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基于UPLC-Q-TOF/MS整合网络药理学探讨平肝益肾方治疗自发性高血压大鼠靶器官损害的效应机制 被引量:1
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作者 章伟婷 王琼 +8 位作者 樊亚东 王慧惠 陈山珊 张思奇 陈溢滢 吴磊 戴国梁 宋冰冰 方祝元 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期949-961,共13页
目的 探究平肝益肾方治疗自发性高血压大鼠靶器官损害的效应机制。方法 使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)测定平肝益肾方的化学成分,结合网络药理学方法对平肝益肾方的化学成分进行靶标分析、功能富集,预测平肝益... 目的 探究平肝益肾方治疗自发性高血压大鼠靶器官损害的效应机制。方法 使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)测定平肝益肾方的化学成分,结合网络药理学方法对平肝益肾方的化学成分进行靶标分析、功能富集,预测平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的潜在作用机制。将自发性高血压大鼠随机分为模型组、平肝益肾方低剂量组(2 g·kg^(-1))、平肝益肾方高剂量组(5 g·kg^(-1))和缬沙坦组(7.2 mg·kg^-1)),每组6只。Wistar-Kyoto大鼠作为对照组,对照组和模型组大鼠灌胃生理盐水,连续灌胃8周。采用HE和Masson染色,观察大鼠心脏和胸主动脉的病理学损伤和纤维化程度。采用免疫组织化学染色和Western blot检测大鼠心脏、肝脏和肾脏中EGFR的表达水平。采用免疫荧光染色检测大鼠心脏、肝脏和肾脏中EGFR和EEA1共定位情况。结果 通过UPLC-Q-TOF/MS检测出平肝益肾方中的26种化学成分。网络药理学揭示EGFR、PIK3R1和EP300等可能是平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的关键治疗靶点,平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害可能与EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性、血脂与动脉粥样硬化和HIF-1信号通路等密切相关。平肝益肾方高剂量组可显著降低大鼠的收缩压和平均动脉压(P<0.05,P<0.01),减轻心脏和胸主动脉的病理学损伤和纤维化程度(P<0.01,P<0.001),显著降低大鼠肝脏和肾脏中EGFR的表达水平(P<0.01),改善肝脏与肾脏的纤维化,显著降低肾脏中EGFR和EEA1的共定位水平(P<0.001),调节EGFR在早期内体的堆积,改善肾脏的纤维化。结论 整合UPLC-Q-TOF/MS、网络药理学和自发性高血压大鼠模型初步探索平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的效应机制,为平肝益肾方治疗高血压进一步的机制研究和临床应用提供科学依据。 展开更多
关键词 平肝益肾方 高血压 靶器官损害 UPLC-Q-TOF/MS 网络药理学
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槲皮素调节SDF-1/CXCR4信号轴对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢结构及功能的影响
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作者 郭倩 马蔚蓉 +2 位作者 王海丹 陈婕 谈勇 《河北医药》 CAS 2024年第21期3237-3241,共5页
目的研究槲皮素通过调节基质细胞衍生因子(SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号通路对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢结构及功能的影响。方法通过注射环磷酰胺构建POI大鼠模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、槲皮素低剂量组(25.0 mg/... 目的研究槲皮素通过调节基质细胞衍生因子(SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号通路对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢结构及功能的影响。方法通过注射环磷酰胺构建POI大鼠模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、槲皮素低剂量组(25.0 mg/kg)、槲皮素高剂量组(100 mg/kg)、槲皮素高剂量+CTCE-0214组(100 mg/kg槲皮素+10.0 mg/kg CTCE-0214),对照组大鼠给予等量0.9%氯化钠溶液。ELISA试剂盒检测大鼠血清中促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E_(2))、抗苗勒管激素(AMH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的表达;计算5组大鼠的卵巢指数;HE染色检测大鼠卵巢组织病理损伤并进行卵泡计数;免疫组化法检测卵巢雌激素受体(ER)蛋白的表达;Western blot检测大鼠卵巢组织中SDF-1、CXCR4蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中FSH、MDA水平增加,E_(2)、AMH、SOD水平减少,卵巢指数降低,卵巢组织中成熟卵泡数目降低,ER蛋白表达减少,卵巢组织中闭锁卵泡数量、SDF-1、CXCR4蛋白表达增加(P<0.05)。与模型组比较,槲皮素低剂量组和槲皮素高剂量组大鼠血清中FSH、MDA水平降低,E_(2)、AMH、SOD水平升高,卵巢指数增加,卵巢组织中成熟卵泡数目、ER蛋白表达增加,卵巢组织中闭锁卵泡数量、SDF-1、CXCR4蛋白表达减少(P<0.05)。槲皮素高剂量+CTCE-0214组与槲皮素高剂量组比较,POI大鼠卵巢结构受损加重,卵巢功能受到影响,差异有统计学意义(P<0.05)。结论槲皮素可能通过抑制SDF-1/CXCR4信号通路对早发性卵巢功能不全大鼠的卵巢结构及功能发挥保护作用。 展开更多
关键词 槲皮素 基质细胞衍生因子 CXC趋化因子受体4 早发性卵巢功能不全
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潜阳育阴颗粒对SHR大鼠肾脏CTGF的影响 被引量:4
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作者 严士海 方祝元 +3 位作者 王欣彤 张思奇 高峰 赵宁伟 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第2期386-389,I0008,I0009,共6页
目的:研究潜阳育阴颗粒对高血压肾病的治疗作用与机制。方法:随机将32只12周龄雄性SHR大鼠等分为4组:模型组(SHR)、潜阳育阴组(SHR+Q)、贝那普利组(SHR+B)、及潜阳育阴+贝那普利组(SHR+Q+B)。另取8只年龄、性别配对的WKY大鼠为正常组。S... 目的:研究潜阳育阴颗粒对高血压肾病的治疗作用与机制。方法:随机将32只12周龄雄性SHR大鼠等分为4组:模型组(SHR)、潜阳育阴组(SHR+Q)、贝那普利组(SHR+B)、及潜阳育阴+贝那普利组(SHR+Q+B)。另取8只年龄、性别配对的WKY大鼠为正常组。SHR+Q、SHR+B及SHR+Q+B组分别以潜阳育阴混悬液5 g/(kg·d)、贝那普利混悬液1.67 mg/(kg·d)及潜阳育阴混悬液5 g/(kg·d)+贝那普利混悬液1.67mg/(kg·d)灌胃。正常组及模型组不给药,予等量蒸馏水灌胃,五组均正常饮食。灌胃周期共8周。实验前及实验后均采用无创伤性尾静脉测压法测量大鼠血压。实验8周后,用大鼠代谢笼按组分别装大鼠,接取各组大鼠24 h的尿液,采用全自动生化仪和放免法检测大鼠尿m-ALB及尿NAG含量;HE染色观测肾脏病变;Masson染色观察肾组织纤维化;Elisa法检测肾组织Pro、Ald、Ang II含量;Western Blot法检测肾组织ACE、AT1R、CTGF蛋白表达。结果:SHR组血压显著增加,尿液中m-ALB、NAG浓度增高,潜阳育阴颗粒可以降低血压与m-ALB、NAG。模型组出现Ang II、AT1R、CTGF活性的上调,而潜阳育阴颗粒对其有抑制作用。结论:潜阳育阴药物对高血压肾病有治疗作用,减轻高血压肾病过程中的纤维化,推测其治疗高血压肾脏病可能与其干预CTGF通路有关。 展开更多
关键词 潜阳育阴颗粒 高血压肾病 CTGF
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基于网络药理学和分子对接探讨补肾宁心方治疗早发性卵巢功能不全的作用机制
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作者 郭倩 马蔚蓉 +2 位作者 陈婕 王海丹 谈勇 《空军军医大学学报》 2025年第4期483-492,共10页
目的探讨补肾宁心方治疗早发性卵巢功能不全(POI)的作用靶点。方法通过对TCMSP、BATMAN-TCM数据库的检索获得补肾宁心方中各药物的活性成分,POI疾病的靶点通过GeneCards、OMIM、PharmGKB和DrugBank数据库采集,随后将活性成分与疾病基因... 目的探讨补肾宁心方治疗早发性卵巢功能不全(POI)的作用靶点。方法通过对TCMSP、BATMAN-TCM数据库的检索获得补肾宁心方中各药物的活性成分,POI疾病的靶点通过GeneCards、OMIM、PharmGKB和DrugBank数据库采集,随后将活性成分与疾病基因靶点取交集,得到补肾宁心方治疗POI的预测靶点。利用Cytoscape 3.8.0构建“药物成分靶点疾病”网络;运用STRING数据库和Cytoscape构建蛋白质蛋白质相互作用网络,并对核心网络进行了精简;运用R软件进行GO富集和KEGG通路富集分析,将网络中的度值较高的成分与核心靶点进行分子对接。结果筛选出140个主要活性成分,涉及272个基因靶点,其中主要活性成分包括山柰酚、木樨草素、槲皮素、隐丹参酮、丹参酮Ⅱa、谷甾醇、豆甾醇、当归素等;核心靶点基因包括STAT3、TP53、ESR1、AKT1、MAPK1、RELA等;富集到GO生物过程2711个、细胞组分102个、分子功能293个,包括流体剪切应力和动脉粥样硬化、MAPK、TNF、IL-17等KEGG信号通路188条。分子对接结果表明,主要活性成分与核心靶点间具有较好的结合活性。结论补肾宁心方治疗POI可能是通过山柰酚、木樨草素、槲皮素、隐丹参酮、丹参酮Ⅱa、谷甾醇、豆甾醇、当归素等活性成分作用于STAT3、TP53、ESR1、AKT1、MAPK1、RELA等核心靶点,通过流体剪切应力和动脉粥样硬化、MAPK、TNF、IL-17等信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 补肾宁心方 早发性卵巢功能不全 网络药理学 分子对接 作用机制
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坤泰胶囊对卵泡凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响 被引量:7
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作者 潘文华 吴新安 +1 位作者 陈慧慧 王海丹 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2017年第6期519-521,共3页
目的:观察坤泰胶囊对卵泡凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响。方法:建立卵巢早衰小鼠模型,造模成功后随机分为正常组、模型组、戊酸雌二醇片组、坤泰胶囊组。正常组、模型组给予生理盐水,戊酸雌二醇片组和坤泰胶囊组均以0.2 mL/10 g的体积灌... 目的:观察坤泰胶囊对卵泡凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响。方法:建立卵巢早衰小鼠模型,造模成功后随机分为正常组、模型组、戊酸雌二醇片组、坤泰胶囊组。正常组、模型组给予生理盐水,戊酸雌二醇片组和坤泰胶囊组均以0.2 mL/10 g的体积灌胃给予相应药物。实验末,取卵巢、子宫称重,计算脏器指数,并以放免法和免疫组化法分别检测小鼠血清E2、FSH的水平和卵巢组织Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:坤泰胶囊组小鼠卵巢质量比模型组明显增加,卵巢指数与模型组相比差异具有显著性(P<0.05);坤泰胶囊组小鼠血清中E2水平比模型组小鼠明显升高、FSH水平明显降低,相对模型组差异具有显著性(P<0.05);坤泰胶囊组小鼠卵巢组织Bax蛋白表达比模型组明显降低,Bcl-2蛋白表达比模型组小鼠明显升高,与模型组比较差异均具有显著性(P<0.05)。结论:坤泰胶囊可以促进卵巢的生长,并通过调节卵泡凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达来抑制卵巢功能早衰。 展开更多
关键词 坤泰胶囊 卵泡凋亡 BCL-2 BAX
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补肾健脾方对自然衰老小鼠卵巢端粒的调控作用 被引量:3
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作者 王海丹 陆葳 +4 位作者 郭红玉 马蔚蓉 王琼 严士海 符蕊 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期5191-5194,共4页
目的:观察自然衰老小鼠模型和端粒酶的相关性以及补肾健脾方对自然衰老小鼠模型端粒调控作用的影响。方法:BALB/c小鼠按月龄分为正常组、模型组、补肾健脾方组,分别给予药物或蒸馏水,干预4周后,取小鼠血清,卵巢。放射免疫法检测小鼠血... 目的:观察自然衰老小鼠模型和端粒酶的相关性以及补肾健脾方对自然衰老小鼠模型端粒调控作用的影响。方法:BALB/c小鼠按月龄分为正常组、模型组、补肾健脾方组,分别给予药物或蒸馏水,干预4周后,取小鼠血清,卵巢。放射免疫法检测小鼠血清雌二醇(E2)的水平,HE染色观察卵巢组织病理形态学改变,TUNEL法检测组织细胞凋亡,Real Time PCR方法检测卵巢端粒酶活性以及端粒的相对长度。结果:与正常组比较,模型组小鼠E_(2)水平、端粒酶活性及端粒相对长度显著降低(P<0.05,P<0.01),卵巢颗粒细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与模型组比较,补肾健脾方组E_(2)水平、端粒酶活性及端粒相对长度显著升高(P<0.05,P<0.01),卵巢颗粒细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。模型组卵巢闭锁卵泡数量多于正常组,补肾健脾方组卵巢中的生长卵泡和成熟卵泡数量多于模型组。结论:补肾健脾方通过提高雌激素水平,促进卵泡的发育,抑制卵巢颗粒细胞的凋亡,而且可以增加卵巢端粒酶的活性和端粒长度,进而抑制小鼠卵巢衰老。 展开更多
关键词 补肾健脾方 卵巢衰老 端粒长度 端粒
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