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传染性法氏囊病病毒HZ96 VP2 cDNA的结构分析及在大肠杆菌中的表达 被引量：7
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作者 于涟 宋坤华 +2 位作者 金勇丰 李双茂 张耀洲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期97-100,共4页
以随机引物反转录传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ） 杭州分离株ＨＺ９６ 基因组合成第１ 链ｃＤＮＡ。以第１ 链ｃＤＮＡ为模板，ＰＣＲ 扩增ＨＺ９６ ＶＰ２ ｃＤＮＡ ；Ｓａｎｇｅｒ 双脱氧法测序ＨＺ９６ ＶＰ２ ｃＤＮＡ， 并对其基... 以随机引物反转录传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ） 杭州分离株ＨＺ９６ 基因组合成第１ 链ｃＤＮＡ。以第１ 链ｃＤＮＡ为模板，ＰＣＲ 扩增ＨＺ９６ ＶＰ２ ｃＤＮＡ ；Ｓａｎｇｅｒ 双脱氧法测序ＨＺ９６ ＶＰ２ ｃＤＮＡ， 并对其基因结构氨基酸序列进行计算分析； 构建非融合表达质粒， 在大肠杆菌中表达ＶＰ２ 蛋白。结果表明， 克隆的ＨＺ９６ＶＰ２ ｃＤＮＡ 全长为１４３１ 个核苷酸对（ｂｐ） ， 含起始密码子ＡＴＧ 和终止密码子ＴＡＡ， 编码ＶＰ２ 第２０ 至第４９５ 共４７６ 个氨基酸； ＨＺ９６ ＶＰ２ 在核苷酸和氨基酸水平上， 与其它Ｉ 型ＩＢＤＶ ＶＰ２ 的同性均在９０ ％ 以上； 对ＨＺ９６ 分离株与强毒株ＶＰ２ ｃＤＮＡ 编码的氨基酸序列进行二级结构和亲水性分析发现，ＨＺ９６ 分离株ＶＰ２ 第２７９ 和２８４ 位氨基酸的变异，可导致附近区域（２７４ ～２９０ 位氨基酸） 的亲水性降低和α－ 螺旋的消失。ＨＺ９６ ＶＰ２ 在大肠杆菌中的表达量为８ ％ 。 展开更多
关键词 IBDV VP2 CDNA 结构分析 非融合表达 大肠杆菌
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