为试材,采用热风干燥、真空冷冻干燥及自然干燥3种不同的干燥方式,研究不同干燥方式对阿魏菇子实体切片性状的影响;采用系统预试法,研究不同溶剂对阿魏菇提取液活性成分的影响,初步鉴定阿魏菇子实体含有的生物活性成分。结果表明:真空冷冻干燥方式对阿魏菇子实体细胞组织结构几乎无损伤,热风干燥对细胞组织损伤较大,干燥工艺研究保证了后续试验样品的有效贮存;初步确定了阿魏菇提取液含有蛋白质、多糖、萜类、生物碱、皂苷类等物质;且不同提取液所含生物活性成分不同;为阿魏菇生物活性组分的分离、提取提供了试验基础。 展开更多
关键词 阿魏菇 干燥 工艺优化 活性成分 鉴定
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准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因Mpafp149的生物信息学分析
6
作者 邱立明 王艳 +1 位作者 李秀明 马纪 《生物信息学》 2009年第4期314-319,共6页
利用生物信息学方法对准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因Mpafp149所编码蛋白MPAFP149进行分析,分别从氨基酸组成、理化性质、二三级结构和功能、进化关系等方面进行预测。结果表明MPAFP149与其他昆虫抗冻蛋白在氨基酸水平上具有79%的相似性,... 利用生物信息学方法对准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因Mpafp149所编码蛋白MPAFP149进行分析,分别从氨基酸组成、理化性质、二三级结构和功能、进化关系等方面进行预测。结果表明MPAFP149与其他昆虫抗冻蛋白在氨基酸水平上具有79%的相似性,二级结构上预测其为水溶性蛋白,含有信号肽和跨膜区。三级结构上与黄粉虫抗冻蛋白YL-1具有较高的相似性,并且具有昆虫抗冻蛋白所特有的结构域。本研究为准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白功能的研究鉴定了基础。 展开更多
关键词 抗冻蛋白 序列比对 结构预测 功能分析
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长江中下游冬油菜在新疆春油菜区适应性分析 被引量：4
7
作者 侯献飞 周子馨 +4 位作者 顾元国 王娟 贾东海 李强 陈跃华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1373-1383,共11页
【目的】研究长江中下游半冬性甘蓝型油菜在新疆春油菜区的生态适应性,拓宽春油菜种质资源。【方法】利用稳定性参数、高稳系数、变异系数,分析参试品种生育期、主要农艺性状和产量。【结果】长江中下游地区半冬性甘蓝型冬油菜在该区自... 【目的】研究长江中下游半冬性甘蓝型油菜在新疆春油菜区的生态适应性,拓宽春油菜种质资源。【方法】利用稳定性参数、高稳系数、变异系数,分析参试品种生育期、主要农艺性状和产量。【结果】长江中下游地区半冬性甘蓝型冬油菜在该区自然资源、栽培条件下能够通过春化正常生长发育,且参试品种生育期均长于对照品种新油17号,收获期晚4～15 d,通过隶属函数对参试品种主要农艺性状进行综合评价,中油158、华油杂73、华油杂76、浙油50、中双11号综合排名位居前五,其他品种均优于对照品种新油17号,利用高稳系数法对参试品种在新疆各个试点产量进行分析,中双11号、华油杂76、沣油737 F1、沪油17号均高于对照。参试品种中中油158主要农艺性状优良,但最终由于发生倒伏,后期产量降低,折合单产仅有201. 41kg/667 m2,高稳系数法排名最后,而中双11号主要农艺性状相对中油158较弱,但在滴灌技术下,未发生根倒,折合单产高达225. 13 kg/667 m2,高稳系数法排名第一;华油杂76折合单产高达252. 71 kg/667 m2,高稳系数法排名第二。【结论】长江中下游地区半冬性甘蓝型冬油菜在新疆春油菜区,能够通过春化正常生长发育,完全成熟;成熟期许多品种发生根倒,产量降低,选择高抗倒伏品种在新疆春油菜区且具有显著的经济效益,同时拓宽新疆春油菜种质资源。 展开更多
关键词 冬油菜 甘蓝型 半冬性 适应性 种质资源
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抗冻蛋白应用前景及基因工程表达研究进展
8
作者 蔡文萍 马纪 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1897-1901,共5页
抗冻蛋白(antifreeze protein,AFP)又称为热滞蛋白,是一类抑制冰晶生长的蛋白,它具有三个基本特征:热滞效应(thermal hysteresis activity,THA)、冰晶形态效应和重结晶抑制效应(frecrystallization inhibition,RI),抗冻蛋白是一类广泛... 抗冻蛋白(antifreeze protein,AFP)又称为热滞蛋白,是一类抑制冰晶生长的蛋白,它具有三个基本特征:热滞效应(thermal hysteresis activity,THA)、冰晶形态效应和重结晶抑制效应(frecrystallization inhibition,RI),抗冻蛋白是一类广泛存在于鱼类、植物、真菌、昆虫中的蛋白,不同生物的AFPs的化学结构、理化性质、空间构型各不相同,并且同类生物之间的AFPs同源性也不高,不存在相似性序列或结构模式,说明它们可能是在不同的有机体中独立进化而来,没有共同的演化规律。随着研究的深入,抗冻蛋白可广泛应用于医学农学食品工业等领域,起到冷冻保护剂,食品添加剂的作用,前人已经对抗冻蛋白的结构、生化性质和抗冻机制进行了阐述,研究主要对抗冻蛋白应用方面及基因工程的表达作了系统综述,为抗冻蛋白的深入研究奠定基础。 展开更多
关键词 抗冻蛋白 应用 基因工程 表达
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农杆菌介导NHX基因转化甘蓝型油菜的研究 被引量：22
9
作者 王艳 曾幼玲 +4 位作者 贺宾 秦丽 李金耀 高燕 张富春 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期278-282,共5页
以甘蓝型油菜带柄子叶为转化受体，通过根癌农杆菌EHA105（Agrobacterium tumefaciens）介导将盐地碱蓬（Suaeda heteroptera）的Na^＋／H^＋反向运输体基因NHX导入新疆主栽油菜1khp11品系中，获得了抗卡那霉素的再生植株，并对影响遗... 以甘蓝型油菜带柄子叶为转化受体，通过根癌农杆菌EHA105（Agrobacterium tumefaciens）介导将盐地碱蓬（Suaeda heteroptera）的Na^＋／H^＋反向运输体基因NHX导入新疆主栽油菜1khp11品系中，获得了抗卡那霉素的再生植株，并对影响遗传转化的一些关键因素进行了研究。结果表明，带柄子叶在含有2，4-D的培养基上经过3d预培养后于浓度OD600为0．3，0．4的菌液中浸染7min，卡那抗性绿苗率可达8％-9％，经过对抗性植株的PCR检测、点杂交及PCR-Southern杂交证明外源基因已整合到油菜基因组中，为新疆盐碱土上油菜产量的提高提供了新的途径。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 带柄子叶 预培养 菌液浓度 浸染时间 转基因油菜
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昆虫抗冻蛋白基因转化烟草的抗寒性 被引量：27
10
作者 王艳 邱立明 +4 位作者 谢文娟 黄薇 叶锋 张富春 马纪 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期397-402,共6页
将准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPAFP149亚克隆至pCAMBIA1302中,构建成单价植物表达载体pCAMBIA1302-MPAFP149,转化至农杆菌EHA105中,利用叶圆盘法转化烟草。通过PCR、PCR-Southern及RT-PCR检测表明,抗冻蛋白基因已整合至烟草基因组中,... 将准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPAFP149亚克隆至pCAMBIA1302中,构建成单价植物表达载体pCAMBIA1302-MPAFP149,转化至农杆菌EHA105中,利用叶圆盘法转化烟草。通过PCR、PCR-Southern及RT-PCR检测表明,抗冻蛋白基因已整合至烟草基因组中,并发生了转录。对T0代转基因烟草以-1℃处理48h,转基因烟草的相对电导率和表型明显优于野生型烟草。室温恢复试验验证,转基因烟草可存活并恢复生长,而野生型烟草受到了不可逆的低温冻害。研究证明,转化后携带昆虫抗冻蛋白基因的烟草比野生型烟草具有明显的抗寒能力,该结果为减轻冷敏感经济作物在春季遭受霜害提供了理论依据和应用基础。 展开更多
关键词 昆虫抗冻蛋白 植物表达载体 烟草 抗寒性
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不同途径的乳球菌介导重组IL-12基因抗小鼠黑素瘤的效果 被引量：6
11
作者 李轶杰 刘欢欢 +1 位作者 李新苹 张富春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期392-395,共4页
利用自身免疫系统或其组分治疗肿瘤是一种新的治疗手段。白细胞介素-12（intedeukin-12，IL-12）是-种具有多种生物学活性的免疫调节因子，它可以促进NK细胞和细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte，CTL）的活性，
关键词 乳酸乳球菌 IL-12 抗肿瘤 滴鼻 瘤内注射
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利用烟草高效转化功能基因体系的建立 被引量：5
12
作者 邱立明 王艳 +2 位作者 王瑜 代春英 马纪 《新疆大学学报（自然科学版）》 CAS 2008年第1期23-27,35,共6页
对农杆菌介导的烟草遗传转化条件进行探索,以20mg/L的潮霉素作为转化苗的筛选压,稀释至OD600为0.2～0.3的农杆菌对外植体浸染15min,于添加300mg/L头孢霉素的生根培养基中诱导生根,可稳定获得较高的阳性转化率.经PCR和PCR-Southern检测,... 对农杆菌介导的烟草遗传转化条件进行探索,以20mg/L的潮霉素作为转化苗的筛选压,稀释至OD600为0.2～0.3的农杆菌对外植体浸染15min,于添加300mg/L头孢霉素的生根培养基中诱导生根,可稳定获得较高的阳性转化率.经PCR和PCR-Southern检测,阳性转基因植株达84.8%以上.通过本研究建立了一种稳定高效的功能基因烟草遗传转化体系. 展开更多
关键词 烟草 农杆菌 筛选压 浸染时间 生根培养基
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提高农杆菌基因转化率方法的研究 被引量：5
13
作者 王艳 贺宾 +4 位作者 李金耀 曾幼玲 秦丽 蒋刚强 张富春 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第6期51-53,共3页
通过甘蓝型油菜带柄子叶转化过程中转化受体是否进行预培处理、转化前菌液的对数浓度确定以及合适的再生筛选体系的摸索,研究了提高农杆菌基因转化效率的方法.试验结果表明:转化受体经过MD培养基3d的预培处理,用处于对数生长期OD600为0.... 通过甘蓝型油菜带柄子叶转化过程中转化受体是否进行预培处理、转化前菌液的对数浓度确定以及合适的再生筛选体系的摸索,研究了提高农杆菌基因转化效率的方法.试验结果表明:转化受体经过MD培养基3d的预培处理,用处于对数生长期OD600为0.6～0.8的菌液稀释至所需浸染浓度,浸染所需时间共培后,转入降低卡那霉素浓度的初筛分化培养基中,再经过后期较高浓度的卡那霉素继代筛选培养,大大提高了转化后卡那霉素抗性绿苗的得率.此研究不仅优化了油菜的转化体系和提高了油菜的转化效率,而且为农杆菌转化其它不同物种的受体材料提供了可指导的借鉴. 展开更多
关键词 带柄子叶 转化效率 预培养 对数期菌液浓度 筛选体系
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盐胁迫下盐穗木DNA甲基化程度与去甲基化酶基因(Ros1)表达的相关性研究 被引量：4
14
作者 杜驰 张冀 +1 位作者 张丽丽 张富春 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期878-885,共8页
【目的】甲基化和去甲基化协同调控的DNA甲基化直接影响逆境胁迫相关基因的表达,植物的DNA去甲基化主要由去甲基化酶基因Ros1(Repressor of Silencing 1)介导的碱基切除修复实现。开展盐穗木(Halostachys caspica)DNA甲基化程度与HcRos... 【目的】甲基化和去甲基化协同调控的DNA甲基化直接影响逆境胁迫相关基因的表达,植物的DNA去甲基化主要由去甲基化酶基因Ros1(Repressor of Silencing 1)介导的碱基切除修复实现。开展盐穗木(Halostachys caspica)DNA甲基化程度与HcRos1表达动态变化的分析,有助于阐明DNA甲基化应答盐胁迫的分子机制。【方法】利用qRT-PCR测定盐胁迫下盐穗木幼苗同化枝和根基因组DNA的甲基化程度,探讨DNA的甲基化程度与去甲基化酶基因HcRos1表达的相关性。【结果】在相同NaCl浓度胁迫不同时间下盐穗木同化枝和根中DNA甲基化程度呈现先升高后降低的趋势,盐穗木同化枝中的DNA甲基化程度大多高于根中的基因组甲基化程度,且均在24 h达到最高DNA甲基化程度。而在不同浓度NaCl胁迫处理24 h时,盐穗木同化枝和根中DNA甲基化程度也是先升高后降低的趋势,盐穗木同化枝中的基因组甲基化程度高于根中的基因组甲基化程度,且多在100 mmol/L达到最高DNA甲基化程度。HcRos1的基因表达量在低浓度NaCl胁迫下变化不大,但在700 mmol/L NaCl胁迫72 h时则显著升高。【结论】HcRos1表达量与DNA甲基化水平呈明显的负相关,盐胁迫能够提高HcRos1的表达,降低基因组DNA的甲基化程度,增强植物的耐盐性。 展开更多
关键词 盐生植物 基因组 NaCI处理 甲基化和去甲基化 相关性
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新牧一号杂花苜蓿MvNHX1基因的表达分析和提高烟草耐盐性的研究 被引量：5
15
作者 张桦 张富春 +2 位作者 张雨良 张博 陈全家 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期550-557,共8页
提取新牧一号杂花苜蓿的总RNA,用特异引物RT-PCR扩增后的cDNA片段连接入pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行序列分析,新牧一号苜蓿NHX1(MvNHX1)全长1 626 bp,Genbank登录号为:EU375310。半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR分析表... 提取新牧一号杂花苜蓿的总RNA,用特异引物RT-PCR扩增后的cDNA片段连接入pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行序列分析,新牧一号苜蓿NHX1(MvNHX1)全长1 626 bp,Genbank登录号为:EU375310。半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR分析表明,在盐胁迫下MvNHX1基因的表达均上调。构建重组植物表达载体pBI121-MvNHX1后,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,转基因烟草在盐胁迫下发芽率和生物量均高于非转基因烟草,表明MvNHX1能够提高转基因烟草的耐盐性。 展开更多
关键词 新牧一号苜蓿 MvNHX1 克隆 序列分析 耐盐性
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跨膜离子转运蛋白与植物耐盐的分子生物学 被引量：5
16
作者 黄萍 张富春 +1 位作者 王瑜 李金耀 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第2期1-5,共5页
植物抵御盐害的主要方式是增加Na+的外排、减少Na+的吸入和Na+的区隔化,而Na+的跨膜运输主要由质膜和液泡膜上的离子转运蛋白完成。对质膜和液泡膜跨膜离子转运蛋白包括K+/Na+离子转运蛋白,Na+/H+逆向转运蛋白以及液泡膜H+-PPase的分子... 植物抵御盐害的主要方式是增加Na+的外排、减少Na+的吸入和Na+的区隔化,而Na+的跨膜运输主要由质膜和液泡膜上的离子转运蛋白完成。对质膜和液泡膜跨膜离子转运蛋白包括K+/Na+离子转运蛋白,Na+/H+逆向转运蛋白以及液泡膜H+-PPase的分子生物学研究及应用进展进行了综述。 展开更多
关键词 植物耐盐跨膜离子转运蛋白 K^+/Na^+离子转运蛋白Na^+/H^+逆向转运蛋白 液泡膜H^+-PPase
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棉花茉莉酸羧基甲基转移酶基因克隆及其表达分析 被引量：3
17
作者 杨艺 张富春 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期50-56,共7页
根据亚洲棉石系亚1号的转录组测序结果,克隆获得陆地棉品种"新陆早17号"的茉莉酸羧基甲基转移酶(jasmonic acid carboxyl methyltransferase,JMT)全长cDNA,命名为GhJMT(GenBank登录号KJ856913)。序列分析表明,GhJMT基因开放... 根据亚洲棉石系亚1号的转录组测序结果,克隆获得陆地棉品种"新陆早17号"的茉莉酸羧基甲基转移酶(jasmonic acid carboxyl methyltransferase,JMT)全长cDNA,命名为GhJMT(GenBank登录号KJ856913)。序列分析表明,GhJMT基因开放阅读框为1 116bp,编码371个氨基酸。保守结构域分析显示,该基因编码的蛋白具有甲基转移酶-7保守结构域。系统进化树分析显示,GhJMT与可可的茉莉酸甲基转移酶在同一分支,可能定位于细胞质,为不稳定亲水性蛋白。实时荧光定量PCR分析表明,2.5%PEG6000胁迫处理12h时,根中GhJMT基因的表达迅速上调并达到最大值,约为对照的2.6倍,在茎中GhJMT的表达量在9h达到最高,约为对照的2.3倍,而在叶中GhJMT表达量在3h达到最高,约为对照组的2.1倍,说明GhJMT基因表达受干旱胁迫的诱导。研究结果有助于阐明GhJMT基因表达与植物抗旱的相关性。 展开更多
关键词 棉花 GhJMT 基因克隆 干旱胁迫 表达分析
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光滑鳖甲抗冻蛋白基因(AP-AFP060116)表达规律的研究 被引量：1
18
作者 陈亮 张富春 马纪 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第3期372-376,共5页
研究以克隆的光滑鳖甲抗冻蛋白基因(AP-AFP060116,Apafp)为目的基因,采用半定量RT-PCR技术,首次探讨了该基因在不同低温处理下的表达规律。半定量RT-PCR实验结果表明光滑鳖甲成虫经历长时间冷驯化后,体内Apafp基因的表达水平增高。计算... 研究以克隆的光滑鳖甲抗冻蛋白基因(AP-AFP060116,Apafp)为目的基因,采用半定量RT-PCR技术,首次探讨了该基因在不同低温处理下的表达规律。半定量RT-PCR实验结果表明光滑鳖甲成虫经历长时间冷驯化后,体内Apafp基因的表达水平增高。计算半定量RT-PCR产物电泳图像的灰度值,结果显示在低温处理的第5 d,昆虫体内Apafp基因的表达水平与对照组相比差异显著(P<0.05)。快速冷驯化实验结果显示,处理组与对照组昆虫体内Apafp基因的表达水平没有明显的差异。同时使用Southern blot技术证明光滑鳖甲抗冻蛋白基因家族的存在。 展开更多
关键词 光滑鳖甲 抗冻蛋白 冷驯化 RT—PCR SOUTHERN BLOT
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番茄转录因子基因SlWRKY6的克隆与原核表达分析 被引量：10
19
作者 周涛 王娟 +3 位作者 胡佳蕙 王柏柯 李宁 余庆辉 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1824-1832,共9页
该研究基于番茄基因组数据库SGN(Sol Genomic Network)信息,利用RT-PCR从栽培番茄‘M82’(Solanum lycopersicum)中成功克隆到番茄SlWRKY6基因(登录号:Solyc02g080890),通过qRT-PCR方法和原核表达初步验证其生物学功能。结果表明:(1)生... 该研究基于番茄基因组数据库SGN(Sol Genomic Network)信息,利用RT-PCR从栽培番茄‘M82’(Solanum lycopersicum)中成功克隆到番茄SlWRKY6基因(登录号:Solyc02g080890),通过qRT-PCR方法和原核表达初步验证其生物学功能。结果表明:(1)生物信息学分析显示,番茄SlWRKY6基因ORF全长1653 bp,编码550个氨基酸,其蛋白结构含有1个WRKYGQK保守结构域和C2H2锌指结构域,属于IIb类;其基因启动子上游1500 bp含有多个激素响应元件和非生物胁迫响应元件。(2)进化树分析显示,SlWRKY6与潘那利番茄SpWRKY31-X1(NP_001352691.1)的相似性最高,且定位于细胞核内。(3)qRT-PCR结果显示,SlWRKY6基因在番茄根、茎、叶中均有表达,在叶中的表达量最高,且受盐和干旱诱导表达。(4)SDS-PAGE及Western blot结果显示,pET-30a-SlWRKY6重组蛋白的大小约66 kDa,与预期大小一致。(5)原核表达分析显示,重组菌E.coli BL21∷pET-30a-SlWRKY6在不同浓度盐(NaCl)和干旱(Mannitol)胁迫下生长速度显著低于对照菌E.coli BL21∷pET-30a,且在400 mmol/L NaCl、800 mmol/L甘露醇胁迫条件下最为显著;滴板实验初步验证SlWRKY6转录因子能提高重组菌E.coli BL21∷pET-30a-SlWRKY6在ABA和pH 9(NaOH)胁迫的耐受性;在400 mmol/L NaCl、pH 5(HCl)、800 mmol/L甘露醇胁迫条件下耐受能力降低。研究表明,SlWRKY6转录因子可能通过参与ABA途径来响应非生物胁迫。 展开更多
关键词 番茄 SlWRKY6 亚细胞定位 QRT-PCR 原核表达
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新牧一号苜蓿MvP5CS基因的克隆和功能分析 被引量：6
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作者 张桦 张富春 +2 位作者 曾光 张博 陈全家 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期51-58,共8页
为研究苜蓿(Medicago sativa)耐盐分子机制,为抗逆分子育种提供依据,通过同源克隆和RT-PCR技术克隆了新牧一号杂花苜蓿(M.varia Xinmu-1)的MvP5CS基因,MvP5CS全长2 148bp,Genbank登录号为:EU371644。荧光定量PCR分析发现,在盐胁迫下MvP... 为研究苜蓿(Medicago sativa)耐盐分子机制,为抗逆分子育种提供依据,通过同源克隆和RT-PCR技术克隆了新牧一号杂花苜蓿(M.varia Xinmu-1)的MvP5CS基因,MvP5CS全长2 148bp,Genbank登录号为:EU371644。荧光定量PCR分析发现,在盐胁迫下MvP5CS基因表达明显上调,说明MvP5CS与苜蓿的耐盐性相关。利用农杆菌介导的叶盘转化法,将MvP5CS基因成功转入烟草(Nicotiana tabacum),盐胁迫下转MvP5CS基因T1代烟草萌发率和根长均高于非转基因烟草。表明新牧一号苜蓿P5CS基因能够提高转基因烟草的耐盐性。 展开更多
关键词 新牧一号苜蓿 MvP5CS 克隆 序列分析 耐盐性
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