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家蚕滞育性卵盐酸处理的靶物质 被引量：18
1
作者 徐世清 郑必平 +2 位作者 司马杨虎 甲斐英则 徐俊良 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期51-55,共5页
酯酶A4 (EA4 )是家蚕卵的滞育生物钟蛋白质。从家蚕C10 8品种产下后 4 8h的滞育性卵和盐酸活化处理卵分离纯化出EA4酶蛋白 ,使用合成的EA4活性多肽抑制因子PIN (氨基酸结构 :SIFMTKQHSQDDIIQHPLDYVEQQIHQQKQKLQKQTLN) ,研究了PIN对EA4... 酯酶A4 (EA4 )是家蚕卵的滞育生物钟蛋白质。从家蚕C10 8品种产下后 4 8h的滞育性卵和盐酸活化处理卵分离纯化出EA4酶蛋白 ,使用合成的EA4活性多肽抑制因子PIN (氨基酸结构 :SIFMTKQHSQDDIIQHPLDYVEQQIHQQKQKLQKQTLN) ,研究了PIN对EA4酶蛋白的作用机制。滞育性卵的EA4酶蛋白和PIN在 2 5℃混合 2 4h后 ,用矩阵辅助激光解吸离子质谱法 ,检测到了二者的结合体 ,该结合体在盐酸处理后消失 ;盐酸活化处理蚕卵的EA4酶蛋白和合成PIN之间没有出现这种结合体。体外 2 5℃ ,滞育性蚕卵EA4的ATPase特征性活性峰在 6 5h后出现 ,而盐酸活化处理蚕卵的EA4在 1 5h后出现活性峰值。盐酸处理可能通过解除PIN对EA4的抑制作用 ,在短时间内激活EA4酶蛋白 ,从而活化滞育性蚕卵。 展开更多
关键词 家蚕 滞育 盐酸处理 酯酶A4 靶物质 卵
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盐酸处理蚕卵酯酶A4的活性变化及其与滞育性的关系 被引量：19
2
作者 徐世清 司马杨虎 +4 位作者 朱江 迮玉官 张雨青 甲斐英则 徐俊良( 《蚕业科学》 CAS CSCD 1998年第2期95-99,共5页
从家蚕C108品种蚕卵精制酯酶A4，首次测定了产卵后24～96h浸酸蚕卵酯酶A4的ATPase活性。蚕卵经盐酸处理后在体外5℃1～2d或体外25℃1～3h出现酶活性峰。与低温活化蚕卵比较，产卵后24～96h的浸酸蚕卵，在体外5℃酶活性峰出现时间提早了8... 从家蚕C108品种蚕卵精制酯酶A4，首次测定了产卵后24～96h浸酸蚕卵酯酶A4的ATPase活性。蚕卵经盐酸处理后在体外5℃1～2d或体外25℃1～3h出现酶活性峰。与低温活化蚕卵比较，产卵后24～96h的浸酸蚕卵，在体外5℃酶活性峰出现时间提早了8．5～22d，在体外25℃提早了3～9h。浸酸后蚕卵迅速解除滞育，滞育发育时间显著缩短。将不同卵龄未浸酸蚕卵与盐酸处理蚕卵酯酶A4的ATPase活性峰出现时间差制成曲线，在体外5℃或25℃的结果几乎都完全与5℃冷藏时蚕卵的滞育发育时间曲线重叠。盐酸处理蚕卵酯酶A4的活性变化与蚕卵活化有高度相关性。 展开更多
关键词 家蚕 滞育性卵 盐酸孵化 酯酶A4 滞育发育
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体外盐酸处理与PIN对酯酶A4活性影响的关系 被引量：10
3
作者 徐世清 司马杨虎 +3 位作者 郑必平 虞晓华 甲斐英则 徐俊良 《蚕业科学》 CAS CSCD 1999年第3期149-153,共5页
从家蚕Ｃ１０８ 品种产下后２ｄ 的滞育性卵纯化酯酶Ａ４ 及其活性抑制多肽ＰＩＮ，体外调查了盐酸处理与ＰＩＮ 对酯酶Ａ４ 的ＡＴＰａｓｅ 活性影响的关系。结果表明：盐酸处理不仅迅速消除了ＰＩＮ 对酯酶Ａ４ 的ＡＴＰａｓｅ 活性... 从家蚕Ｃ１０８ 品种产下后２ｄ 的滞育性卵纯化酯酶Ａ４ 及其活性抑制多肽ＰＩＮ，体外调查了盐酸处理与ＰＩＮ 对酯酶Ａ４ 的ＡＴＰａｓｅ 活性影响的关系。结果表明：盐酸处理不仅迅速消除了ＰＩＮ 对酯酶Ａ４ 的ＡＴＰａｓｅ 活性抑制作用；盐酸处理使蚕卵酯酶Ａ４ 的ＡＴＰａｓｅ 活性峰提早出现的时间还反映了蚕卵的滞育发育时间。 展开更多
关键词 家蚕 滞育性卵 盐酸处理 酯酶A4 多肽抑制栓
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盐酸刺激量对家蚕卵酯酶A4活性的影响及其与蚕卵活化的关系 被引量：9
4
作者 徐世清 陈息林 +4 位作者 司马杨虎 郑必平 虞晓华 甲斐英则 徐俊良 《蚕业科学》 CAS CSCD 2000年第1期20-26,共7页
将产卵后 2 4～ 96h( 2 5℃ )的蚕卵 ,用相同或最佳盐酸刺激量 (浸酸后点青最快、点青卵率最高 )浸酸处理 ,卵龄越大 ,蚕卵点青越迟。蚕卵的点青时间在一定范围内随盐酸刺激量增大而提前 ,超过这一范围 ,则随刺激量增大而延迟。卵龄增... 将产卵后 2 4～ 96h( 2 5℃ )的蚕卵 ,用相同或最佳盐酸刺激量 (浸酸后点青最快、点青卵率最高 )浸酸处理 ,卵龄越大 ,蚕卵点青越迟。蚕卵的点青时间在一定范围内随盐酸刺激量增大而提前 ,超过这一范围 ,则随刺激量增大而延迟。卵龄增大 ,蚕卵酯酶A4和ATPase特征性活性峰出现时间延迟 ;蚕卵经盐酸处理 ,该时间明显提前。产卵后 96h盐酸处理蚕卵 ,酯酶A4的活性峰出现时间随盐酸刺激量增大而提前。随着浸酸卵龄和盐酸刺激量的改变 ,蚕卵酯酶A4的活性峰出现时间与蚕卵点青时间发生一致的变化。盐酸刺激量能够影响蚕卵的活化 (或滞育发育期 )和发育速度。 展开更多
关键词 家蚕 滞育性卵 盐酸处理 酯酶A4 蚕卵活化
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家蚕滞育生物钟蛋白质Ease A4的纯化及其分子结构分析 被引量：10
5
作者 徐世清 甲斐英则 +3 位作者 徐俊良 东健一郎 谷直纪 郑必平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期241-246,共6页
ＥａｓｅＡ４是家蚕卵的一种滞育生物钟蛋白质．产下后２ｄ的家蚕Ｃ１０８品种滞育性卵，经过丙酮脱脂、８５℃热处理、硫酸铵沉淀和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤层析初步分离，进一步经过Ｓｅｐ－ＰａｋＣ１８脱盐浓缩，ＨＰＬＣ... ＥａｓｅＡ４是家蚕卵的一种滞育生物钟蛋白质．产下后２ｄ的家蚕Ｃ１０８品种滞育性卵，经过丙酮脱脂、８５℃热处理、硫酸铵沉淀和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤层析初步分离，进一步经过Ｓｅｐ－ＰａｋＣ１８脱盐浓缩，ＨＰＬＣ（柱为ＹＭＣ－ＰａｃｋＰｒｏｔｅｉｎ－ＲＰ）分离，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＭＡＬＤＩＭＳ方法鉴定，纯化得到ＥａｓｅＡ４蛋白质．从１０ｇ蚕卵最终得到了１１．８μｇＥａｓｅＡ４．ＥａｓｅＡ４由从Ｈｉｓ到Ｔｙｒ的１５５个氨基酸残基构成，蛋白质部分的分子量为１６６０１．其２２位氨基酸残基Ａｓｎ处有一个Ａｓｎ－Ｘ－Ｔｈｒ糖基化场所，并有糖基结合在该部位，糖基的分子量约为７６０．ＥａｓｅＡ４的６１位和１５０位的两个Ｃｙｓ氨基酸残基之间存在二硫键．糖基和二硫键的存在不仅有利于酶蛋白的分离。 展开更多
关键词 家蚕 滞育性卵 EateraseA4 纯化 分子结构
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家蚕多肽抑制因子对酯酶A4的ATP酶活性影响 被引量：11
6
作者 徐世清 郑必平 +4 位作者 陈息林 司马杨虎 虞晓华 甲斐英则 徐俊良 《蚕业科学》 CAS CSCD 1999年第1期16-21,共6页
从产下后２ｄ的家蚕Ｃ１０８品种滞育性卵精制酯酶Ａ４和其多肽抑制因子ＰＩＮ，体外调查了ＰＩＮ对酯酶Ａ４的ＡＴＰ酶活性影响。酯酶Ａ４和ＰＩＮ５℃混合２５～１３ｄ，除去ＰＩＮ后５℃保护，ＡＴＰ酶活性峰都在１２～１４ｄ后出... 从产下后２ｄ的家蚕Ｃ１０８品种滞育性卵精制酯酶Ａ４和其多肽抑制因子ＰＩＮ，体外调查了ＰＩＮ对酯酶Ａ４的ＡＴＰ酶活性影响。酯酶Ａ４和ＰＩＮ５℃混合２５～１３ｄ，除去ＰＩＮ后５℃保护，ＡＴＰ酶活性峰都在１２～１４ｄ后出现；２５℃混合时，除去ＰＩＮ后，ＡＴＰ酶活性峰出现时间为混合时间再加１２～１４ｄ。利用ＭＡＬＤＩＭＳ方法，首次检测到纯化的酯酶Ａ４和合成ＰＩＮ的结合体。 展开更多
关键词 家蚕 滞育性卵 体外 酯酶A4 多肽抑制栓
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体外25℃家蚕卵酯酶A4的ATP酶活性变化及其与滞育性的关系 被引量：1
7
作者 徐世清 藤国琴 +4 位作者 甲斐英则 徐俊良 郑必平 陈息林 司马杨虎 《蚕业科学》 CAS CSCD 2000年第3期140-145,共6页
从家蚕卵纯化出EA4酶蛋白 ,调查了温度对EA4的ATP酶最高活性和其出现时间的影响以及与蚕卵滞育性的关系。EA4的酶活性反应温度为 2 5℃时比 5℃时提高约 1 0倍。从滞育性卵和盐酸处理卵纯化EA4 ,或者用EA4的活性抑制多肽 (PIN)体外处理... 从家蚕卵纯化出EA4酶蛋白 ,调查了温度对EA4的ATP酶最高活性和其出现时间的影响以及与蚕卵滞育性的关系。EA4的酶活性反应温度为 2 5℃时比 5℃时提高约 1 0倍。从滞育性卵和盐酸处理卵纯化EA4 ,或者用EA4的活性抑制多肽 (PIN)体外处理酶蛋白质 ,2 5℃中EA4的最高活性出现时间比 5℃中显著提早。随纯化时卵龄或PIN处理时间的改变 ,2 5、5℃中EA4的最高活性出现时间以及与蚕卵 5℃冷藏时滞育发育时间有相同趋势的变化。体外 2 5℃和体外 5℃一样 。 展开更多
关键词 家蚕 酯酶A4 ATP酶活性 蚕卵滞育性 体外25℃
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体外盐酸处理对酯酶A4的ATPase活性影响 被引量：8
8
作者 徐世清 陈息林 +4 位作者 司马杨虎 郑必平 虞晓华 徐俊良 甲斐英则 《中国蚕业》 1998年第4期13-16,共4页
关键词 蚕滞育性卵 体外 盐酸处理 酯酶A4 ATPASE活性
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家蚕卵酯酶A4活性抑制多肽PIN与滞育激素的关系初探 被引量：1
9
作者 徐世清 司马杨虎 +3 位作者 陈息林 郑必平 甲斐英则 徐俊良 《江苏蚕业》 2000年第1期4-6,共3页
利用Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ ＨＲ１０／３０柱，从家蚕滞育性卵分离出滞育生物钟蛋白质酯酶Ａ４的活性抑制多肽（Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｉｎ－ｈｉｂｉｔｏｒｙ　Ｎｅｅｄｌｅ，简记ＰＩＮ），将其注射家蚕大造品种非滞育性蛹，结果出现了产... 利用Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ ＨＲ１０／３０柱，从家蚕滞育性卵分离出滞育生物钟蛋白质酯酶Ａ４的活性抑制多肽（Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｉｎ－ｈｉｂｉｔｏｒｙ　Ｎｅｅｄｌｅ，简记ＰＩＮ），将其注射家蚕大造品种非滞育性蛹，结果出现了产滞育性卵的母蛾。利用合成的ＤＨ成份，发现对ＥＡ４的ＡＴＰ酶（ＡＴＰａｓｅ）活性有强烈的抑制性。从分子量分析，ＰＩＮ多肽和ＤＨ多肽十分接近。 展开更多
关键词 家蚕卵 酯酶A4 PIN 滞育激素 生物钟蛋白质
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