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对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤过程中IL-6跨信号途径对PCNA表达的影响 被引量:4
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作者 韩红梅 李三强 +3 位作者 卢华杰 张勇勇 王秀秀 马曌 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2016年第9期1005-1008,共4页
目的研究IL-6跨信号途径在对乙酰氨基酚(acetaminophen,AAP)诱导的小鼠急性肝损伤过程中对增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法健康BALB/c雄性小鼠24只,随机分为4组(A组、B组、C组、D组),A组小鼠... 目的研究IL-6跨信号途径在对乙酰氨基酚(acetaminophen,AAP)诱导的小鼠急性肝损伤过程中对增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法健康BALB/c雄性小鼠24只,随机分为4组(A组、B组、C组、D组),A组小鼠腹腔注射0.1 ml的PBS,B、C、D组小鼠均按500 mg/kg腹腔注射AAP溶液0.1 ml,C组小鼠提前1 h腹腔注射0.1 ml浓度为10μg/ml的IL-6跨信号途径的抑制剂sgp130Fc,D组小鼠提前1 h腹腔注射0.1 ml浓度为0.5μg/ml的IL-6跨信号途径的激动剂Hyper-IL-6。48 h后处死小鼠取肝脏,HE染色观察各组小鼠肝脏损伤情况,免疫组化法检测各组小鼠肝脏中PCNA的表达情况。结果与B组比较,C组小鼠肝脏损伤加重,D组小鼠肝脏损伤减轻。B、C、D组PCNA表达量明显高于A组(P<0.01),C组PCNA表达量低于B组(P<0.01),D组PCNA表达量明显高于B组(P<0.01)。结论 IL-6跨信号途径在AAP诱导的小鼠急性肝损伤过程中促进PCNA的表达,它可能有减轻肝脏损伤、保护肝脏的作用。 展开更多
关键词 对乙酰氨基酚 IL-6跨信号途径 急性肝损伤 增殖细胞核抗原
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不同性别小鼠急性化学性肝损伤中小RNA的比较分析 被引量:1
2
作者 王善龙 李三强 +3 位作者 张勇勇 宋影 宋晓改 朱文枫 《河南科技大学学报(医学版)》 2018年第3期161-164,共4页
目的探讨不同性别小鼠急性化学性肝损伤中小RNA的表达差异。方法动物模型采用健康昆明鼠,按照雌雄区分,模型组腹腔注射100μL 0. 1%的CCl_4溶液,对照组不做处理,在造模后24 h取小鼠肝脏。进行mRNA基因芯片检测各组肝脏组织标本,获得各组... 目的探讨不同性别小鼠急性化学性肝损伤中小RNA的表达差异。方法动物模型采用健康昆明鼠,按照雌雄区分,模型组腹腔注射100μL 0. 1%的CCl_4溶液,对照组不做处理,在造模后24 h取小鼠肝脏。进行mRNA基因芯片检测各组肝脏组织标本,获得各组小RNA表达谱。进一步采用生物信息学技术针对差异表达的基因予以分析。结果与正常对照肝组织相比,CCl_4模型组小鼠肝组织小RNA表达谱明显异常改变;从模型组的雌性和雄性共得168个差异表达的小RNA,雌性82个,雄性131个,其中有45个在雌雄均有差异,有37个在雌性特异,有86个在雄性特异。结论与正常肝组织相比,模型组小鼠肝组织小RNA表达谱明显异常改变,同时不同性别小鼠肝组织小RNA表达谱存在显著差异,这些小RNA可能在急性肝损伤的发生和发展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 化学性肝损伤 性别 小鼠RNA
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胶原纤维在小鼠酒精性肝损伤过程中的表达变化 被引量:1
3
作者 姜雅坤 李三强 +5 位作者 卢华杰 尚付梅 李倩倩 侯松林 白晓洁 潘勇阳 《世界华人消化杂志》 CAS 2016年第5期731-736,共6页
目的:探究胶原纤维在酒精性肝损伤发展过程中各个阶段的变化规律及其与酒精性肝损伤的关系.方法:饲养清洁健康BALB/c♂小鼠40只,随机分为对照组(n=3)与模型组(n=37).将对照组3只小鼠处死,取肝;模型组小鼠每日给予0.15 m L/10 kg 56°... 目的:探究胶原纤维在酒精性肝损伤发展过程中各个阶段的变化规律及其与酒精性肝损伤的关系.方法:饲养清洁健康BALB/c♂小鼠40只,随机分为对照组(n=3)与模型组(n=37).将对照组3只小鼠处死,取肝;模型组小鼠每日给予0.15 m L/10 kg 56°红星二锅头白酒灌胃,持续4 wk,于开始灌胃后1、2、3、4 w k各取3只小鼠进行肝脏取材.天狼星红染色法观察小鼠肝组织胶原纤维病理变化情况,蛋白印迹法检测小鼠肝脏增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,P C N A)蛋白表达及变化趋势.运用ImageProPlus6.0对病理切片样本进行积分光密度(IOD)定量分析,Gel Pro4.0软件对目标蛋白条带灰度值进行测定.运用SPSS16.0对数据进行处理,用ANOVE法和非参数秩和检验法进行显著性分析.结果:第1、2周组小鼠肝组织胶原纤维含量持续显著增高(852.21±10.65 vs 345.24±65.94,1054.15±10.80 vs 852.21±10.65,P<0.01),第2周达到最高,随后第3、4周小鼠肝组织胶原纤维含量依次降低(588.75±17.18 vs 1054.15±10.80,559.40±14.17,P<0.01);小鼠肝组织中PCNA蛋白含量前2 wk明显下降,第2周时达到最小值,第3周较第2周增加显著,差异有统计学意义(P<0.05).第4周与第3周变化无明显差异.结论:在酒精诱导小鼠肝脏损伤的过程中,肝脏胶原纤维的变化规律是先增加后减少,变化明显;PCNA的表达出现显著动态变化,二者均可能与肝脏的损伤修复机制密切相关. 展开更多
关键词 酒精性肝损伤 胶原纤维 增殖细胞核抗原 小鼠
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小鼠酒精性肝损伤过程中热休克蛋白70的表达及意义 被引量:1
4
作者 王莲丽 李三强 +5 位作者 卢华杰 马秀青 侯松林 潘勇阳 叶倩雅 孙晓昕 《世界华人消化杂志》 CAS 2016年第18期2869-2874,共6页
目的:探讨热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)在小鼠酒精肝损伤过程中的变化规律及意义.方法:将50只♂小鼠随机分为两组,对照组(n=10)和模型组(n=40).对照组小鼠正常饲养处死取肝脏;模型组小鼠连续4 wk白酒灌胃(0.05 m L/10 g),... 目的:探讨热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)在小鼠酒精肝损伤过程中的变化规律及意义.方法:将50只♂小鼠随机分为两组,对照组(n=10)和模型组(n=40).对照组小鼠正常饲养处死取肝脏;模型组小鼠连续4 wk白酒灌胃(0.05 m L/10 g),每天1次,并分别在第1、2、3、4周各用小鼠5只取肝脏.将所得肝脏分别处理做组织切片染色观察小鼠肝脏组织病理变化以及用Western blot法检测小鼠酒精肝损伤过程中HSP70含量的动态变化.结果:在小鼠酒精性肝损伤过程中,模型组小鼠第1周HSP70的表达量明显高于对照组(P<0.05),并在第2周达到最高峰(P<0.01),随后HSP70表达量开始下降;在第3周时,H S P70的表达量仍比对照组高(P<0.05);但在第4周时小鼠HSP70的表达量却明显低于对照组(P<0.05).HE染色显示,与对照组相比,模型组中小鼠肝组织中炎细胞浸润增加,肝细胞的脂肪变、气球样变也明显增多,甚至在第4周时肝组织中出现了点状坏死.结论:小鼠酒精肝损伤过程中HSP70的表达量有明显的动态变化规律,与小鼠肝脏损伤程度变化一致,表明HSP70表达与小鼠酒精性肝损伤过程中的保护作用密切相关. 展开更多
关键词 酒精性肝损伤 热休克蛋白70 蛋白印迹 HE染色
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阿奇霉素诱导的急性肝损伤小鼠肝组织HSP27表达的动态变化
5
作者 石岩 李三强 +2 位作者 徐正顺 马曌 乔伟强 《实用肝脏病杂志》 CAS 2013年第3期251-253,共3页
目的研究热休克蛋白27(HSP27)在阿奇霉素诱导的小鼠急性肝损伤肝组织中的动态变化。方法以800mg.kg-1阿奇霉素腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型,设3h、6h、12h、24h、30h、36h、42h、48h和54h 9个观察时间点,每个时间点取10只小鼠,检测血... 目的研究热休克蛋白27(HSP27)在阿奇霉素诱导的小鼠急性肝损伤肝组织中的动态变化。方法以800mg.kg-1阿奇霉素腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型,设3h、6h、12h、24h、30h、36h、42h、48h和54h 9个观察时间点,每个时间点取10只小鼠,检测血清ALT和AST活性,采用免疫印迹法检测小鼠肝组织HSP27的表达变化。结果在注射阿奇霉素后,小鼠血清AST和ALT活性随着时间的延长逐渐升高,于24h达到高峰,自54h逐渐恢复到对照组水平;在注射阿奇霉素后3h肝脏HSP27表达开始升高,6h达到高峰,自12h开始下降,并于30h恢复至对照组水平。结论在阿奇霉素诱导的小鼠急性肝损伤过程中肝组织表达HSP27出现显著的动态变化,说明它可能参与了急性肝损伤的病理生理过程。 展开更多
关键词 急性肝损伤 热休克蛋白27 阿奇霉素 小鼠
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CCl_4诱导的急性肝损伤小鼠肝组织HSP27表达的变化
6
作者 乔伟强 李三强 +4 位作者 孙永健 贾志强 贾岩岩 丁腾腾 周洁 《实用肝脏病杂志》 CAS 2013年第2期150-151,共2页
目的研究热休克蛋白(HSP)27在CCl4诱导的急性肝损伤小鼠肝组织中的动态变化。方法将100只健康雄性小鼠随机分为模型组90只和对照组10只。应用CCl4腹腔注射诱导小鼠急性肝损伤,在3h、6h、12h、24h、30h、36h、42h、48h和54h及正常对照小... 目的研究热休克蛋白(HSP)27在CCl4诱导的急性肝损伤小鼠肝组织中的动态变化。方法将100只健康雄性小鼠随机分为模型组90只和对照组10只。应用CCl4腹腔注射诱导小鼠急性肝损伤,在3h、6h、12h、24h、30h、36h、42h、48h和54h及正常对照小鼠分别眼球取血或取肝脏制备10%肝匀浆,采用Western blotting法检测肝组织HSP27表达的变化。结果小鼠注射CCl4后,血清AST和ALT活性逐渐升高,24h达到高峰,54h逐渐恢复到正常水平;肝组织HSP27在注射CCl4后3h表达量略有增高,在24h表达量达到高峰,此后逐渐恢复到正常水平。结论在CCl4诱导的急性肝损伤小鼠肝组织HSP27表达出现显著变化,可能在肝损伤的修复和再生过程中起到重要的作用。 展开更多
关键词 急性肝损伤 CCL4 热休克蛋白-27
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增殖细胞核抗原在小鼠酒精性肝损伤中的表达及意义
7
作者 马秀青 李三强 +5 位作者 卢华杰 王莲丽 乔新杰 霍续磊 白淼水 姚致远 《世界华人消化杂志》 CAS 2016年第14期2219-2224,共6页
目的:研究酒精诱导的小鼠肝损伤过程中肝脏增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达变化.方法:将100只健康清洁♂小鼠随机分为对照组(n=40)和模型组(n=60),模型组小鼠每日给予56%的红星二锅头(10 m L/kg)灌胃,... 目的:研究酒精诱导的小鼠肝损伤过程中肝脏增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达变化.方法:将100只健康清洁♂小鼠随机分为对照组(n=40)和模型组(n=60),模型组小鼠每日给予56%的红星二锅头(10 m L/kg)灌胃,对照组每日给予等体积的蒸馏水灌胃.分别于第1、2、3、4周将两组小鼠全部处死,并在各时间点取小鼠肝脏做苏木精-伊红(HE)染色并测定血清中ALT酶活力,以检测小鼠酒精性肝损伤程度.剩余肝脏通过蛋白印迹法用以检测小鼠肝脏增殖细胞核抗原的表达情况.应用SSPS16.0对实验数据进行ANOVA显著性分析和Duncan's test.结果:酒精灌胃第1周,病理HE染色显示肝细胞轻度损伤,ALT酶活力显著上升,小鼠肝脏中的PCNA的表达量相比正常小鼠显著下降(P<0.05);第2周,病理HE染色显示肝细胞出现明显的水肿和大量的炎细胞浸润,ALT酶活力高于正常,PCNA的表达量达到了最低值(P<0.01);第3周,病理HE染色显示中央静脉周围的肝细胞脂肪变性,门管区周围肝细胞水样变,ALT酶活力下降,PCNA的表达量显著上升,但仍低于正常小鼠肝脏PCNA的表达量(P<0.05). 展开更多
关键词 增殖细胞核抗原 酒精性肝病 蛋白印迹 HE染色
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长链非编码RNA CASC2通过miR-21/PTEN信号轴抑制肝细胞癌 被引量:4
8
作者 何行昌 朱素华 李三强 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期2467-2471,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)癌易感性候选基因(CASC)2作为一种竞争性内源性RNA结合miR-21抑制肝细胞癌的作用及其机制。方法利用实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测肝癌细胞系中CASC2和miR-21的表达并进行相关性分析;双荧光素酶报告... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)癌易感性候选基因(CASC)2作为一种竞争性内源性RNA结合miR-21抑制肝细胞癌的作用及其机制。方法利用实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测肝癌细胞系中CASC2和miR-21的表达并进行相关性分析;双荧光素酶报告基因实验、RNA免疫共沉淀检测miR-21与CASC2的靶向调控作用;噻唑蓝(MTT)实验检测肝癌细胞MHCC-97H增殖能力变化;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western印迹检测第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)的表达情况。结果 QPCR检测发现肝癌细胞系中CASC2普遍低表达,miR-21普遍高表达,且CASC2与miR-21的表达呈显著负相关;双荧光素酶报告基因实验显示miR-21是CASC2的一个靶标;RNA免疫共沉淀实验证实CASC2和miR-21可以相互结合;噻唑蓝(MTT)实验、流式细胞仪细胞凋亡检测结果表明miR-21可恢复CASC2对肝癌细胞的抑制作用;Western印迹实验提示CASC2可能通过CASC2/miR-21/PTEN信号发挥抑癌作用。结论长链非编码RNA CASC2作为一种竞争性内源性RNA可能通过miR-21/PTEN信号发挥抑制肝癌作用,将为肝癌诊断和治疗提供新的线索和理论依据。 展开更多
关键词 CASC2 MIR-21 HCC PTEN
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二乙基亚硝胺诱导肝癌小鼠肝组织胶原纤维的变化 被引量:2
9
作者 胡景峰 李三强 +7 位作者 吴秦川 付指挥 马曌 韩红梅 杨博 丁康熙 杨省柯 卢华杰 《实用肝脏病杂志》 CAS 2015年第5期521-524,共4页
目的观察胶原纤维在肝癌发生发展过程中的变化及其与癌变的关系。方法饲养清洁健康BALB/c小鼠40只,以30 mg/ml二乙基亚硝胺(DEN)溶液作为饮用水,建立肝癌模型。在开始喂养后的0 w、4 w、8 w、12w、16 w、20 w和24 w,各处死3只动物,对所... 目的观察胶原纤维在肝癌发生发展过程中的变化及其与癌变的关系。方法饲养清洁健康BALB/c小鼠40只,以30 mg/ml二乙基亚硝胺(DEN)溶液作为饮用水,建立肝癌模型。在开始喂养后的0 w、4 w、8 w、12w、16 w、20 w和24 w,各处死3只动物,对所取肝脏组织行石蜡包埋切片,采用天狼新红染色,对胶原纤维进行检查。通过Image-Pro Plus 6.0对采集的样本进行光密度积分(IOD)定量,应用SPSS 16.0软件对测得的数据进行ANOVA显著性分析和Student-Newman-Keuls检验。结果小鼠在诱癌剂作用20 w后肝组织发生癌变;在4 w末,小鼠肝组织胶原纤维IOD为(97.610±18.640),明显低于8 w末胶原纤维IOD水平[(377.054±63.668),P<0.05];在8 w末,胶原纤维IOD为(377.054±63.668),明显低于12 w末胶原纤维IOD[(625.875±110.846),P<0.05];在16 w末,胶原纤维IOD为(847.289±53.473),显著低于20 w末胶原纤维IOD[(1671.301±292.593),P<0.01];在20 w末,胶原纤维IOD为(1671.301±292.593),显著低于24 w末胶原纤维IOD[(3968.450±138.949),P<0.01]。结论胶原纤维在癌变的整个过程中沉积量逐渐增加,变化明显,可能与肝组织的损伤修复和癌变的扩散密切相关。 展开更多
关键词 肝癌 二乙基亚硝胺 胶原纤维 小鼠
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精氨酸脱亚胺酶阻断PI3K-AKT通路抑制胰腺癌细胞侵袭 被引量:2
10
作者 刘江波 雷亮亮 +4 位作者 杨延辉 黎韡 马清涌 刘德纯 李三强 《世界华人消化杂志》 CAS 2016年第24期3570-3579,共10页
目的研究精氨酸脱亚胺酶(arginine deiminase,ADI)对胰腺癌细胞株迁移、侵袭能力的影响及可能的分子机制.方法选取精氨琥珀酸合成酶表达缺陷和表达阳性的胰腺癌细胞株PANC-1和BxPC-3接受含ADI培养基或普通培养基培养干预.细胞划痕及Tran... 目的研究精氨酸脱亚胺酶(arginine deiminase,ADI)对胰腺癌细胞株迁移、侵袭能力的影响及可能的分子机制.方法选取精氨琥珀酸合成酶表达缺陷和表达阳性的胰腺癌细胞株PANC-1和BxPC-3接受含ADI培养基或普通培养基培养干预.细胞划痕及Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力;实时定量PCR技术及Western blot检测侵袭相关基因mRNA和蛋白的改变.Western blot和Transwell试验检测ADI联合PI3K信号抑制剂LY29400对PANC-1细胞侵袭行为及分子的影响.结果ADI可抑制PANC-1细胞的迁移、侵袭(P<0.05),下调PANC-1细胞尿激酶型纤溶酶原激活因子、基质蛋白金属酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2、MMP-9,和上调金属蛋白酶类组织抑制剂-2和E-Cadherin的m RNA和/或蛋白表达水平(P<0.05);而对BxPC-3细胞侵袭能力影响不明显.ADI可下调PANC-1细胞PI3K/AKT/核转录因子-kB(nuclear factor-kappa B,NF-kB)信号通路蛋白p-AKT、p-p65的表达水平,而LY294002则协同ADI的这种作用,并协同下调MMP-2水平;Transwell侵袭试验也显示LY294002可协同A D I抑制胰腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05).结论ADI通过阻断PI3K-AKT信号通路调控侵袭相关基因表达抑制胰腺癌细胞侵袭. 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 精氨琥珀酸合成酶 精氨酸剥夺 侵袭转移 PI3K信号
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四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠肝组织VEGF表达变化 被引量:9
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作者 付指辉 李三强 +5 位作者 丁康熙 王秀秀 杨省柯 杨博 胡景峰 吴秦川 《实用肝脏病杂志》 CAS 2016年第1期81-82,共2页
目的研究经CCl4诱导的肝纤维化小鼠肝组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化及意义。方法将50只小鼠随机分为5组,每组10只,分别为对照组(0 w)和实验组(2、4、6、8 w)。采用腹腔注射CCl4法建立肝纤维化模型,连续8 w。采用Western blottin... 目的研究经CCl4诱导的肝纤维化小鼠肝组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化及意义。方法将50只小鼠随机分为5组,每组10只,分别为对照组(0 w)和实验组(2、4、6、8 w)。采用腹腔注射CCl4法建立肝纤维化模型,连续8 w。采用Western blotting法检测肝组织VEGF表达的变化。结果给予小鼠药物后,随损伤时间的延长,小鼠肝脏损伤并发生纤维化,并且肝纤维化程度呈逐渐加重的趋势。在建模的前2 w,试验组动物肝组织VEGF表达水平迅速升高,在第4 w达到高峰,与第1 w和第2 w比,差异有统计学意义(P<0.05);自诱导的第4 w开始,肝组织VEGF表达降低,在第8 w降至正常水平以下。结论血管内皮生长因子可能参与了四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的形成。 展开更多
关键词 肝纤维化 四氯化碳 血管内皮生长因子
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酒精性肝病的研究进展 被引量:9
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作者 曾赏 李三强 李前辉 《世界华人消化杂志》 CAS 2022年第12期535-540,共6页
酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是指因过度饮酒而对肝脏及其功能造成的损伤,它包括酒精性脂肪肝/脂肪变性、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化或肝硬化,甚至是肝细胞癌.然而,由于酒精及其代谢产物的毒性作用、免疫反应、氧化应激、... 酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是指因过度饮酒而对肝脏及其功能造成的损伤,它包括酒精性脂肪肝/脂肪变性、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化或肝硬化,甚至是肝细胞癌.然而,由于酒精及其代谢产物的毒性作用、免疫反应、氧化应激、细胞自噬、肠道微生物、遗传因素和非编码RNA等的参与,酒精性肝病的发病机制尤为复杂.因此,本文就近年来对ALD发病机制新进展进行综述,以进一步了解ALD的分子机制,并对其临床治疗提出展望. 展开更多
关键词 酒精性肝病 发病机制 治疗学
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利用CRISPR/Cas-9技术抑制热休克蛋白Gp96的表达对小鼠酒精性肝纤维化的影响 被引量:2
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作者 朱文枫 李三强 +3 位作者 宋晓改 郭威 杨欢 张兵兵 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期777-783,共7页
目的探讨热休克蛋白Gp96对小鼠酒精性肝纤维化的影响。方法健康雄性C57BL/6 J小鼠220只,随机分为4组:正常对照组(n=10),生理盐水+酒精诱导纤维化组(n=70)。尾静脉注射CRISPR表达质粒Gp96-sgRNA3+酒精诱导肝纤维化组(n=70),腹腔注射核因... 目的探讨热休克蛋白Gp96对小鼠酒精性肝纤维化的影响。方法健康雄性C57BL/6 J小鼠220只,随机分为4组:正常对照组(n=10),生理盐水+酒精诱导纤维化组(n=70)。尾静脉注射CRISPR表达质粒Gp96-sgRNA3+酒精诱导肝纤维化组(n=70),腹腔注射核因子κB(NF-κB)抑制剂PDTC+酒精诱导肝纤维化组(n=70)。于酒精诱导第8周眼球取血后处死各组小鼠,测定各组小鼠血清谷草转氨酶(AST)活性,HE染色检测各组小鼠肝脏病理变化,天狼猩红染色检测各组小鼠肝纤维化情况,过碘酸-雪夫(PAS)染色检测各组小鼠肝糖原变化情况;免疫印迹法检测小鼠肝脏Gp96和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达变化。结果与正常对照组相比,其余3组AST酶活性显著上升,肝纤维化加重,糖原显著减少(P<0.01);与生理盐水+酒精组相比,注射质粒Gp96-sg RNA3+酒精组和注射NF-κB抑制剂+酒精组AST上升更为明显,肝纤维化更严重,糖原减少更多,Gp96表达显著下降,TGF-β1表达显著增加(P<0.01或P<0.05)。结论尾静脉注射CRISPR表达质粒Gp96-sgRNA3显著抑制了小鼠肝脏Gp96的表达,促进了小鼠酒精性肝纤维化程度,NF-κB信号通路对Gp96的表达起到一定的调控作用。 展开更多
关键词 热休克蛋白GP96 酒精性肝纤维化 规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9 免疫印迹法 小鼠
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CYP2E1在小鼠酒精性肝纤维化中的作用研究 被引量:4
14
作者 代新华 李三强 +8 位作者 宋晓改 李子昂 王玉东 郭威 张艺博 袁旭静 徐卓硕 王同园 刘竞怡 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第5期520-523,共4页
目的探讨CYP2E1在酒精性肝纤维化(ALF)过程中的作用。方法取健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组:正常组(n=10)和实验组(n=40),正常组用Lieber-DeCarli液体饲料饲养小鼠8周,实验组用Lieber-DeCarli液体酒精饲料饲养,4周后联合5%CCl 4-橄榄... 目的探讨CYP2E1在酒精性肝纤维化(ALF)过程中的作用。方法取健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组:正常组(n=10)和实验组(n=40),正常组用Lieber-DeCarli液体饲料饲养小鼠8周,实验组用Lieber-DeCarli液体酒精饲料饲养,4周后联合5%CCl 4-橄榄油2 ml/kg进行腹腔注射,2次/周,进行ALF造模,共8周。分别于0、2、4、6、8周每组各取4只小鼠进行眼球采血以检测血清中ALT活性;颈椎脱臼处死小鼠取肝,HE染色观察肝组织病理学形态改变和坏死得分;蛋白免疫印迹法检测CYP2E1的表达水平。结果与正常组相比,实验组肝功能指标和肝纤维化水平逐渐升高,在造模第4周时出现最严重肝损伤(P<0.01)。随着造模时间的延长,肝脏出现不同程度的损伤修复现象,且CYP2E1表达量逐渐降低。结论CYP2E1的表达在ALF形成过程中起一定的作用。 展开更多
关键词 酒精性肝纤维化 CYP2E1 Lieber-DeCarli液体酒精饲料 表达分析
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利用CRISPR/Cas9技术抑制Gp96的表达对小鼠酒精性肝纤维化过程中α-SMA和TGF-β1表达的影响 被引量:3
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作者 朱文枫 李三强 +7 位作者 宋晓改 郭威 杨欢 张兵兵 王玉东 代新华 袁旭静 朱永基 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2020年第11期1279-1282,1286,共5页
目的研究小鼠酒精性肝纤维化进程中,利用CRISPR/Cas9技术抑制Gp96的表达对小鼠肝脏中α-SMA和TGF-β1表达的影响。方法健康雄性C57BL/6J小鼠220只,随机分为4组。正常对照组(n=10),生理盐水+酒精诱导纤维化组(n=70),尾静脉注射质粒Gp96-s... 目的研究小鼠酒精性肝纤维化进程中,利用CRISPR/Cas9技术抑制Gp96的表达对小鼠肝脏中α-SMA和TGF-β1表达的影响。方法健康雄性C57BL/6J小鼠220只,随机分为4组。正常对照组(n=10),生理盐水+酒精诱导纤维化组(n=70),尾静脉注射质粒Gp96-sgRNA3+酒精诱导肝纤维化组(n=70),腹腔注射NF-κB抑制剂PDTC+酒精诱导肝纤维化组(n=70)。于酒精诱导第8周眼球取血处死各组小鼠,测定血清谷丙转氨酶(ALT);天狼猩红染色检测各组胶原纤维变化;免疫印迹(Western blotting)检测α-SMA和TGF-β1表达变化。结果与正常对照组相比,其余三组ALT显著上升(P<0.01),胶原纤维显著增加(P<0.01),α-SMA和TGF-β1表达显著升高(P<0.01),肝纤维化加重;与生理盐水+酒精诱导肝纤维化组相比,尾静脉注射质粒Gp96-sgRNA3+酒精诱导肝纤维化组和腹腔注射NF-κB抑制剂PDTC+酒精诱导肝维化组的ALT上升更为明显(P<0.01),胶原纤维增加更显著(P<0.01),α-SMA和TGF-β1表达提升更显著(P<0.01),提示肝纤维化加剧更显著。结论小鼠酒精性肝纤维化进程中,Gp96可能通过下调α-SMA和TGF-β1的表达来减轻肝纤维化程度,而NF-κB信号通路通过上调Gp96的表达进而抑制α-SMA和TGF-β1的表达,起到减轻肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 热休克蛋白GP96 酒精性肝纤维化 Α-SMA TGF-Β1 NF-κB信号通路
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小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素对活化后肝星状细胞增殖能力的影响 被引量:3
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作者 张兵兵 李三强 +6 位作者 王子仪 苏梦尧 洪晓敏 罗仁利 杨孟利 郑润月 王磊娜 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2023年第1期65-70,共6页
目的探讨小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素对活化后肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖能力的影响。方法将大鼠HSC-T6细胞用含酒精的培养基诱导48 h使其活化;然后配置小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadime... 目的探讨小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素对活化后肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖能力的影响。方法将大鼠HSC-T6细胞用含酒精的培养基诱导48 h使其活化;然后配置小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素不同浓度梯度含10%血清的DMEM培养基,分别培养活化后的HSC-T6,观察HSC-T6细胞的形态,以MTT法观察细胞增殖能力的变化。结果MTT结果显示,与对照组相比,小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素均可抑制活化后HSC的增殖(P<0.05),且抑制率呈浓度依赖关系。其中,(+)-Ainsliadimer A抑制细胞增殖的能力最强。结论小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素可能通过抑制活化的HSC增殖有效逆转酒精诱导的肝纤维化。 展开更多
关键词 小白菊内酯 含笑内酯 (+)-Ainsliadimer A 大黄素 肝星状细胞
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miR-21对肝星状细胞的增殖和成纤维化的影响 被引量:2
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作者 杨欢 李三强 +3 位作者 程维刚 郭威 张兵兵 洪晓敏 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2022年第1期75-78,共4页
目的研究miR-21对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的增殖和成纤维化的影响。方法将大鼠HSC-T6传代分为四组,分别为正常组、酒精组、miR-21模拟物组、miR-21抑制剂组。其中正常组不做处理;miR-21模拟物组和miR-21抑制剂组分别将m... 目的研究miR-21对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的增殖和成纤维化的影响。方法将大鼠HSC-T6传代分为四组,分别为正常组、酒精组、miR-21模拟物组、miR-21抑制剂组。其中正常组不做处理;miR-21模拟物组和miR-21抑制剂组分别将miR-21模拟物和miR-21抑制剂瞬时转染入细胞;然后,再用含有酒精的培养基诱导酒精组、miR-21模拟物组、miR-21抑制剂组的HSC的活化;48 h后,分别做两部分实验,一部分是细胞增殖测试实验(cell counting kit-8,CCK8);另一部分是提取各组细胞蛋白,Western blotting检测因子增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、Smad3、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscles actin,α-SMA)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达变化。结果CCK8结果显示,miR-21模拟物能够促进HSC的增殖与活化,从而促进纤维化的进展;而miR-21抑制剂能够抑制HSC的活化,降低HSC的活力值,缓解纤维化的进展。Western blotting检测结果显示,PCNA、TGF-β1、Smad3、α-SMA、CTGF在酒精组的表达量明显比正常组高(P<0.05),而在miR-21模拟物组则比酒精组高(P<0.05),miR-21抑制剂组比酒精组明显降低(P<0.05)。结论miR-21能够促进HSC的增殖,促进HSC成纤维化的进展。 展开更多
关键词 MIR-21 肝星状细胞 增殖 成纤维化
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解整合素-金属蛋白酶9在小鼠酒精性肝纤维化过程中的表达 被引量:1
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作者 宋晓改 李三强 +8 位作者 文馨 郭威 李子昂 宋琢爽 魏鹏雪 王同园 杨欢 朱文枫 张兵兵 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2020年第7期810-813,817,共5页
目的研究解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)在小鼠酒精性肝纤维化过程中的表达。方法将50只健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组10只,实验组40只。正常小鼠采用Lieber-DeCarli TP4030C对照液体饲料饲养小鼠8周,实验小鼠采用Lieber-DeCarli TP... 目的研究解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)在小鼠酒精性肝纤维化过程中的表达。方法将50只健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组10只,实验组40只。正常小鼠采用Lieber-DeCarli TP4030C对照液体饲料饲养小鼠8周,实验小鼠采用Lieber-DeCarli TP4030A酒精液体饲料喂养4周后联合5%四氯化碳橄榄油溶液2 ml/kg,腹腔注射,2次/周,总共8周诱导小鼠酒精性肝纤维化模型。分别于0、2、4、6、8周各取4只小鼠摘除眼球取血并分离血清,检测谷草转氨酶(AST)活性;颈椎脱臼处死小鼠并取肝,用免疫组化法测定0、2、4、6、8周小鼠肝组织中ADAM9蛋白的表达变化。结果小鼠经Lieber-DeCarli液体饲料喂养后0、2、4、6、8周AST活性分别为(110±14)U/L、(163±52)U/L、(200±26)U/L、(229±17)U/L、(509±111)U/L,从酶活性可以看出,酒精液体饲料喂养2周后,血清AST活性开始上升,随着喂养时间的增加,血清AST活性持续升高,8周达到最高值(P<0.01)。免疫组化结果显示,酒精液体饲料喂养2周后,ADAM9的蛋白表达量上升,随着喂养周数不断增加,ADAM9的蛋白表达量持续升高,8周达到最高值(P<0.01)。结论 ADAM9在小鼠酒精性肝纤维化过程中表达不断升高且变化显著,与肝纤维化的发展进程密切相关,可能起到促进肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 解整合素-金属蛋白酶9 酒精性肝纤维化 谷草转氨酶 Lieber-DeCarli液体饲料
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解整合素-金属蛋白酶9在非酒精性脂肪肝小鼠中表达 被引量:1
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作者 张勇勇 李三强 +1 位作者 程维刚 李记天 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第16期4039-4041,共3页
目的探讨解整合素-金属蛋白酶(ADAM)9在非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠中表达变化。方法将40只雄性小鼠随机分为正常组(10只)和模型组(30只)。模型组采用高脂饲料喂养,分别于4、8、12 w末各取10只小鼠分别为高脂饲养4、8、12 w组,各组按相... 目的探讨解整合素-金属蛋白酶(ADAM)9在非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠中表达变化。方法将40只雄性小鼠随机分为正常组(10只)和模型组(30只)。模型组采用高脂饲料喂养,分别于4、8、12 w末各取10只小鼠分别为高脂饲养4、8、12 w组,各组按相应时间进行眼球取血并提取血清检测谷草转氨酶(AST)活性;颈椎脱臼处死小鼠分离肝组织,HE染色观察肝组织损伤情况,免疫组化分析肝组织中ADAM9表达,同时检测正常组相关指标变化作为对照。结果高脂饲养小鼠诱导NAFLD造模成功,且肝损伤程度呈时间依赖性(P<0.05);与正常组相比,高脂饲养4 w组肝组织中ADAM9阳性表达量显著升高(P<0.05),高脂饲养8 w组ADAW9表达量达到顶峰且显著高于高脂饲养4 w组(P<0.01),高脂饲养12 w组较高脂饲养8 w组ADAM9表达量明显降低(P<0.05)。结论ADAM9在小鼠NAFLD发生过程中变化显著,可能起到了促进肝损伤的作用。 展开更多
关键词 解整合素-金属蛋白酶9 非酒精性脂肪肝 谷草转氨酶
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热休克蛋白Gp96在肝癌、肝纤维化、乙型肝炎中作用的研究进展 被引量:1
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作者 高熙 李三强 《肿瘤基础与临床》 2019年第6期550-552,共3页
目的热休克蛋白(HSP) Gp96,又称HSP90β1,是存在于真核生物细胞内质网中的相对分子质量为96 000的HSP,是HSP90家族的重要一员,其在肝脏疾病中的作用是近年来研究的热点。Gp96参与包括肝癌在内的多种肝脏疾病的发生、发展过程,且在不同... 目的热休克蛋白(HSP) Gp96,又称HSP90β1,是存在于真核生物细胞内质网中的相对分子质量为96 000的HSP,是HSP90家族的重要一员,其在肝脏疾病中的作用是近年来研究的热点。Gp96参与包括肝癌在内的多种肝脏疾病的发生、发展过程,且在不同肝脏疾病中有着不同的作用。 展开更多
关键词 热休克蛋白GP96 肝癌 肝纤维化 乙型肝炎
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