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SHARP-2特异的RNA干扰腺病毒载体的构建及功能鉴定
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作者 肖华婴 寿张飞 《浙江医学》 CAS 2012年第3期173-176,共4页
目的 构建转录SHARP-2 基因特异性的小发夹RNA（SHARP-2-shRNA）的重组腺病毒（Rad-hSHARP）,并观察其对正常大鼠肾细胞（NRK cell）SHARP-2基因的表达影响.方法 设计带有SHAPR-2特异性干扰序列的PDC316-SHARP-shRNA穿梭质粒与腺病毒骨... 目的 构建转录SHARP-2 基因特异性的小发夹RNA（SHARP-2-shRNA）的重组腺病毒（Rad-hSHARP）,并观察其对正常大鼠肾细胞（NRK cell）SHARP-2基因的表达影响.方法 设计带有SHAPR-2特异性干扰序列的PDC316-SHARP-shRNA穿梭质粒与腺病毒骨架质粒pBHGloxdelE13cre 共转染293 细胞,并在293 细胞内进行同源重组,构建Rad-hSHARP.并使用实时定量RT-PCR在NRK细胞中对重组腺病毒干扰效果进行鉴定.结果 成功构建了特异性SHARP-2基因RNA 干扰的腺病毒载体系统,并有效抑制NRK 细胞中SHARP-2 基因的表达.结论 成功构建SHARP-2-shRNA 的Rad-hSHARP,为利用特异性沉默SHARP-2基因的腺病毒载体抑制T细胞增殖活化研究奠定基础. 展开更多
关键词 RNA 干扰 小发夹RNA SHARP-2 基因 腺病毒载体
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