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基于创新创业理念的“产学研”一体化教学模式在基础医学教育中的研究与实践 被引量：12
1
作者 肖飞 林熙 +1 位作者 刘小文 武征 《教育教学论坛》 2020年第1期194-197,共4页
“产学研”实践教学在医学教育满足社会对医学健康产业创造性人才的需求上具有重要作用。文章介绍了近5年我系开展“产学研”一体化教学模式在医学创新创业人才培养方面的探索,结果发现“产学研”一体化教学模式可以增强学生创新创业理... “产学研”实践教学在医学教育满足社会对医学健康产业创造性人才的需求上具有重要作用。文章介绍了近5年我系开展“产学研”一体化教学模式在医学创新创业人才培养方面的探索,结果发现“产学研”一体化教学模式可以增强学生创新创业理念和相应能力,培养了学生主动学习能力,其分析和解决问题的能力明显提高,明显提升了学生的综合素质。 展开更多
关键词 创新创业理念 “产学研”一体化 基础医学 人才培养
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骨髓间充质干细胞对免疫损伤卵巢的修复作用 被引量：9
2
作者 李威娜 谢琪璇 +5 位作者 秦俊文 黄伟 叶绍恩 罗峰 张春雪 肖銮娟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期825-829,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6～8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨... 目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6～8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨髓MSCs细胞,A、B组各注射等体积的PBS。MSCs移植后按既定时间处死小鼠,利用PCR检测卵巢中GFP基因以判断MSCs是否到达卵巢;通过对卵巢组织切片HE染色以及细胞凋亡分析来检测MSCs是否对免疫损伤卵巢有修复作用及其机制。结果 PCR结果表明MSCs经腹腔移植可直接到达免疫损伤卵巢;MSCs移植可促进免疫损伤卵巢组织的修复;相应地,移植组颗粒细胞的凋亡比非移植组明显减少。结论腹腔移植MSCs可促进免疫损伤卵巢的修复,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 卵巢 免疫损伤 修复
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抗原特异TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCRV β13-pIRES2-EGFP真核表达载体的构建及共转染研究 被引量：5
3
作者 尹青松 李扬秋 +5 位作者 陈少华 杨力建 周羽竝 吴秀丽 李萡 张学利 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-5,11,共6页
目的构建携带弥漫大B型非霍奇金淋巴瘤(DLBL)相关抗原特异性的TCR Vα和TCR Vβ基因片段的真核表达载体TCR Vα-pIRES2-EGFP和TCR Vβ-pIRES2-EGFP,将其共同转染Raji和Jurkat细胞。方法前期研究从1例DLBL患者外周血T细胞中发现克隆性增... 目的构建携带弥漫大B型非霍奇金淋巴瘤(DLBL)相关抗原特异性的TCR Vα和TCR Vβ基因片段的真核表达载体TCR Vα-pIRES2-EGFP和TCR Vβ-pIRES2-EGFP,将其共同转染Raji和Jurkat细胞。方法前期研究从1例DLBL患者外周血T细胞中发现克隆性增殖T细胞受体(TCR)Vα6和Vβ13亚家族T细胞,在此基础上利用RT-PCR扩增TCR Vα6和TCR Vβ13基因全长序列后,分别将其定向克隆入带有绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体pIRES2-EGFP,酶切和核酸序列测定分析方法鉴定重组质粒TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP的正确性;利用核转染技术(nucleofector)将其分别或共同转染Raji细胞和Jurkat细胞,24 h后利用激光共聚焦显微镜观察EGFP的瞬时表达情况,48 h后利用实时定量PCR检测TCR Vα6和TCR Vβ13基因的表达情况,Western blot检测EGFP蛋白的表达情况。结果获得来自DLBL患者的TCR Vα6和TCR Vβ13基因全长序列,酶切分析和核酸序列测定证实TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP重组质粒构建正确;转染24 h后,激光共聚焦显微镜下可观察到EGFP的表达,40%以上细胞发出绿色荧光,单独转染和共转染组荧光产生情况相似;实时定量PCR在单独转染和共转染组均可检测到TCR Vα6和TCR Vβ13基因的表达,共转染组2基因的表达水平稍低于单独转染组;Western blot检测在单独转染和共转染组均显示EGFP蛋白的表达,2组的蛋白杂交带强度相似。结论成功构建了DLBL特异性的TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP真核表达质粒,两者可同时转染到细胞中,并实现了体外共表达。 展开更多
关键词 DLBL TCR Vα/Vβ基因 CTL 核转染 EGFP
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双氢青蒿素对Raji细胞放射敏感性的影响 被引量：8
4
作者 张雷 程龙球 +2 位作者 周兆 吕林林 刘革修 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期385-390,共6页
目的:研究双氢青蒿素(DHA)对Raji细胞放射敏感性的影响并探讨其作用机制。方法:CCK8测定DHA对Raji细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS及线粒体膜电位,Western blot检测AKT、pAKT、Bcl-2、Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达... 目的:研究双氢青蒿素(DHA)对Raji细胞放射敏感性的影响并探讨其作用机制。方法:CCK8测定DHA对Raji细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS及线粒体膜电位,Western blot检测AKT、pAKT、Bcl-2、Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达量。结果:实验分为对照组、DHA组(5μmol/L DHA)、放射组(4Gyγ射线)、联合放射组(5μmol/L DHA和4 Gyγ射线),与其他3组相比,联合放射组Raji细胞的线粒体膜电位显著降低(P<0.01),胞内ROS含量和凋亡率显著升高(P<0.01);此外,Raji细胞AKT表达量与其他3组相比无明显差异,但AKT的磷酸化受到抑制;Bcl-2表达量显著降低,而Bax、Cleaved-Caspase-3表达量显著升高。结论:DHA可能通过抑制磷酸肌醇3-激酶(PI3K-AKT)信号通路及激活了Raji细胞的线粒体凋亡途径,引起氧化应激反应,从而增加Raji细胞对放射的敏感性。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 RAJI细胞 线粒体凋亡途径 PI3K-AKT信号通路
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实时定量RT-PCR检测TCRVγ亚家族基因表达水平 被引量：7
5
作者 陈少华 李扬秋 +3 位作者 杨力建 李萡 罗更新 张涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期166-168,共3页
目的：建立SYBRGreenI实时定量检测TCRVγ亚家族T细胞表达水平的比较Ct法。方法：利用倍比稀释的成人正常胸腺组织cDNA建立TCRVγⅠ—VγⅢ和B2微球蛋白基因（B2M）基因的相对标准曲线，实验证实靶基因（VγⅠ～VγⅢ）分别和看家基因（... 目的：建立SYBRGreenI实时定量检测TCRVγ亚家族T细胞表达水平的比较Ct法。方法：利用倍比稀释的成人正常胸腺组织cDNA建立TCRVγⅠ—VγⅢ和B2微球蛋白基因（B2M）基因的相对标准曲线，实验证实靶基因（VγⅠ～VγⅢ）分别和看家基因（152M）的扩增效率-致，可采用比较ct法对TCRVγI—VγⅢ的表达进行相对定量，并运用该方法检测20例健康成人外周血TCRVγI—VγⅢ的表达水平。结果：成人外周血TCRVγⅡ的表达量最高，TCRVγ1次之，TCRVγⅢ的表达量最低，三者比较有统计学意义（P〈0．05）。结论：本研究率先建立了利用SYBRGreenI实时荧光定量RT—PCR检测人TCRV7基因mRNA表达水平比较Ct法，并在国内首先提供了健康成人外周血TCRVγ基因各亚家族mRNA表达水平的资料。 展开更多
关键词 实时荧光定量RT-PCR 比较Ct法 TCR
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Elf-1基因在急性髓细胞性白血病中的表达情况 被引量：4
6
作者 沈琦 郑海涛 +2 位作者 陈少华 杨力建 李扬秋 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期581-584,共4页
目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的... 目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的单核细胞的Elf-1表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-ΔCt×100%计算Elf-1基因表达水平。结果:AML组Elf-1表达水平(13.518±19.197)%明显高于健康对照组(2.044±1.321)%(P<0.01),不同AML亚型之间Elf-1的表达水平没有显著性差异(P=0.52),但各亚型AML的Elf-1的表达水平均与健康对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:建立SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR分析外周血Elf-1表达水平的方法,检测急性髓细胞性白血病Elf-1基因高表达情况。 展开更多
关键词 Elf-1基因 实时定量PCR 急性髓细胞性白血病(AML) T细胞免疫缺陷 TCRζ链
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CML细胞抗原相关TCR Vα13/Vβ21和Vα18/Vβ21寡克隆T细胞及其CDR3序列特点 被引量：3
7
作者 查显丰 李扬秋 +3 位作者 陈少华 杨力建 卢育洪 张涛 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期538-542,共5页
目的:分析慢性粒细胞白血病(CML)病人的克隆性增殖T细胞及其CDR3序列的特点。方法:利用RT-PCR和基因扫描分析1例CML患者外周血单个核细胞中的TCR Vα和Vβ基因的互补决定区(CDR3),了解各Vα和Vβ亚家族的限制性表达情况和T细胞克隆性增... 目的:分析慢性粒细胞白血病(CML)病人的克隆性增殖T细胞及其CDR3序列的特点。方法:利用RT-PCR和基因扫描分析1例CML患者外周血单个核细胞中的TCR Vα和Vβ基因的互补决定区(CDR3),了解各Vα和Vβ亚家族的限制性表达情况和T细胞克隆性增殖特点,寡克隆的PCR产物再进行序列分析。结果:该病人外周血T细胞表达18个TCR Vα和12个TCR Vβ亚家族,其中Vα13、Vα18、Vβ1和Vβ21亚家族呈寡克隆性。CDR3序列分析获得3个TCR克隆基因序列,分别为Vα13NJα49、Vα18NJα50和Vβ21NDβNJβ2.7。结论:获得1例CML病人外周血克隆性增殖αβ+T细胞的3个TCR基因CDR3序列,提示病人可能存在与CML细胞抗原相关的Vα13/Vβ21或Vα18/Vβ21T细胞克隆。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 T细胞受体 基因扫描 CDR3 克隆性
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PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程 被引量：3
8
作者 李艳 王晓钰 +5 位作者 王丽京 徐涛 卢晓晔 蔡冬青 耿建国 杨雪松 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期613-619,共7页
PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在细胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构... PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在细胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构,表明PTEN可能参与胚胎早期发育过程的细胞迁移、增殖和分化。文章主要应用在体改变早期胚胎PTEN的表达水平来观察其对上胚层至中胚层细胞转换—EMT(Epithe-lial-mesenchymal transition)的作用。首先,原位杂交结果提示,内源性PTEN表达在原条以及之后的中胚层细胞结构如体节等。在体PTEN转染实验,体外培养至HH3期的鸡胚胎,转染Wt PTEN-GFP或移植Wt PTEN-GFP原条组织至未转染的同时期的宿主胚胎相同部位后,观察到PTEN转染细胞大都由上胚层迁移至原条并滞留于原条,不再参与中胚层细胞形成。移植实验也得到相似结果,发现在Wt PTEN-GFP阳性原条组织移植后很少细胞迁移出原条。另外在原肠胚期PTEN siRNA降调胚胎一侧PTEN基因后,降调侧中胚层细胞数明显少于正常侧。上述研究结果均提示PTEN基因在胚胎原肠胚期三胚层形成过程中可能具有抑制EMT的作用。 展开更多
关键词 EMT PTEN 基因表达 细胞迁移 原肠胚形成
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TIM-3、LAG-3和BTLA介导的血液肿瘤免疫耐受及其逆转研究 被引量：6
9
作者 陈少华 查显丰 李扬秋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1594-1597,共4页
近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑... 近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑制受体T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)、淋巴细胞活化基因-3(LAG3)和B和T淋巴细胞弱化子(BTLA)在血液肿瘤介导T细胞免疫耐受中的作用及其靶向治疗研究进展作一综述,旨在为血液肿瘤的免疫靶向治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 血液肿瘤 细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3 淋巴细胞活化基因-3 B和T淋巴细胞弱化子 靶向治疗
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不同疾病状态下类风湿关节炎患者外周血和关节液A20基因表达水平的改变特点 被引量：5
10
作者 朱丽花 王旭 +5 位作者 陈少华 杨力建 吴秀丽 李萡 周毅 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期523-526,共4页
目的分析A20和NF-κB基因在类风湿关节炎(RA)患者外周血和关节液中的表达水平及治疗前后表达水平的变化,探讨A20在RA炎症发生发展的作用。方法利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测RA患者外周血和关节液中单个核细胞A20和NF-κB基因表达... 目的分析A20和NF-κB基因在类风湿关节炎(RA)患者外周血和关节液中的表达水平及治疗前后表达水平的变化,探讨A20在RA炎症发生发展的作用。方法利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测RA患者外周血和关节液中单个核细胞A20和NF-κB基因表达水平以及RA患者治疗前(疾病活动期)和治疗后3个月外周血单个核细胞(PBMCs)A20和NF-κB基因表达水平。结果 1)疾病活动期54例RA患者PBMCs中A20表达水平(6.52±5.85)明显低于健康对照组(34.47±26.55,P<0.001),NF-κB表达水平(1.55±2.02)高于健康对照组(0.59±0.16,P=0.046);2)14例RA患者PBMCs中A20(8.07±6.25)和NF-κB(7.11±19.01)与关节液单个核细胞A20(7.74±5.74)和NF-κB(0.76±0.24)表达水平差异无统计学意义(P>0.05);3)19例RA患者治疗后3月病情明显缓解,治疗后PBMCs中A20表达水平(10.18±13.22)较治疗前(2.32±1.87)明显升高(P=0.019),但治疗后外周血A20表达水平仍然明显低于健康对照组(P<0.001);NF-κB表达水平在治疗前后无明显变化(P=0.403)。结论 RA患者外周血A20表达水平明显降低,并与NF-κB表达水平上调相对应,而RA疾病缓解后,A20表达水平有所恢复。RA患者关节液中A20和NF-κB表达水平与患者外周血中A20和NF-κB相似。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 A20 NF-ΚB
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淋巴细胞白血病患者CD3基因表达模式的变化 被引量：3
11
作者 沈琦 陈少华 +3 位作者 杨力建 李萡 闫小娟 李扬秋 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期131-135,共5页
目的:了解T细胞受体信号传导分子CD3γδεζ基因在T和B细胞白血病病人中的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测32例淋巴细胞肿瘤病人:急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)12例、慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)9例、急... 目的:了解T细胞受体信号传导分子CD3γδεζ基因在T和B细胞白血病病人中的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测32例淋巴细胞肿瘤病人:急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)12例、慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)9例、急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)11例及10例健康人外周血单个核细胞中CD3各亚单位表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算CD3分子γ、δ、ε和ζ链表达水平。结果:B-ALL病人的CD3分子γ、δ和ε链表达中位数水平分别为4.29%,0.67%,17.8%,与健康对照组相比,无显著性差异(P>0.05);而CD3γ链表达水平为0.99%,与健康对照组相比,显著降低(P=0.02)。B-CLL病人的CD3δ、ε基因的表达分别为0.52%,6.72%,与健康对照组相比,无显著性差异(P>0.05);而CD3γ、ζ基因(2.72%,0.77%)则比健康人明显下降(P<0.05)。在T-ALL病人中,CD3分子γ、δ和ε的表达(32.99%,12.9%,61.56%)与健康对照组相比,均明显上升(P<0.05),而CD3ζ的表达量为4.17%,与健康人无显著性差异(P=0.44)。B-ALL、B-CLL病人和健康对照组的CD3分子各链的表达模式依次为CD3ε,CD3γ,CD3ζ,CD3δ,而T-ALL病人的表达模式顺序为CD3ε,CD3γ,CD3δ,CD3ζ。结论:在B细胞白血病中CD3各基因的表达水平多为降低,其变化可能与机体T细胞免疫缺陷相关。而在T细胞白血病中CD3各基因表达水平增加可能是白血病性T细胞一个特点。 展开更多
关键词 CD3链基因 基因表达 实时定量PCR 淋巴细胞白血病 免疫缺陷
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中国恒河猴Mamu-B*1703/EGFP在K562和B16细胞中的表达及分布 被引量：3
12
作者 欧阳东云 徐丽慧 +2 位作者 高琦 郭贺 何贤辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期874-878,共5页
目的分析恒河猴主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子重链的亚细胞分布,建立适于体外研究恒河猴MHCⅠ类分子表达和抗原呈递功能的细胞系。方法将含Mamu-B*1703重链基因真核表达载体pEGFP-N1分别转染K562... 目的分析恒河猴主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子重链的亚细胞分布,建立适于体外研究恒河猴MHCⅠ类分子表达和抗原呈递功能的细胞系。方法将含Mamu-B*1703重链基因真核表达载体pEGFP-N1分别转染K562和B16细胞,细胞收集后以W6/32单克隆抗体或抗Mamu-B*1703抗血清及PE标记二抗染色,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分析Mamu-B*1703复合体在细胞内和细胞表面的表达。结果在K562和B16细胞的细胞质内均可观察到与Mamu-B*1703重链基因融合表达的绿色荧光蛋白激发后的绿色荧光,即2种细胞均可表达外源Mamu-B*1703重链分子;但通过藻红蛋白标记的抗MHCⅠ类分子复合体抗体染色显示,Mamu-B*1703复合体仅表达于K562细胞表面,而不表达于B16细胞表面。结论Mamu-B*1703重链可与人K562细胞而不能与小鼠B16细胞内的βm轻链结合组装成复合体,表达于细胞表面,提示研究恒河猴的MHCⅠ分子表达应利用人类的细胞株。 展开更多
关键词 主要组织相容性复合体Ⅰ类分子 Mamu-B＊1703 中国恒河猴 转染
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ITP中T细胞活化信号分子c-Cbl和Cbl-b的表达变化 被引量：3
13
作者 钟隽 陈少华 +5 位作者 郁志 陆帅 谭家雄 杨力建 李萡 李扬秋 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期472-475,共4页
目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)中T细胞活化信号通路相关分子Cbl-b和c-Cbl基因的表达情况.方法:利用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测18例ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)中Cbl-b和c-Cbl基因的表达水平,20例健... 目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)中T细胞活化信号通路相关分子Cbl-b和c-Cbl基因的表达情况.方法:利用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测18例ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)中Cbl-b和c-Cbl基因的表达水平,20例健康成人作为对照.结果:ITP组Cbl-b的表达水平(中位数为0.091%)与健康成人组Cbl-b的表达水平(中位数为0.366%)相比,明显降低(P<0.001);而c-Cbl基因在ITP组中的表达水平(中位数为0.372%)与健康成人组的表达水平(中位数为0.298%)相比没有统计学差异,但c-Cbl基因在ITP女性患者样本中的表达水平(中位数为0.236%)明显低于男性患者样本c-Cbl的表达水平(中位数为0.479%)(P=0.039).结论:ITP患者外周血中Cbl-b表达下调,可能是其T细胞免疫异常活化的原因之一. 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症 CBL-B C-CBL 基因表达
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PPP2R5C转录本在正常人和血液肿瘤病人中的分布情况 被引量：3
14
作者 陈宇 郑海涛 +4 位作者 陈少华 杨力建 李萡 卢育洪 李扬秋 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期550-554,共5页
目的:建立分析不同PPP2R5C转录本检测方法,分析正常人和血液肿瘤病人中5种PPP2R5C基因转录本的表达特点。方法:根据PPP2R5C基因的结构特点,设计4对引物,利用RT-PCR方法分析9例正常人、7例T细胞-非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)、11例B细胞-急性... 目的:建立分析不同PPP2R5C转录本检测方法,分析正常人和血液肿瘤病人中5种PPP2R5C基因转录本的表达特点。方法:根据PPP2R5C基因的结构特点,设计4对引物,利用RT-PCR方法分析9例正常人、7例T细胞-非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)、11例B细胞-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)和8例急性髓细胞白血病(AML)病人外周血单个核细胞(PBMC)中PPP2R5C基因的表达情况。结果:所设计的4对引物,均可在样本中扩增到预期PCR产物,其中第1对引物可扩增两个不同大小PCR产物(包含12+13+14外显子的大片段及仅含12+14外显子的小片段),而另3对对引物所扩增的产物分别为10+11+12+12 a外显子,Ⅲ+2外显子和Ⅳ+2外显子的基因片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。结果显示所有样本均表达全部PPP2R5C转录本。结论:初步建立区分不同PPP2R5C转录本的方法,各转录本在正常人和不同血液肿瘤病人中的分布情况基本一致。 展开更多
关键词 PPP2R5C基因 转录本 聚合酶链式反应 血液肿瘤
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心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响 被引量：10
15
作者 齐绪峰 洪绯 +6 位作者 罗志毅 李艳梅 李英镇 李昀键 陈叙伟 沈晓涛 郑馨 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1084-1086,共3页
目的探讨心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响。方法 SD大鼠通过高脂饲料喂养8周后建立高血脂模型,第9周起设对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),直到14周,用试剂盒及血糖监测系统测量血清中甘油... 目的探讨心舒宝对高血脂模型大鼠血脂水平的影响。方法 SD大鼠通过高脂饲料喂养8周后建立高血脂模型,第9周起设对照组(高脂饲料)、实验组1(普通饲料+心舒宝)、实验组2(高脂饲料+心舒宝),直到14周,用试剂盒及血糖监测系统测量血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及血糖浓度。结果①与对照组相比,心舒宝可有效降低高血脂模型大鼠血清中的TC及LDL水平;②心舒宝对高血脂大鼠模型血清中的TG、HDL及血糖的水平均无显著影响。结论心舒宝可有效降低高血脂模型大鼠血清中的TC与LDL水平。 展开更多
关键词 心舒宝 高血脂 大鼠
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CML病人外周血T细胞CD3基因表达模式变化 被引量：3
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作者 杨力建 陈少华 +4 位作者 王亮 陈思 郁志 卢育洪 李扬秋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期937-941,共5页
在我们前期研究发现慢性髓系白血病(CML)病人中T细胞受体信号传导分子CD3ζ基因表达下调的基础上,本研究进一步分析病人外周血中全部4种CD3γδεζ基因的表达模式特点,以深入了解病人的T细胞免疫中信号转导的变化。利用SYBR GreenⅠ实... 在我们前期研究发现慢性髓系白血病(CML)病人中T细胞受体信号传导分子CD3ζ基因表达下调的基础上,本研究进一步分析病人外周血中全部4种CD3γδεζ基因的表达模式特点,以深入了解病人的T细胞免疫中信号转导的变化。利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测17例初诊慢性期CML病人外周血单个核细胞中CD3γ、δ、ε和ζ链的表达水平,以β2微球蛋白基因(β2MG)作为内参照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算CD3分子各亚单位的相对mRNA表达量,以17例健康成人外周血作为对照。结果表明:CML中CD3γ、δ、ε基因表达水平分别为2.344%,0.515%和3.516%(中位数),与健康对照组比较(3.093%,0.853%和2.302%)并没有显著性差异(p=0.072,p=0.190,p=0.615),而CML中CD3ζ链基因的表达水平(0.395%)则明显低于健康对照组(1.538%)(p<0.001)。在CML中4种CD3分子表达水平模式依次为CD3ε>CD3γ>CD3δ>CD3ζ,而对照组中则为CD3γ>CD3ε>CD3ζ>CD3δ。结论:本研究首先提供了CML病人中CD3各基因表达模式情况,显示以CD3ζ为主的TCR信号分子的表达缺陷,4种CD3链分子的表达水平模式也发生变化。 展开更多
关键词 慢性髓系白血病 CD3链基因 基因表达 免疫缺陷
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从炎症调节因子到肿瘤抑制因子——A20的特点及其在淋巴细胞肿瘤发生中的作用 被引量：7
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作者 李扬秋 杨力建 +1 位作者 陈少华 李萡 《循证医学》 CSCD 2011年第1期54-59,共6页
A20是炎症信号传导的中心调节因子—NF-κB抑制因子,而近年研究发现A20更重要的功能是作为一个肿瘤抑制因子,其缺失在淋巴细胞肿瘤的发生中有重要的作用。综述近年所报道的A20生物学功能、分子机制及其在淋巴细胞肿瘤中调节作用的研究... A20是炎症信号传导的中心调节因子—NF-κB抑制因子,而近年研究发现A20更重要的功能是作为一个肿瘤抑制因子,其缺失在淋巴细胞肿瘤的发生中有重要的作用。综述近年所报道的A20生物学功能、分子机制及其在淋巴细胞肿瘤中调节作用的研究进展。 展开更多
关键词 淋巴细胞肿瘤 A20 肿瘤抑制因子
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CARMA1-BCL10-MALT1调节T细胞增殖分化作用及其在T细胞肿瘤中的改变情况 被引量：5
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作者 王旭 胡峻岩 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期837-841,共5页
由CARMA1、BCL10和MALT1 3种蛋白分子形成的CBM复合物,是活化NF-κB的信号转导通路中的重要信号分子,在调控淋巴细胞增殖和分化的过程中具有重要作用。本文主要综述了该信号通路分子的结构和主要在T细胞增殖和分化中的功能的研究新进展... 由CARMA1、BCL10和MALT1 3种蛋白分子形成的CBM复合物,是活化NF-κB的信号转导通路中的重要信号分子,在调控淋巴细胞增殖和分化的过程中具有重要作用。本文主要综述了该信号通路分子的结构和主要在T细胞增殖和分化中的功能的研究新进展以及在T细胞肿瘤中的异常改变和相关分子机制。 展开更多
关键词 CARMA1 BCL10 MALT1 分化 T细胞肿瘤
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MALT1-A20-NF-κB信号分子在MM中的表达特点 被引量：2
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作者 王旭 徐玲 +7 位作者 张帆 徐艳 吴秀丽 杨力建 陈少华 李萡 卢育洪 李扬秋 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期373-377,共5页
目的:了解多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)、A20与核转录因子κB(NF-κB)基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR和相对定量分析法检测20例MM患者(Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期10例)及21例健... 目的:了解多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)、A20与核转录因子κB(NF-κB)基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR和相对定量分析法检测20例MM患者(Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期10例)及21例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1、A20和NF-κB基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2m)作为内参;采用相对定量公式:α^(-△Ct)×100%,分别计算MALT1、A20和NF-κB基因的表达水平。结果:MM患者PBMC中的MALT1和A20基因的表达水平较健康人都有明显的降低(P=0.000),而MM中NF-κB基因的表达水平较正常人有所升高,但无统计学差异(P>0.05)。在健康人组,MALT1和NF-κB的表达水平呈现正相关(P=0.001,r=0.666),而在MM组,MALT1、A20与NF-κB 3种基因均不存在明显相关性。同时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1基因的表达量较健康人明显降低(P<0.05),A20基因的表达量较健康人明显降低(P<0.01),而Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1、A20和NF-κB之间的表达情况均无统计学差异。结论:当MALT1-A20介导的细胞免疫和炎症的信号通路发生异常改变时,可能与MM的发生发展有着密切关系。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 多发性骨髓瘤(MM) 黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1) A20 NF-ΚB 基因表达
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下调PPP2R5C表达对Jurkat细胞GSK-3β、MDM2、pTEN、TP53通路相关调控基因表达谱的影响 被引量：2
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作者 陈宇 黄欣 +4 位作者 刘思初 杨力建 陈少华 罗更新 李扬秋 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1067-1070,共4页
目的利用基因芯片技术研究RNA干扰下调PPP2R5C对Jurkat细胞中GSK-3β、MDM2、pTEN、TP53通路相关基因表达的影响。方法利用核转染技术将PPP2R5C-si RNA799转导Jurkat细胞,培养48 h后,提取细胞总RNA,纯化m RNA后反转录制备目标序列,与Aff... 目的利用基因芯片技术研究RNA干扰下调PPP2R5C对Jurkat细胞中GSK-3β、MDM2、pTEN、TP53通路相关基因表达的影响。方法利用核转染技术将PPP2R5C-si RNA799转导Jurkat细胞,培养48 h后,提取细胞总RNA,纯化m RNA后反转录制备目标序列,与Affymetrix基因表达谱芯片3’IVT杂交,以Affymetrix Gene Chip Scanner 3000扫描仪扫描得到原始图像数据,并应用Gene Spring GX 11.0软件进行差异表达谱分析。结果基因芯片分析GSK-3β、MDM2、pTEN、TP53信号通路相关的47个基因,发现全部基因发生了差异表达,其中上调基因有22个,下调基因有25个。明显上调的基因有SNAI1、APC、CDKN1A、ATM、MDM2和pTEN,而明显下调的基因只有GSK-3β。结论下调Jurkat细胞PPP2R5C基因时,在一定程度上选择性调节涉及细胞增殖和凋亡相关的GSK-3β、MDM2、pTEN和TP53信号通路基因的表达,从而抑制Jurkat细胞增殖。 展开更多
关键词 PPP2R5C基因 基因芯片 核转染 GSK-3Β MDM2 PTEN TP53
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