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H9N2亚型禽流感病毒HA基因的克隆及其DNA疫苗的动物免疫试验 被引量：15
1
作者 何宏轩 秦曦明 +4 位作者 张强哲 汤义 刘丽艳 郑昌学 段明星 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期163-166,共4页
血凝素 (HA)是决定禽流感病毒的毒力强弱和免疫原性的主要蛋白质 .根据已发表的H9亚型AIV的HA基因序列 ,设计合成了 1对H9HA特异引物 ,以AIVA/Chicken/Henan/ 1 / 1 999/ (H9N2 )核酸为模板 ,通过RT PCR扩增出 1条 1 6kbcDNA片段 .将H... 血凝素 (HA)是决定禽流感病毒的毒力强弱和免疫原性的主要蛋白质 .根据已发表的H9亚型AIV的HA基因序列 ,设计合成了 1对H9HA特异引物 ,以AIVA/Chicken/Henan/ 1 / 1 999/ (H9N2 )核酸为模板 ,通过RT PCR扩增出 1条 1 6kbcDNA片段 .将HA基因插入pVAX1中 ,构建了真核表达质粒pVAX H9.采用活体电击法免疫 3周龄SPF鸡 1 0只 ,剂量为 5 0 μg/只 ,3周后加强免疫一次 ,5周后以 1 0 0倍鸡胚感染剂量 (EID)的HA基因同源病毒对所有鸡进行攻毒 .其间每周检测抗体水平变化 ,6周后以棉拭子进行泄殖腔病毒分离 .结果为攻毒后免疫组鸡HI效价为 9log2～ 1 0log2 ,对照组为 2log2～ 4log2 ;免疫组病毒分离数为 0 / 1 0 ,对照组为 1 0 / 1 0 . 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素基因 RT-PCR 克隆 DNA疫苗
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加热温度与豆腐脑品质之间的关系研究 被引量：3
2
作者 余小领 常志娟 +1 位作者 师玉忠 李学斌 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期68-70,共3页
研究了豆浆加热温度与所生成的豆腐脑品质,即感官质量、凝胶强度、豆浆中游离巯基含量之间的相关性,并用最小二乘法建立了回归方程。从分析结果看,当加热温度为75℃时,制作的豆腐脑品质最好。
关键词 豆浆 加热温度 豆腐脑 品质 凝胶强度 制作
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河南省新乡市奶牛隐孢子虫感染情况调查 被引量：5
3
作者 何宏轩 王新华 +1 位作者 赵坤 张西臣 《中国奶牛》 北大核心 2001年第2期22-23,共2页
本文应用病原学检查法对新乡市 4个奶牛场的 102头奶牛进行了隐孢子虫感染情况调查。调查结果：隐孢子虫感染率为 20. 6％；发病率为 5. 8％；不同年龄的奶牛感染情况不同；机体免疫功能较低的奶牛易感染；经鉴定虫种为鼠隐孢子虫 (Cryp... 本文应用病原学检查法对新乡市 4个奶牛场的 102头奶牛进行了隐孢子虫感染情况调查。调查结果：隐孢子虫感染率为 20. 6％；发病率为 5. 8％；不同年龄的奶牛感染情况不同；机体免疫功能较低的奶牛易感染；经鉴定虫种为鼠隐孢子虫 (Cryptosporidium muris)。 展开更多
关键词 奶牛 隐孢子虫感染 调查报告 病原学检查法 感染率 发病率
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降低反刍动物甲烷排放的研究进展 被引量：27
4
作者 贺永惠 王清华 李杰 《黄牛杂志》 2001年第5期47-50,共4页
本文阐述了反刍动物瘤胃甲烷生成的生物学机制及影响反刍动物瘤胃甲烷生成的因素 ,并且产明了降低瘤胃甲烷产生的方法 ,最后对降低甲烷生成的前景作了展望。
关键词 反刍动物 甲烷生成菌 甲烷排放 生物学机制
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钼的毒性与反刍动物钼中毒 被引量：10
5
作者 王自良 张海棠 李军民 《黄牛杂志》 2004年第5期40-43,共4页
本文综述了微量元素钼对反刍动物毒性的研究结果,如:钼的化学特性、钼在饲料与反刍动物体内的含量与分布、钼的生物学作用、钼在反刍动物体内的吸收、代谢及与其它元素间的互作等。最后阐述了反刍动物钼营养需要量、饲料中钼的最大允许... 本文综述了微量元素钼对反刍动物毒性的研究结果,如:钼的化学特性、钼在饲料与反刍动物体内的含量与分布、钼的生物学作用、钼在反刍动物体内的吸收、代谢及与其它元素间的互作等。最后阐述了反刍动物钼营养需要量、饲料中钼的最大允许量及反刍动物钼中毒的防治。 展开更多
关键词 钼 毒性 反刍动物 中毒 营养需要量
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RTP-CR和nested-PCR技术在猪瘟病毒检测中的应用 被引量：3
6
作者 胡建和 王天有 +3 位作者 刘保国 李培庆 刘湘涛 谢庆阁 《甘肃畜牧兽医》 2003年第1期2-4,共3页
根据已发表的CSFV核苷酸序列 ,设计并合成CSFV特异性PCR引物对及nested PCR引物对。从待检猪脾脏、淋巴组织或实验感染的细胞培养物中提取总RNA ,用AMV反转录酶进行反转录后 ,进行PCR扩增 ,一扩产物再用nested PCR引物对进行二次扩增 ,... 根据已发表的CSFV核苷酸序列 ,设计并合成CSFV特异性PCR引物对及nested PCR引物对。从待检猪脾脏、淋巴组织或实验感染的细胞培养物中提取总RNA ,用AMV反转录酶进行反转录后 ,进行PCR扩增 ,一扩产物再用nested PCR引物对进行二次扩增 ,用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。进一步将该片段纯化回收后 ,克隆到T载体并进行测序。测序结果同已知的CSFV、BVDV和BDV核苷酸序列进行同源性比较分析 ,既可快速、准确地区别于BVDV和BDV ,又可以确定CSFV的血清型。该方法可有效用于猪瘟的病理学和流行病学研究。 展开更多
关键词 RT-PCR nested-PCR技术 猪瘟 病毒检测 应用 同源性比较
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牛血液蛋白多态性与数量性状的关系 被引量：3
7
作者 辛亚平 张英汉 +1 位作者 王自良 仝翼升 《黄牛杂志》 2004年第4期23-26,共4页
血液蛋白多态性在选种中可视为一类附加性状。数量性状是由许多彼此独立的基因作用的结果 ,每个基因对性状的作用甚微 ,但遗传作用的机制仍服从孟德尔规律。牛的生产性能如产奶性能、生长性能和繁殖性能是通过有关生理活动来实现的 ,这... 血液蛋白多态性在选种中可视为一类附加性状。数量性状是由许多彼此独立的基因作用的结果 ,每个基因对性状的作用甚微 ,但遗传作用的机制仍服从孟德尔规律。牛的生产性能如产奶性能、生长性能和繁殖性能是通过有关生理活动来实现的 ,这涉及到酶、蛋白质等一系列生物活性物质的功能发挥 ,由于蛋白质 (酶 )多态性等生化性状与生同来 ,终生保持相对稳定 ,对外界环境保持相对独立性 ,如能找到生化性状对生产性能的预示物 ,就可提早选种 ,加快育种进度。本文综述了血液中血红蛋白、运铁蛋白、血清白蛋白位点的不同基因型多态性与产奶性能、繁殖性能、生长性能。 展开更多
关键词 牛 血液蛋白多态性 数量性状 产奶性能 繁殖性能 生长性能
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应用RT-PCR技术诊断鸡传染性支气管炎 被引量：1
8
作者 胡建和 王自良 +2 位作者 魏刚才 冶贵生 张彦明 《甘肃畜牧兽医》 2003年第5期12-13,共2页
根据已发表的IBV4/91attenuated株S1基因序列,设计并合成了产物约600bp的IBV特异性PCR引物对。从可疑病鸡气管、肺脏或肾脏组织中提取总RNA,用AMV反转录酶反转录后,再进行PCR扩增。用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物大小。采用NDV和IBDV病... 根据已发表的IBV4/91attenuated株S1基因序列,设计并合成了产物约600bp的IBV特异性PCR引物对。从可疑病鸡气管、肺脏或肾脏组织中提取总RNA,用AMV反转录酶反转录后,再进行PCR扩增。用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物大小。采用NDV和IBDV病料组织作阴性对照,IBV标准株M41作阳性对照。该法检测特异性强、成本低、检出率高,可有效用于鸡传染性支气管炎的早期检测和流行病学研究。 展开更多
关键词 鸡 传染性支气管炎 诊断 RT-PCR 流行病学
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竹鼠皮加工新技术 被引量：1
9
作者 田龙宾 潘润淑 钟华 《河南畜牧兽医》 2000年第12期20-21,共2页
本文探讨了用脲醛鞣剂——铝结合鞣的方法鞣制竹鼠皮的工艺，提出了工艺中的技术要点。采用本工艺制作的竹鼠皮，皮板柔软、丰满、延伸性好，毛被松散、灵活、有光泽，皮革收缩温度可达８０℃。
关键词 竹鼠皮 脲醛鞣剂 结合鞣
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饮用新城疫Ⅳ系苗引起新城疫感染的原因与探讨
10
作者 姚四新 王凯 +1 位作者 刘保国 刘凯 《河南科技学院学报》 2003年第3期48-50,共3页
通过对鸡新城疫的流行特点、临诊诊断、剖检变化及血清抗体的测定证实饮用NDiv系苗后引发了鸡新城疫感染,并从ND基因型变化及免疫抑制等多方面分析了ND发生的原因,并提出了相应的防制对策。
关键词 鸡 鸡新城疫 原因 防制对策
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科学配制早期断奶仔猪饲粮 被引量：1
11
作者 衡卫国 《畜禽业》 2000年第4期44-45,共2页
关键词 早期断奶仔猪 消化生理 营养生理 饲料配制
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盐酸克伦特罗单抗快速检测试剂盒的研制 被引量：24
12
作者 王选年 杨艳艳 +7 位作者 邢广旭 李青梅 杨继飞 柴书军 赵东 康晓笛 潘耀谦 张改平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期75-78,共4页
以竞争性酶免疫分析原理为基础 ,应用特异性克伦特罗 (Clenbuterol,CL )单克隆抗体研制成功了β-肾上腺素受体激动剂克伦特罗的快速检测 EL ISA试剂盒 (CL- Kit)。 CL- Kit线性检测范围为 0 .5～ 12 8μg/ L,各标准品的吸光值变异系数为... 以竞争性酶免疫分析原理为基础 ,应用特异性克伦特罗 (Clenbuterol,CL )单克隆抗体研制成功了β-肾上腺素受体激动剂克伦特罗的快速检测 EL ISA试剂盒 (CL- Kit)。 CL- Kit线性检测范围为 0 .5～ 12 8μg/ L,各标准品的吸光值变异系数为 2 .3%～ 3.6 %。标准曲线呈典型的 S型 ,相关系数 R2 =0 .996 ,符合 4参数 L ogit曲线拟合。检测结果表明 :CL 单抗对 CL 的半数抑制量 IC50 为 7.94 μg/ L,对沙丁胺醇 (Sb)的 IC50 为 10 0 0 μg/ L,肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素和来克多巴胺的 IC50 均≥ 6 4 0 0 μg/ L;CL- Kit与 Sb的交叉反应性为 0 .79% ,与异丙肾上腺素的交叉反应性为 0 .12 % ,与肾上腺素、去甲肾上腺素、来克多巴胺、各类抗生素及多种维生素均无交叉反应性。试剂盒测定回收率在 91%～ 10 5 % ,批内变异系数小于 2 0 % ,批间变异系数小于 10 %。 展开更多
关键词 克伦特罗 单克隆抗体 免疫分析 竞争性ELISA 肾上腺素受体激动剂
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日粮维生素A对雏鸡免疫应答的影响 被引量：14
13
作者 王选年 冯春花 +4 位作者 邓瑞广 王新华 陈永耀 孙好学 张改平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期254-257,共4页
本研究测定了日粮中添加 0～ 12 8μg/g维生素A(VA)时 ,雏鸡 2 0～ 35d对 β 酪蛋白抗原刺激时特异抗体生成水平及T淋巴细胞增殖活性。结果显示 ,日粮中未添加VA时 ,T细胞增殖活性和对抗原刺激的特异抗体生成水平都显著低于添加VA组 (P... 本研究测定了日粮中添加 0～ 12 8μg/g维生素A(VA)时 ,雏鸡 2 0～ 35d对 β 酪蛋白抗原刺激时特异抗体生成水平及T淋巴细胞增殖活性。结果显示 ,日粮中未添加VA时 ,T细胞增殖活性和对抗原刺激的特异抗体生成水平都显著低于添加VA组 (P <0 0 1)。添加VA各组的T细胞增殖活性与抗体水平与日粮中VA含量呈曲线相关 (P <0 0 1)。且随着VA含量的升高T细胞增殖活性与抗体生成也逐渐升高 ,当含量为 6 4 μg/ g时 ,其水平达到最高 ,而VA高于此水平时 ,其反应呈下降趋势。日粮中添加 6～ 7μg/gVA ,可使雏鸡的体液免疫和细胞免疫活性达到最高 。 展开更多
关键词 日粮 维生素A 雏鸡 免疫应答
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抗克伦特罗单克隆抗体杂交瘤的建立及其分泌单抗的免疫学特性鉴定 被引量：15
14
作者 王选年 周继勇 +7 位作者 杨艳艳 邢广旭 李青梅 杨继飞 柴书军 赵东 康晓笛 张改平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期194-198,共5页
目的 :建立抗克伦特罗 (CL)单克隆抗体杂交瘤细胞系 ,制备CL单克隆抗体 ,并鉴定其免疫学特性。方法 :用重氮化法将半抗原CL偶联于载体蛋白BSA ,形成结合抗原BSA CL ;以BSA CL免疫BALB/C小鼠 ,应用杂交瘤技术建立分泌CL单克隆抗体细胞株 ... 目的 :建立抗克伦特罗 (CL)单克隆抗体杂交瘤细胞系 ,制备CL单克隆抗体 ,并鉴定其免疫学特性。方法 :用重氮化法将半抗原CL偶联于载体蛋白BSA ,形成结合抗原BSA CL ;以BSA CL免疫BALB/C小鼠 ,应用杂交瘤技术建立分泌CL单克隆抗体细胞株 ;用体内诱生腹水法生产CL单抗 ,硫酸钠盐析法提纯。应用抗小鼠同种型抗体测定单抗的同种型 ,用竞争性ELISA和胶体金膜层析试验测定CL单抗的反应特异性和反应动力学。结果 :筛选出C 4G1、C 2H6、C 2D6和C 4C94株高敏感性和高特异性杂交瘤生产单抗 ,其单抗的间接ELISA效价分别为 5× 10 -5、3× 10 -4、6× 10 -4、2× 10 -5;同种型分别为IgG1/κ、IgG1/κ、IgG2a/κ、IgG2a/λ。C 4G1的亲和力常数K =1 6 8× 10 8L/mol,C 2H6的亲和力常数K =1 3× 10 8L/mol。经WestGold蛋白质印迹鉴定单抗与CL特异性结合。C 4G1单抗对CL的半数抑制浓度 (IC50 )为 7 94ng/ml,对沙丁胺醇 (Sb)的IC50 为 10 0 0ng/ml,对肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素和来克多巴胺的IC50 均≥ 6 4 0 0ng/ml;C 4G1单抗与Sb的交叉反应性为0 79% ,与异丙肾上腺素的交叉反应性为 0 12 % ,而与肾上腺素、去甲肾上腺素、来克多巴胺、各类抗生素及多种维生素均无交叉反应性。结论 展开更多
关键词 β-肾上腺素激动剂 克伦特罗 单克隆抗体 免疫学特性
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中国淡水三角涡虫(Dugesia sp)的染色体研究(Ⅰ) 被引量：16
15
作者 马金友 吕九全 +2 位作者 陈广文 徐存拴 刘德增 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1045-1050,共6页
利用空气干燥法对不同产地淡水三角涡虫的染色体进行了研究。核型分析表明 :河南淇县鱼泉三角涡虫 (Dugesiasp)和浙江杭州龙井三角涡虫 (Dugesiasp)体细胞中有 1 6条染色体 ,为二倍体 ,核型公式为 2n =2x=1 6 =1 6m ,均为具中部着丝粒... 利用空气干燥法对不同产地淡水三角涡虫的染色体进行了研究。核型分析表明 :河南淇县鱼泉三角涡虫 (Dugesiasp)和浙江杭州龙井三角涡虫 (Dugesiasp)体细胞中有 1 6条染色体 ,为二倍体 ,核型公式为 2n =2x=1 6 =1 6m ,均为具中部着丝粒染色体 ;河南济源不老泉三角涡虫 (Dugesiasp)有 2 4条染色体 ,为三倍体 ,核型公式为 2n =3x =2 4 =2 4m ,亦全部由中部着丝粒染色体组成。上述 3个产地淡水三角涡虫染色体的形态较为接近。北京樱桃沟三角涡虫 (Dugesiasp)的体细胞染色体数目为 2 4 ,为三倍体 ,核型公式为 2n =3x =2 4 =2 2m +2sm ,由中部和亚中部着丝粒染色体组成 ,其中第 2、 4号各有一条染色体属于亚中部着丝粒染色体。研究结果表明 :4个产地三角涡虫的体细胞染色体数目存在较大差异 ,包括二倍体 (2n =2x =1 6 )和三倍体 (2n =3x =2 4 ) ,染色体基数属于x 展开更多
关键词 核型 染色体 三角涡虫属 中国
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绵羊无形体病的诊断与防治 被引量：10
16
作者 王天有 刘俊伟 +1 位作者 司红英 刘保国 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第8期29-29,共1页
关键词 绵羊 无形体病 临床诊断 防治 发病特点 临床症状 剖检变化
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甘草多糖的提取及其对肉仔鸡生长性能的影响 被引量：29
17
作者 王丽荣 张海棠 +5 位作者 刘保国 董永军 王承民 王艳荣 石敏 张咏丽 《饲料工业》 北大核心 2004年第8期44-45,共2页
甘草根粉索氏提取,除蛋白、乙醇沉淀、抽滤、检测得甘草多糖,将所提甘草多糖以饲料添加剂的形式给予1日龄艾维茵肉仔鸡,对其生长性能(体重、料肉比)进行测定。结果表明:甘草多糖能明显提高艾维茵肉仔鸡的生长性能,与对照组相比,差异显著。
关键词 甘草多糖 提取技术 肉仔鸡 生长性能
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猪瘟病毒兔化弱毒株全长cDNA克隆的感染性鉴定 被引量：5
18
作者 胡建和 刘湘涛 +4 位作者 郭东升 张淼涛 田宏 张彦明 谢庆阁 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期143-147,共5页
用SrfⅠ限制性内切酶将构建的猪瘟病毒兔化弱毒株(C 株)全长cDNA线性化,体外转录获得其基因组RNA,利用脂质体将基因组RNA转染至SK 6细胞系,连续传代,收集5代以后培养细胞,采用RT PCR、荧光抗体直接法、夹心ELISA进行鉴定。结果表明,所... 用SrfⅠ限制性内切酶将构建的猪瘟病毒兔化弱毒株(C 株)全长cDNA线性化,体外转录获得其基因组RNA,利用脂质体将基因组RNA转染至SK 6细胞系,连续传代,收集5代以后培养细胞,采用RT PCR、荧光抗体直接法、夹心ELISA进行鉴定。结果表明,所构建的全长cDNA具有感染性。猪瘟病毒C 株全长感染性cDNA的成功构建,为在分子水平上进一步研究中国猪瘟病毒兔化弱毒株提供了极有价值的研究工具。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 兔化弱毒株 CDNA 克隆 感染性 转染 体外转录
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一种鉴别猪瘟C-株和其他毒株的分子生物学方法 被引量：5
19
作者 胡建和 陈永耀 +3 位作者 魏刚才 王三虎 张彦明 谢庆阁 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第2期95-98,103,共5页
　根据已发表的猪瘟病毒(CSFV)核苷酸序列,筛选出C-株与其他毒株的核苷酸序列差异标记CTTTTTTCTTTT,并设计包含此标记序列的CSFV特异性PCR引物对及nested-PCR引物对。从待检猪脾脏或淋巴组织中提取总RNA,用AMV逆转录酶进行逆转录后,进行... 　根据已发表的猪瘟病毒(CSFV)核苷酸序列,筛选出C-株与其他毒株的核苷酸序列差异标记CTTTTTTCTTTT,并设计包含此标记序列的CSFV特异性PCR引物对及nested-PCR引物对。从待检猪脾脏或淋巴组织中提取总RNA,用AMV逆转录酶进行逆转录后,进行PCR和nested-PCR。将扩增片段纯化回收并克隆到pMD18-T载体进行测序。对测序结果进行分析,含有此标记序列的即为C-株,不含此标记序列的则为其他毒株。 展开更多
关键词 猪瘟 C-株 毒株 分子生物学方法 标记序列 鉴别诊断
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微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23融合蛋白在大肠杆菌的表达 被引量：6
20
作者 何宏轩 张西臣 +4 位作者 欧阳红生 尹继刚 李吉平 李建华 杨举 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期52-54,共3页
目的　构建微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP2 3的原核表达载体 ,并且在大肠杆菌中表达。方法　用HindⅢ和EcoRⅠ酶分别从 pET - 2 8a(+)和 pMD18-T - 2 3质粒中酶切得到线性片段和CP2 3基因片段 ,然后用T4酶连接 ,构建重组的CP2 3的原核... 目的　构建微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP2 3的原核表达载体 ,并且在大肠杆菌中表达。方法　用HindⅢ和EcoRⅠ酶分别从 pET - 2 8a(+)和 pMD18-T - 2 3质粒中酶切得到线性片段和CP2 3基因片段 ,然后用T4酶连接 ,构建重组的CP2 3的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达 ,并用SDS -PAGE、ELISA和Westernblotting进行鉴定。结果　构建了CP2 3的原核表达载体 ,得到了一分子量约为 14kDa的融合蛋白 ,占大肠杆菌总蛋白的 36 %。结论　CP2 展开更多
关键词 微小隐孢子虫子孢子 表面抗原 CP23 融合蛋白 大肠杆菌
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