流式细胞术在肿瘤免疫学中的应用 被引量：4

1

作者 刘亮 《药品评价》 CAS 2012年第18期46-48,共3页

流式细胞术（Flow Cytometry,FCM）是70年代发展起来的一种快速对单细胞定量分析和分选的新技术,能定量分析细胞的生物化学成分。其检测速度之快,统计学精度之高,是其他的方法无可比拟的,可同时从一个细胞中测得多种参数（如DNA、

关键词 流式细胞术 肿瘤免疫 肿瘤诊断

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流式细胞仪专用鸡红细胞的制备方法 被引量：4

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作者 刘江惠 左连富 +1 位作者 郭建文 刘亮 《河北医科大学学报》 CAS 2008年第6期873-875,共3页

目的制备流式细胞仪专用鸡红细胞。方法首先将采集的鸡红细胞制成纯净红细胞,然后用乙醇或甲醛保养液固定,观察各时间段鸡红细胞的DNA含量G0/G1峰X轴细胞半高峰的变易系数(chalf peak X-axis-coeffience of variation,HP X-CV)值的变化... 目的制备流式细胞仪专用鸡红细胞。方法首先将采集的鸡红细胞制成纯净红细胞,然后用乙醇或甲醛保养液固定,观察各时间段鸡红细胞的DNA含量G0/G1峰X轴细胞半高峰的变易系数(chalf peak X-axis-coeffience of variation,HP X-CV)值的变化。结果固定后的鸡红细胞与商售鸡红细胞DNA含量G0/G1峰HP X-CV值相比,完全符合仪器要求且有更多的优势。结论自制鸡红细胞完全可以替代进口鸡红细胞制品。 展开更多

关键词 流式细胞术 红细胞 细胞培养技术

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沉默PLK1基因表达对肺腺癌H1792细胞肿瘤生物学行为影响的研究

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作者 邓皓文 汪志宇 +3 位作者 刘亮 吴瑞峰 李超 王雷 《河北医科大学学报》 CAS 2019年第11期1246-1250,共5页

目的探讨PLK1表达下调对肺腺癌H1792细胞肿瘤生物学行为的影响,并分析相关机制。方法将PLK1 siRNA和control siRNA转染肺腺癌H1792细胞48 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测肺腺癌H1792细胞PLK1 mRN... 目的探讨PLK1表达下调对肺腺癌H1792细胞肿瘤生物学行为的影响,并分析相关机制。方法将PLK1 siRNA和control siRNA转染肺腺癌H1792细胞48 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测肺腺癌H1792细胞PLK1 mRNA表达水平;采用Western blot法检测H1792细胞中PLK1、E-cadherin、Vimentin蛋白表达;再通过流式细胞术检测肺腺癌H1792细胞检测周期分布的变化情况;Transwell实验检测H1792细胞侵袭能力的改变。结果PLK1 siRNA组PLK1 mRNA表达水平显著低于control siRNA组(P<0.05)。PLK1 siRNA组PLK1蛋白和Vimentin蛋白表达显著低于control siRNA组,E-cadherin蛋白表达显著高于control siRNA组(P<0.05)。PLK1 siRNA组G2/M期细胞比例显著高于control siRNA组,S期细胞比例显著低于control siRNA组(P<0.05)。siRNA组穿膜细胞数显著少于control siRNA组(P<0.05)。结论PLK1在肺腺癌的生长和侵袭转移中发挥重要作用。 展开更多

关键词 肺肿瘤 RNA干扰 细胞周期

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OPN基因与食管癌浸润及青蒿琥酯抑制食管癌细胞生长的关系研究 被引量：5

4

作者 刘亮 王莉 +1 位作者 杨祺 左连富 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期23-28,共6页

目的探讨骨桥蛋白(OPN)基因与食管癌发生及浸润转移的关系,以及青蒿琥酯(Art)抑制食管癌细胞生长的作用与OPN蛋白表达的关系。方法应用原位杂交及免疫组织化学方法检测45例食管鳞癌组织、21例不典型增生组织、24例正常的食管黏膜上皮组... 目的探讨骨桥蛋白(OPN)基因与食管癌发生及浸润转移的关系,以及青蒿琥酯(Art)抑制食管癌细胞生长的作用与OPN蛋白表达的关系。方法应用原位杂交及免疫组织化学方法检测45例食管鳞癌组织、21例不典型增生组织、24例正常的食管黏膜上皮组织中OPN基因及蛋白的表达,并分析其与食管癌临床病理特征的关系。以不同浓度(0、30、60、120μmol/L)青蒿琥酯干预食管鳞癌Eca109细胞24h,采用流式细胞术检测细胞周期及细胞中OPN蛋白的表达水平。结果 OPN基因及蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平显著高于不典型增生及正常组织(P<0.01),且不典型增生组织中的表达水平显著高于正常组织(P<0.05)。OPN基因及蛋白在食管鳞癌组织中的表达与淋巴结转移及浸润深度呈正相关(P<0.05),与患者性别、年龄及肿瘤的分化程度无明显相关(P>0.05)。青蒿琥酯作用24h后,Eca109细胞增殖指数及OPN蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),且具有浓度依赖性。结论 OPN基因在食管鳞癌组织中异常高表达,可能参与了食管癌的发生及浸润转移。青蒿琥酯抑制食管癌细胞生长的作用可能与其下调细胞中OPN蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 食管肿瘤 骨桥蛋白质 肿瘤转移 细胞增殖

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表没食子儿茶素没食子酸酯调控食管癌细胞线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用研究 被引量：1

5

作者 刘亮 巨英超 +2 位作者 左静 曲艺 尤殿平 《河北医药》 CAS 2016年第10期1457-1460,共4页

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)调控食管癌细胞Ec9706线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用。方法不同浓度(100、200、300 mg/L)EGCG作用Ec9706细胞24 h后,Annexin V/PI双标流式细胞术方法检测细胞凋亡水... 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)调控食管癌细胞Ec9706线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用。方法不同浓度(100、200、300 mg/L)EGCG作用Ec9706细胞24 h后,Annexin V/PI双标流式细胞术方法检测细胞凋亡水平;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位;Western Blot方法检测细胞中Caspase-3蛋白表达水平,0.9%氯化钠溶液代替EGCG作为对照组。结果 100、200、300 mg/L EGCG作用Ec9706细胞24 h后,与对照组相比Ec9706细胞凋亡率显著增高(P<0.01),300 mg/L EGCG组细胞凋亡率显著高于100、200 mg/L EGCG组(P<0.01)。EGCG可显著降低细胞线粒体膜电位(P<0.01),且具有剂量依赖性。western-blot结果显示,EGCG组与对照组相比Caspase-3蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。结论 EGCG具有诱导食管癌Ec9706细胞凋亡作用,其作用机制可能与调控线粒体膜电位引起内源性细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 食管癌 细胞凋亡 流式细胞术

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青蒿琥酯对人食管癌细胞的抑制作用及其可能的机制 被引量：8

6

作者 刘亮 王静 +2 位作者 郭建文 刘江惠 左连富 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第3期278-283,共6页

目的:探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对人食管癌细胞的抑制作用及其可能的机制。方法:将人食管癌细胞Eca109接种到裸鼠左前上肢,建立食管癌荷瘤裸鼠动物模型,腹腔注射用药,第1组Art 100 mg/kg,第2组Art 200 mg/kg,第3组Art 300 mg/kg,第... 目的:探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对人食管癌细胞的抑制作用及其可能的机制。方法:将人食管癌细胞Eca109接种到裸鼠左前上肢,建立食管癌荷瘤裸鼠动物模型,腹腔注射用药,第1组Art 100 mg/kg,第2组Art 200 mg/kg,第3组Art 300 mg/kg,第4组顺铂(cisplalin,又称DDP)3 mg/kg,第5组生理盐水对照组。观察各组裸鼠移植瘤体积和质量的变化,流式细胞术检测移植瘤组织的细胞周期、凋亡以及细胞分裂周期素25A(cell division cycle 25 A,CDC25A)、Smad3和转化生长因子-α(transforming growth facto-β,TGF-β)蛋白的表达,RT-PCR检测移植瘤组织中CDC25A、Smad3和TGF-βmRNA的表达水平。结果:成功建立食管癌荷瘤裸鼠动物模型。Art治疗后,裸鼠移植瘤体积和质量均明显小于对照组(P<0.05或P<0.01),其中Art 200 mg/kg组抑瘤作用最强,与DDP组相当。Art组与对照组相比,细胞周期G_0-G_1期显著增高(P<0.05)、S期显著减少(P<0.05),凋亡率显著增高(P<0.05);CDC25A蛋白及mRNA显著减少(P<0.05),Smad3和TGF-β蛋白及mRNA显著增高(P<0.05)。结论:Art具有抑制人食管癌细胞增殖的作用,其机制可能与通过下调CDC25A、上调Smad3和TGF-β的表达量而使肿瘤细胞停滞在G_0-G_1期,并诱导肿瘤细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 食管鳞状细胞癌 细胞分裂周期素25A SMAD3 转化生长因子-Β 凋亡

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Caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜鳞状细胞癌化疗前后的表达及其意义 被引量：6

7

作者 郭建文 刘亮 +3 位作者 左连富 刘江惠 王静 刘辉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期93-94,98,共3页

目的:观察caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜鳞状细胞癌平阳霉素治疗前后的表达及其临床意义。方法:临床标本取自河北医科大学第四医院口腔科1988年至2005年的23例病理学确诊的口腔鳞状细胞癌患者。流式细胞术检测caspase-3、P73、CDK4在... 目的:观察caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜鳞状细胞癌平阳霉素治疗前后的表达及其临床意义。方法:临床标本取自河北医科大学第四医院口腔科1988年至2005年的23例病理学确诊的口腔鳞状细胞癌患者。流式细胞术检测caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜鳞状细胞癌中的表达。结果:Caspase-3在口腔鳞癌中的表达水平显著性低于正常组织(P<0.05),平阳霉素化疗后表达显著性增高(P<0.05)。P73表达量在口腔鳞状细胞癌中明显升高,平阳霉素化疗后显著性下降(P<0.05)。口腔鳞状细胞癌中CDK4表达明显增高,平阳霉素化疗后显著性下降(P<0.05)。结论:Caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜中的异常表达与口腔鳞癌的发生有关,平阳霉素可能通过调节caspase-3、P73、CDK4的表达起到抗癌作用。 展开更多

关键词 口腔黏膜鳞状细胞癌 CASPASE-3 P73 CDK4 平阳霉素

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抗原致敏IL-27基因修饰的树突细胞活化的细胞毒性T淋巴细胞对食管癌裸鼠移植瘤生长的影响 被引量：7

8

作者 王雷 刘丽华 +3 位作者 刘庆熠 王林 刘亮 单保恩 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期609-613,共5页

目的研究白细胞介素27(IL-27)基因转染树突细胞(DC)体内诱导免疫杀伤食管癌细胞的效能及其机制。方法采用基因转染的方法建立表达IL-27基因的树突细胞(DCIL-27),构建人食管癌裸鼠移植瘤模型,皮下注射食管癌细胞抗原致敏、IL-27基因修饰... 目的研究白细胞介素27(IL-27)基因转染树突细胞(DC)体内诱导免疫杀伤食管癌细胞的效能及其机制。方法采用基因转染的方法建立表达IL-27基因的树突细胞(DCIL-27),构建人食管癌裸鼠移植瘤模型,皮下注射食管癌细胞抗原致敏、IL-27基因修饰的DC(DCIL-27+Ag)活化的特异细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。30只裸鼠分为PBS组、Tnaive组、DC+Tnaive组、DCIL-27+Tnaive组和DCIL-27+Ag+Tnaive组,每组6只。观察荷瘤裸鼠的肿瘤体积、瘤重和抑瘤率,流式细胞术检测移植瘤细胞的细胞周期、凋亡率及凋亡相关蛋白Fas和caspase-3的表达。结果 RT-PCR结果显示,DCIL-27细胞中有IL-27 p28和EBI3亚基基因表达,提示转染成功。DCIL-27+Ag+Tnaive组裸鼠移植瘤的体积和重量明显下降,抑瘤率为58.28%,明显大于其他各组(P<0.01)。流式细胞术分析显示,DCIL-27+Ag+Tnaive组裸鼠肿瘤组织内细胞增殖指数为23.92±1.60,显著低于其他各组,细胞凋亡率为32.78%±0.83%,明显高于其他各组(P<0.01)。DCIL-27+Ag+Tnaive组Fas和caspase-3蛋白表达水平均明显高于其他各组(P<0.01)。结论食管癌细胞抗原致敏、IL-27基因修饰DC可活化特异性CTL,且在荷瘤小鼠体内对食管癌细胞具有明显的细胞毒作用,其机制可能是通过Fas/FasL途径抑制食管癌细胞的体内增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 食管肿瘤 树突细胞 白细胞介素类 逆转录病毒科

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青蒿琥酯逆转食管癌Eca109/ADM细胞对多柔比星的耐药 被引量：5

9

作者 刘亮 左静 +4 位作者 李金丫 郭建文 左连富 王静 刘江惠 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期155-159,共5页

目的:研究青蒿琥酯(artesunate,Art)逆转食管癌细胞Eca109/ADM对多柔比星(doxorubicin,ADM)的耐药作用及其机制。方法:实验分为生理盐水(normal saline,NS)对照组(NS组)、Art组(0.1μmol/L)、ADM组(0.2μg/ml)和Art+ADM联合组。Art、ADM... 目的:研究青蒿琥酯(artesunate,Art)逆转食管癌细胞Eca109/ADM对多柔比星(doxorubicin,ADM)的耐药作用及其机制。方法:实验分为生理盐水(normal saline,NS)对照组(NS组)、Art组(0.1μmol/L)、ADM组(0.2μg/ml)和Art+ADM联合组。Art、ADM、Art+ADM作用Eca109/ADM细胞48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞内ADM的含量及细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette transporter G2,ABCG2)蛋白的表达量,Western blotting检测细胞中ABCG2蛋白表达水平。结果:Art+ADM作用Eca109/ADM细胞48 h后,细胞的凋亡率[(12.89±0.87)%]显著高于Art组[(1.58±0.12)%]、ADM组[(6.55±0.90)%]及NS组[(1.44±0.10)%](P<0.05),Art可提高Eca109/ADM细胞对ADM的敏感性。流式细胞术检测结果显示,Art+ADM组Eca109/ADM细胞中ABCG2蛋白表达量(644.60±3.21)显著低于ADM组(659.15±4.59)及NS组(658.14±6.88)(P<0.05),但与Art组(644.31±3.96)相比无显著差异(P>0.05)。Western blotting检测结果与流式细胞术结果一致,Art组Eca109/ADM细胞中ABCG2蛋白的表达水平为(0.70±0.02),与对照组的(0.80±0.03)相比显著降低(P<0.05),Art+ADM组的ABCG2蛋白(0.71±0.04)与单独应用ADM组的ABCG2蛋白(0.81±0.05)相比,ABCG2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。Art+ADM组Eca109/ADM细胞内ADM的含量(848.02±5.04)显著高于单独应用Art组(763.29±4.02)、ADM组(800.25±3.84)及NS组(763.88±2.03)(P<0.01)。结论:Art可以降低食管癌Eca109/ADM细胞内ABCG2蛋白表达,增加ADM的含量,逆转肿瘤细胞对ADM的耐药。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 多柔比星 耐药逆转 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)

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青蒿琥酯抗食管鳞癌作用机制的研究 被引量：4

10

作者 刘亮 王静 +2 位作者 刘江惠 郭建文 左连富 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期529-531,共3页

目的探讨细胞分裂周期素25A(CDC25A)在食管癌发生发展中的作用及青蒿琥酯(Art)抗食管癌作用和机制。方法利用RT-PCR方法检测44例临床上同个体食管癌、癌旁组织、正常黏膜中CDC25AmRNA的表达。建立食管癌荷瘤裸鼠动物模型,腹腔注射药物,... 目的探讨细胞分裂周期素25A(CDC25A)在食管癌发生发展中的作用及青蒿琥酯(Art)抗食管癌作用和机制。方法利用RT-PCR方法检测44例临床上同个体食管癌、癌旁组织、正常黏膜中CDC25AmRNA的表达。建立食管癌荷瘤裸鼠动物模型,腹腔注射药物,用药两个疗程结束后2d处死裸鼠,取出瘤组织,分两份,一份采用流式细胞术检测细胞周期和CDC25A蛋白的表达,一份用于RT-PCR检测瘤组织中CDC25AmRNA的表达水平。结果RT-PCR方法检测结果CDC25A在食管癌组织中表达较正常黏膜高。动物实验结果显示,Art组裸鼠移植瘤的体积及体质量小于对照组,Art组与对照组相比细胞周期在G0～G1期高,S期明显减少(P<0.05),而且CDC25AmRNA及蛋白值低于对照组(P<0.05)。结论Art具有抑制食管癌生长的作用,CDC25A在Art抗食管癌作用中起一定作用,使食管癌组织中CDC25A下降而使肿瘤细胞停滞在G0～G1期,从而起到抑瘤作用。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 食管鳞状细胞癌 裸鼠 细胞分裂周期素25A 流式细胞术

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表皮肿瘤survivin和PTEN蛋白的表达及其意义 被引量：4

11

作者 李美洲 刘江惠 +1 位作者 郭建文 左连富 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2009年第1期18-22,共5页

目的观察survivin和PTEN蛋白在皮肤基底细胞癌(BCC)、脂溢性角化病(SK)等表皮肿瘤中的表达情况,探讨其发病机制。方法采用免疫组化和流式细胞术检测survivin和PTEN蛋白在30例SK和15例皮肤BCC皮损中的表达情况,并以20例正常皮肤组织作为... 目的观察survivin和PTEN蛋白在皮肤基底细胞癌(BCC)、脂溢性角化病(SK)等表皮肿瘤中的表达情况,探讨其发病机制。方法采用免疫组化和流式细胞术检测survivin和PTEN蛋白在30例SK和15例皮肤BCC皮损中的表达情况,并以20例正常皮肤组织作为对照。结果(1)在30例SK皮损中,19例survivin蛋白阳性表达,正常20例皮肤组织中无1例表达,差异有统计学意义(P<0.05);30例SK皮损中,16例PTEN蛋白阳性表达,正常20例皮肤组织中14例有PTEN表达,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)在15例BCC中,13例survivin蛋白阳性表达,高于正常组织(20例中均无survivin蛋白阳性表达)(P<0.05)和SK(30例中19例有survivin蛋白阳性表达)(P<0.05);而PTEN蛋白仅在4例BCC中有表达,低于正常组织(20例中有13例PTEN蛋白阳性表达)(P<0.05)和SK(30例中有17例PTEN蛋白阳性表达)(P<0.05)。(3)survivin和PTEN蛋白在SK、BCC中的表达呈显著负相关(r=-0.546,P<0.05)。结论皮肤SK和BCC的发生、发展可能与survivin基因和PTEN基因的异常表达有关。 展开更多

关键词 肿瘤 基底细胞 基因角化病 脂溢性 基因 SURVIVIN 基因 PTEN 免疫组织化学 流式细胞术

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阿霉素诱导食管癌耐药细胞中ABCG2的表达及其意义 被引量：4

12

作者 刘亮 左静 +4 位作者 赵丽 王静 郭建文 刘江惠 左连富 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期101-104,共4页

目的研究阿霉素(ADM)药物诱导食管癌细胞(Eca109)产生耐药细胞株(Eca109/ADM)中ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达及其意义。方法通过逐步增加培养液中阿霉素的浓度,长期筛选培养,建立食管癌耐药细胞株Eca109/ADM。逆转录聚合... 目的研究阿霉素(ADM)药物诱导食管癌细胞(Eca109)产生耐药细胞株(Eca109/ADM)中ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达及其意义。方法通过逐步增加培养液中阿霉素的浓度,长期筛选培养,建立食管癌耐药细胞株Eca109/ADM。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测耐药细胞中ABCG2mRNA的表达量,流式细胞术(FCM)和蛋白印迹(Westernblot)方法检测耐药细胞中ABCG2蛋白的表达量及细胞定位。FCM方法检测Eca109/ADM细胞药物外排作用,MTT方法检测Eca109/ADM细胞对阿霉素的耐药系数。结果Eca109/ADM细胞与Eca109细胞相比,ABCG2表达显著性增高(P<0.05)。Eca109/ADM细胞药物外排作用较Eca109细胞增加,Eca109/ADM细胞对阿霉素的耐药系数为3.29。结论成功建立耐药细胞株Eca109/ADM。Eca109/ADM细胞是一个理想的耐药细胞模型。Eca109/ADM细胞中ABCG2的表达量增高,提示ABCG2参与食管癌细胞耐药的形成。 展开更多

关键词 ATP结合转运蛋白G超家族成员2 流式细胞术 阿霉素 食管癌

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去甲斑蝥素诱导人食管癌Ec9706细胞凋亡及其可能的机制 被引量：6

13

作者 刘亮 李慧 左连富 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期419-422,共4页

目的:研究去甲斑蝥素对人食管鳞癌Ec9706细胞的致凋亡作用及其可能的作用机制,为去甲斑蝥素应用于临床抗癌治疗提供实验依据。方法:不同质量浓度去甲斑蝥素(0、5、10、20、40μg/ml)分别作用Ec9706细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT方... 目的:研究去甲斑蝥素对人食管鳞癌Ec9706细胞的致凋亡作用及其可能的作用机制,为去甲斑蝥素应用于临床抗癌治疗提供实验依据。方法:不同质量浓度去甲斑蝥素(0、5、10、20、40μg/ml)分别作用Ec9706细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT方法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡及Caspase-3和Survivin蛋白表达的变化。结果:去甲斑蝥素作用后Ec9706细胞呈现不同程度的增殖抑制,而且细胞增殖抑制程度随作用剂量及时间增加不断增强,40μg/ml去甲斑蝥素作用48 h时,Ec9706细胞增殖抑制率达(80.00±2.15)%。去甲斑蝥素显著诱导Ec9706细胞凋亡,其20μg/ml作用48 h时,Ec9706细胞的凋亡率达(38.57±1.76)%。去甲斑蝥素作用后,Ec9706细胞中Caspase-3蛋白水平显著增高,而Survivin蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:去甲斑蝥素明显诱导食管癌Ec9706细胞凋亡,其作用机制可能与下调细胞Survivin蛋白及上调Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 EC9706细胞 去甲斑蝥素 细胞凋亡

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格尔德霉素对人胃癌细胞株MGC-803增殖与凋亡的影响 被引量：3

14

作者 刘辉 左静 +3 位作者 郭建文 刘江惠 张杰英 左连富 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期626-629,共4页

目的探讨格尔德霉素(geldanamycin,GA)对人胃癌细胞株MGC-803增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测GA对MGC-803细胞的增殖抑制作用;流式细胞术(FCM)测定细胞周期变化及细胞凋亡率;姬姆萨染色法观察细胞形态学改变;免疫细胞... 目的探讨格尔德霉素(geldanamycin,GA)对人胃癌细胞株MGC-803增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测GA对MGC-803细胞的增殖抑制作用;流式细胞术(FCM)测定细胞周期变化及细胞凋亡率;姬姆萨染色法观察细胞形态学改变;免疫细胞化学染色法及流式细胞术分析EphA2、survivin及Caspase-3蛋白的表达变化。结果 GA可显著抑制MGC-803细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖关系;各浓度GA可阻滞细胞于S期,诱导细胞凋亡率的升高;姬姆萨染色可见用药组细胞出现凋亡形态学改变;各浓度GA可显著抑制EphA2、survivin蛋白的表达,同时上调Caspase-3蛋白的表达。结论 GA可抑制MGC-803细胞增殖,阻滞细胞周期进程,诱导细胞凋亡,其机制可能与下调EphA2、survivin的表达,进而促进Caspase-3的表达有关。 展开更多

关键词 格尔德霉素 胃癌 细胞凋亡 EPHA2 SURVIVIN

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青蒿琥酯与阿霉素联用对人食管癌细胞生长及凋亡的影响 被引量：3

15

作者 刘亮 赵丽 +3 位作者 郭建文 刘江惠 王静 左连富 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期256-258,共3页

目的探讨青蒿琥酯(AS)与阿霉素(ADM)联合应用对人食管癌细胞Ec9706生长及凋亡的影响,并探讨其机制。方法应用流式细胞仪检测AS与ADM联合应用前后人食管癌细胞Ec9706凋亡率及细胞内ADM的含量;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测AS... 目的探讨青蒿琥酯(AS)与阿霉素(ADM)联合应用对人食管癌细胞Ec9706生长及凋亡的影响,并探讨其机制。方法应用流式细胞仪检测AS与ADM联合应用前后人食管癌细胞Ec9706凋亡率及细胞内ADM的含量;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测AS作用前后细胞三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)mRNA的表达。结果ADM单独作用24h后,Ec9706细胞的凋亡率同对照组比较显著性增高(P<0.05)。AS与不同浓度的ADM联合作用后,Ec9706细胞的凋亡率及细胞内ADM的含量同单独应用ADM组比较显著增高(P<0.01)。RT-PCR检测发现AS作用24h后Ec9706细胞ABCG2mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论ADM对人食管癌细胞Ec9706具有生长抑制和诱导凋亡的作用,AS可以使其作用明显增强,其发生机制可能是通过AS下调ABCG2mRNA表达,增加细胞内ADM的含量而实现的。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 阿霉素 流式细胞术

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DNA倍体及相关基因蛋白含量的检测在脱落细胞学诊断中的意义 被引量：4

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作者 刘江惠 王珩 +2 位作者 左连富 郭建文 刘亮 《河北医科大学学报》 CAS 2008年第2期178-180,共3页

目的研究胸腹水中脱落细胞DNA、端粒酶、p53及p21基因蛋白产物的表达,为临床良恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断提供有价值的参考依据,与脱落细胞学诊断相结合,提高恶性肿瘤诊断的阳性率。方法对胸腹水中的脱落细胞进行细胞学检查,利用流式细... 目的研究胸腹水中脱落细胞DNA、端粒酶、p53及p21基因蛋白产物的表达,为临床良恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断提供有价值的参考依据,与脱落细胞学诊断相结合,提高恶性肿瘤诊断的阳性率。方法对胸腹水中的脱落细胞进行细胞学检查,利用流式细胞术测定93例胸腹水中DNA倍体、端粒酶、p53、p21基因蛋白产物。结果经细胞学诊断为癌或可疑癌41例(44.1%),其中DNA异倍体32例,端粒酶表达阳性39例,p53表达阳性39例,p21表达阳性35例。在细胞学诊断阴性的52例中,DNA异倍体8例,端粒酶表达阳性20例,p53表达阳性17例,p21表达阳性17例。以上方法联合检测,阳性63例(阳性率为67.7%)。结论采用脱落细胞学与流式DNA倍体、端粒酶和基因蛋白定量检测相结合的办法进行诊断,阳性率高于单纯的细胞学检查。这对于临床中减少漏诊将有重要的参考价值。 展开更多

关键词 DNA 基因表达 胸水 腹水

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青蒿琥酯诱导食管癌Eca109细胞凋亡 被引量：4

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作者 刘亮 左静 +1 位作者 左连富 郭建文 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第5期548-553,共6页

目的研究青蒿琥酯诱导食管癌Eca109细胞凋亡作用。方法不同浓度的青蒿琥酯(0、10、20、40 mg/L)作用Eca109细胞24 h,流式细胞术方法检测细胞凋亡、周期及细胞中BCL-2和BAX蛋白的表达水平。Western blot检测细胞中BCL-2及BAX蛋白表达水... 目的研究青蒿琥酯诱导食管癌Eca109细胞凋亡作用。方法不同浓度的青蒿琥酯(0、10、20、40 mg/L)作用Eca109细胞24 h,流式细胞术方法检测细胞凋亡、周期及细胞中BCL-2和BAX蛋白的表达水平。Western blot检测细胞中BCL-2及BAX蛋白表达水平。结果 102、04、0 mg/L青蒿琥酯作用Eca109细胞24 h后细胞凋亡率分别为5.26%±0.20%、18.39%±1.58%、26.78%±1.09%,与对照组(1.52%±0.09%)相比显著增高(P<0.05),且具有剂量依赖性。流式细胞术检测显示,10、20、40 mg/L青蒿琥酯组Eca109细胞中BCL-2蛋白表达水平分别为369.99±16.22、322.34±14.111、79.01±10.35,与对照组(420.28±6.04)相比显著降低(P<0.05),细胞增殖指数也显著降低(P<0.05)。10、20、40 mg/L青蒿琥酯组Eca109细胞中BAX蛋白表达水平分别为292.65±9.47、422.23±7.46、479.22±8.33,与对照组(248.95±5.47)相比显著增高(P<0.05)。Western blot检测细胞中BCL-2及BAX蛋白表达水平同流式细胞术检测结果一致。结论青蒿琥酯通过调节Eca109细胞中BCL-2和BAX蛋白表达水平和细胞增殖,而诱导Eca109细胞凋亡。 展开更多

关键词 流式细胞术 食管癌 青蒿琥酯 细胞凋亡

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IL-27基因修饰树突状细胞活化的特异性CTL对人食管癌裸鼠移植瘤生长增殖的影响 被引量：2

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作者 王雷 单保恩 +2 位作者 刘亮 孟宪利 王士杰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期1419-1423,共5页

目的:研究IL-27基因转染树突状细胞(DC)体内诱导免疫杀伤食管癌细胞的效能及其机制。方法:基因转染的方法建立表达IL-27基因的树突状细胞(DC/IL-27);构建人食管癌细胞裸鼠移植瘤模型,皮下注射食管癌细胞抗原致敏、IL-27基因修饰DC(DC/IL... 目的:研究IL-27基因转染树突状细胞(DC)体内诱导免疫杀伤食管癌细胞的效能及其机制。方法:基因转染的方法建立表达IL-27基因的树突状细胞(DC/IL-27);构建人食管癌细胞裸鼠移植瘤模型,皮下注射食管癌细胞抗原致敏、IL-27基因修饰DC(DC/IL-27-Ag)活化的特异性CTL后观察荷瘤裸鼠抑瘤率;TUNEL法检测荷瘤裸鼠肿瘤细胞的原位凋亡;流式细胞术检测移植瘤细胞的细胞周期、凋亡率。结果:RT-PCR显示DC/IL-27细胞中有IL-27 p28和EBI3亚基基因表达提示转染成功;免疫接种DC/IL-27-Ag活化的CTL组的抑瘤率为58.28%,明显高于其他组,差异有统计学意义(P<0.01)。TUNEL法检测显示,DC/IL-27-Ag活化的CTL组凋亡率明显高于其他组(P<0.01),流式细胞术(FCM)显示肿瘤组织内细胞增殖指数为(23.92+1.60)%,显著低于其他组,差异有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡率为(32.78±0.83)%,显著高于其他组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:DC/IL-27-Ag可活化特异性CTL在裸鼠体内产生了抑制肿瘤生长的作用,显著抑制食管癌细胞增殖、促进其凋亡,为DC应用于食管癌的免疫治疗提供了理论和动物实验依据。 展开更多

关键词 食管肿瘤 树突状细胞 白细胞介素-27 逆转录病毒 免疫治疗

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胃癌组织中EphA2基因的表达及其与细胞凋亡、增殖的关系 被引量：2

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作者 刘辉 郭建文 +2 位作者 刘江惠 张杰英 左连富 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期293-296,共4页

目的探讨EphA2基因在胃癌组织中表达的生物学意义及与细胞凋亡、增殖的关系。方法利用免疫组织化学法(immunohisoch-emistory,IHC)检测82例胃癌手术切除标本的癌组织、癌旁组织及正常胃黏膜中EphA2的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR... 目的探讨EphA2基因在胃癌组织中表达的生物学意义及与细胞凋亡、增殖的关系。方法利用免疫组织化学法(immunohisoch-emistory,IHC)检测82例胃癌手术切除标本的癌组织、癌旁组织及正常胃黏膜中EphA2的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹技术对其中随机选取的30例标本进行EphA2mRNA及其蛋白的定量检测,分析其表达与临床病理参数的关系。采用流式细胞术(FCM)检测82例癌组织中细胞凋亡率及增殖指数(PI),分析EphA2表达与细胞凋亡、增殖的关系。结果IHC结果显示EphA2在癌组织中的表达显著高于癌旁组织及正常胃黏膜(P<0.01),且随胃癌分化程度降低、浸润深度增加及淋巴结转移而升高(P<0.05),但与肿瘤大小、患者年龄无关(P>0.05);RT-PCR结果显示EphA2mRNA在各组中的表达水平无显著性差异(P>0.05);Western印迹与IHC结果一致,显示EphA2蛋白在癌组织中异常高表达(P<0.01)。FCM结果显示EphA2高表达组细胞凋亡率显著低于低表达组(P=0.018),而其PI显著高于低表达组(P=0.002)。结论EphA2在胃癌组织中表达明显上调,可抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,在胃癌的发生发展中发挥重要作用,其机制与EphA2mRNA的转录异常无关,而可能是其翻译水平上调或蛋白质稳定性增高所致。 展开更多

关键词 胃癌 EPHA2 细胞凋亡 细胞增殖

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肺耐药相关蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其与多药耐药的相关性 被引量：2

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作者 刘亮 左静 +4 位作者 武中林 王光大 倪晓辰 赵丽 左连富 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第17期4141-4142,共2页

目的检测肺耐药相关蛋白(LRP)在食管鳞状细胞癌中的表达及其与食管癌多药耐药的相关性。方法通过免疫组化S-P法检测LRP在食管鳞状细胞癌及正常食管黏膜组织中的表达,并检测LRP与食管鳞状细胞癌不同临床病理特征的相关性。结果 LRP在食... 目的检测肺耐药相关蛋白(LRP)在食管鳞状细胞癌中的表达及其与食管癌多药耐药的相关性。方法通过免疫组化S-P法检测LRP在食管鳞状细胞癌及正常食管黏膜组织中的表达,并检测LRP与食管鳞状细胞癌不同临床病理特征的相关性。结果 LRP在食管鳞状细胞癌中表达水平显著高于正常食管组织(P<0.01),食管鳞状细胞癌组织中LRP阳性表达水平与各临床病理特征无相关性(P>0.05)。结论 LRP在食管鳞状细胞癌组织中的高表达可能参与了食管鳞状细胞癌多药耐药的形成。 展开更多

关键词 食管鳞癌 免疫组化 多药耐药 肺耐药相关蛋白

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