目的建立限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)快速检测HP对克拉霉素耐药性的方法。方法抽提37例经纸片琼脂扩散法鉴定为克拉霉素耐药的HP菌株DNA及其对应的胃黏膜组织标本DNA,通过PCR技术扩增23S rRNA...目的建立限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)快速检测HP对克拉霉素耐药性的方法。方法抽提37例经纸片琼脂扩散法鉴定为克拉霉素耐药的HP菌株DNA及其对应的胃黏膜组织标本DNA,通过PCR技术扩增23S rRNA区425 bp基因,运用RFLP技术,采用BbsⅠ和BsaⅠ内切酶对PCR产物进行酶切分析,并进行DNA测序。结果37例克拉霉素耐药的HP菌株DNA经RFLP分析,21例能被BbsⅠ内切酶切开,13例能被BsaⅠ内切酶切开,3例不能被BbsⅠ和BsaⅠ内切酶切开,而且37例组织标本DNA检测结果与菌株DNA检测结果一致。结论RFLP可应用于HP对克拉霉素耐药性的快速检测,为临床用药提供指导。展开更多
文摘目的探讨全自动ELISA系统检测HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag、HBe Ab、Hbc Ab(HBV-M)是否在重复性、准确度等方面优于手工法和半自动法,为其更好地在临床实验室开展工作提供进一步的数据和基础。方法用以上各项指标的弱阳性质控品,分别做手工法、半自动法和全自动法的批内和批间重复性试验。另用三种方法分别检测临床血清标本,每项810人份。定性结果不完全一致的标本,HBs Ag用中和法做确证试验,其余四项用化学发光法作为参考方法进行验证。结果批内与批间重复性比较,全自动法的CV小于手工法和半自动法。三种方法检测临床标本,定性结果两两比较,均显示一致性非常好(k>0.8,P<0.05);进行卡方检验,除HBc Ab的半自动法阳性率显著高于全自动法(P<0.0125)外,其余项目三种方法两两比较,均无显著性差异(P>0.0125)。经过确证/参考试验验证,全自动法、半自动法、及手工法不完全一致的标本,HBs Ag17份,符合个数分别为15、9和4;HBs Ab 24份,符合个数分别为17、13、7;HBe Ag 9份,符合个数分别为7、2、5;HBe Ab 34份,符合个数分别为19、16、19;HBc Ab 36份,符合个数分别为28、15、19。结论 1全自动法比半自动法和手工法具有更好的重复性。2三种方法有非常好的一致性,均能较好的诊断乙型肝炎。3全自动法ELISA检测HBV-M比半自动法和手工法准确度更高,可进一步提高这些项目的检验质量。
