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题名一种新型乙型肝炎病毒耐药基因检测方法的建立及应用
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作者
艾文彬
王定保
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机构
湖北省孝感市第一人民医院临床中心实验室
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出处
《检验医学与临床》
CAS
2022年第S02期74-77,共4页
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文摘
目的探讨建立一种巢式PCR结合Sanger测序检测乙型肝炎病毒耐药基因位点的方法,为临床抗病毒药物的选择提供依据。方法采用特异性引物对120例HBV-DNA阳性样本(病毒载量>5×10^(2)copies/mL)进行HBV-DNA基因扩增,然后利用基因测序仪对扩增产物进行基因分型及耐药位点的检测。结果本实验室建立的巢氏PCR结合Sanger测序的最低检测下限为5×10^(2)copies/mL;86例使用了核苷类似物治疗的患者(用药组)中55例为B型HBV,31例为C型HBV。86例用药患者中有37例检测出耐药突变(突变率为43%),耐药位点检测阳性率明显高于未用药对照(P<0.05),其中以L180M+M204I/V、rtM204V/I、N236T和rtA181V/T突变为主,分别占37.8%、29.7%、13.5%和10.8%;34例未用药患者未检测出耐药突变基因;耐药组的HBV-DNA、AFU、IL-6水平高于非耐药组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本方法能够对低载量HBV进行基因分型和耐药基因位点的检测,方法便捷高效,对于低水平HBV病毒载量的标本(HBV-DNA<1×10^(3))也能检测出准确突变位点,为乙肝药物使用提供了技术支持,可推广使用。
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关键词
巢式PCR
Sanger测序
乙肝病毒
耐药基因突变
低载量
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Keywords
nested PCR Sanger sequencing
hepatitis B virus
resistance gene
mutation low load
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分类号
R512.62
[医药卫生—内科学]
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