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鲨鱼肝提取液的免疫活性实验研究 被引量：11
1
作者 谢宗法 陈光明 +1 位作者 黄英 邢彩霞 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1999年第3期126-128,共3页
从鲨鱼肝脏中提取一组能有效促进成纤维细胞等多种组织细胞增殖、分化的小分子活性多肽，体外探讨其生物活性及其对人细胞免疫功能的影响。方法：分别用~３Ｈ－ＴｄＲ ＤＮＡ掺入法、细胞学技术、ＥＬＩＳＡ、生物素－链霉亲和素（ＢＳ... 从鲨鱼肝脏中提取一组能有效促进成纤维细胞等多种组织细胞增殖、分化的小分子活性多肽，体外探讨其生物活性及其对人细胞免疫功能的影响。方法：分别用~３Ｈ－ＴｄＲ ＤＮＡ掺入法、细胞学技术、ＥＬＩＳＡ、生物素－链霉亲和素（ＢＳＡ）免疫细胞化学法及^（１２５）Ｉ－ＵｄＲ释放试验检测其免疫活性。结果：可明显增强肝瘤细胞株７２１１细胞ＤＮＡ合成，有效提高Ｔ淋巴细胞形成Ｅａ花环能力（Ｐ＜０．０１），诱导ＰＢＭＣ细胞分泌ＩＦＮ－γ（Ｐ＜０．０１），增强ＮＫ细胞活性（Ｐ＜０．０５），促进ＰＢＭＣ细胞表面ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达（Ｐ＜０．００１）。结论：鲨鱼肝提取液对机体细胞免疫功能具有良好的正向调节作用，提示其在改善机体免疫状态，提高机体免疫防御机制等方面具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 鲨鱼肝 提取液 免疫活性 实验
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HBsAg特异性CTL诱发HBV转基因小鼠肝损伤的实验研究
2
作者 张宜俊 刘光泽 +2 位作者 王洪敏 吕丽春 章谷生 《上海实验动物科学》 1999年第1期8-10,共3页
用ＨＢｓＡｇ特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）给ＨＢＶ转基因ＩＣＲ小鼠过继性输注，通过肝组织病理学和免疫组化观察，发现其能诱发类似急性肝炎病变，提示抗原特异性ＣＴＬ在ＨＢＶ抗原所引起的宿主细胞免疫应答而导致肝细胞损伤... 用ＨＢｓＡｇ特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）给ＨＢＶ转基因ＩＣＲ小鼠过继性输注，通过肝组织病理学和免疫组化观察，发现其能诱发类似急性肝炎病变，提示抗原特异性ＣＴＬ在ＨＢＶ抗原所引起的宿主细胞免疫应答而导致肝细胞损伤的过程中有作用。 展开更多
关键词 转基因 HBSAG 肝损伤 乙型肝炎病毒
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促肝细胞生长素单克隆抗体的制备及其免疫组织化学研究 被引量：12
3
作者 孔祥平 张宜俊 +4 位作者 邹清雁 郑国池 扬联萍 张昌卿 萧锡宾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期165-168,共4页
采用超滤法从幼龄猪肝脏中制备的促肝细胞生长素（ＰＨＧＦ）是一类重均分子量为１０６８５Ｄａ的多肽或蛋白，具有特异性地促进肝细胞增生的生物学活性。以ＰＨＧＦ为抗原制备的两株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）可以特异地中和ＰＨＧＦ的活... 采用超滤法从幼龄猪肝脏中制备的促肝细胞生长素（ＰＨＧＦ）是一类重均分子量为１０６８５Ｄａ的多肽或蛋白，具有特异性地促进肝细胞增生的生物学活性。以ＰＨＧＦ为抗原制备的两株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）可以特异地中和ＰＨＧＦ的活性。利用亲和层析技术纯化的ＰＨＧＦ，其活性增加８００倍。经ＰＡＧＥ－ＳＤＳ电泳测其分子量为１１４００Ｄａ，呈均匀的单一组份。免疫组化定位研究表明，ＰＨＧＦ主要分布于胎儿、乳兔和乳猪的肝实质细胞，在胞质内呈均匀的颗粒分布，而肝内非实质细胞、血岛细胞等均未见染色。胃和大肠粘膜上皮细胞的胞质内也含有少量染色阳性的颗粒。心、肺、肾、脾、甲状腺、胸腺、大脑皮质、子宫等组织中未发现有ＰＨＧＦ分布。 展开更多
关键词 肝再生 免疫组织化学 单克隆抗体
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促肝细胞生长素近年来研究进展 被引量：6
4
作者 张宜俊 《中西医结合肝病杂志》 CAS 1998年第S1期13-16,共4页
自从陈成伟提出人胎肝疗法治疗重型肝炎以来,国内于80年代曾掀起人胎肝疗法的热潮,但鉴于该疗法存在着供体来源困难以及药物不能长期保存等问题,张宜俊等在参考Labreque研制肝细胞刺激物质(HSS)的基础上,根据HSS无种属特异性、有器官特... 自从陈成伟提出人胎肝疗法治疗重型肝炎以来,国内于80年代曾掀起人胎肝疗法的热潮,但鉴于该疗法存在着供体来源困难以及药物不能长期保存等问题,张宜俊等在参考Labreque研制肝细胞刺激物质(HSS)的基础上,根据HSS无种属特异性、有器官特异性及年龄依赖性等特点,以乳猪肝为材料,应用透析法(后改为超滤法)制备分子量在10 000D以下的小分子多肽类物质。基础研究表明, 展开更多
关键词 促肝细胞生长素 PHGF 重型肝炎 病毒性肝炎 抗肝纤维化作用 肝癌细胞凋亡 FAS抗原 T细胞 慢性乙型肝炎 人胎肝
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促肝细胞生长素人体内药代动力学的研究 被引量：6
5
作者 张海松 张宜俊 孔祥平 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1997年第2期86-88,共3页
建立了测定促肝细胞生长素在人体中的血药浓度的高效液相色谱法，并对8名健康志愿者进行了药代动力学研究。用3P87程序计算药代动力学参数并拟合了房室模型，体内过程符合二室模型。
关键词 促肝细胞生长素 药代动力学 高效液相色谱法
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静脉滴注用胸腺肽降压物质测定中供试品给药剂量的研究 被引量：2
6
作者 胡军高 张海松 +1 位作者 陈伟明 王洪敏 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1998年第6期391-392,共2页
采用临床药代动力学数据，用对比分析的方法确定了胸腺肽降压物质测定中胸腺肽的给药剂量，并对6批静脉滴注用胸腺肽进行了降压物质测定，均符合规定。
关键词 胸腺肽 降压物质 剂量 静脉滴注
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胸腺肽注射液细菌内毒素检测方法的研究 被引量：2
7
作者 刘卫红 张海松 陈润群 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期342-343,共2页
关键词 细菌内毒素 胸腺肽注射液 检测
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促肝细胞生长素溶液浓缩工艺的研究 被引量：2
8
作者 张海松 邹晓军 许可 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2004年第3期191-191,共1页
关键词 促肝细胞生长素溶液 浓缩
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白马骨根水提取物的体外抗乙肝病毒作用 被引量：19
9
作者 陈文吟 余宙耀 +1 位作者 郑茉莉 陈阳述 《湖南中医学院学报》 1997年第4期44-45,共2页
采用ＨＢＶＤＮＡ转染细胞（２．２．１５细胞）为靶细胞，用Ａｒａ－Ａｍｐ为阳性对照药，观察在不同浓度下白马骨根水提取物对２．２．１５细胞表达ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ的影响。结果显示：白马骨根水提取物在１２．５ｍｇ～１００... 采用ＨＢＶＤＮＡ转染细胞（２．２．１５细胞）为靶细胞，用Ａｒａ－Ａｍｐ为阳性对照药，观察在不同浓度下白马骨根水提取物对２．２．１５细胞表达ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ的影响。结果显示：白马骨根水提取物在１２．５ｍｇ～１００ｍｇ／ｍｌ的浓度范围内，对２．２．１５细胞分泌ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ有抑制作用。 展开更多
关键词 白马骨根 水提取物 乙肝病毒 细胞培养
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内毒素人致热阈剂量下新西兰兔体温变化的研究 被引量：1
10
作者 胡军高 陈伟明 张海松 《广州医药》 2001年第2期55-56,共2页
在内毒素人致热阈剂量 5 0EU/kg下测定 8只新西兰兔肛体温的变化值 (△T)。△T =0 5 2 ,可信限为 0 5～ 0 5 3,可信限率为 2 9% (P =0 95 )。并对两批药品热原数据中最高值达到 0 5℃但按药典规定一次性判断为符合规定的药品进... 在内毒素人致热阈剂量 5 0EU/kg下测定 8只新西兰兔肛体温的变化值 (△T)。△T =0 5 2 ,可信限为 0 5～ 0 5 3,可信限率为 2 9% (P =0 95 )。并对两批药品热原数据中最高值达到 0 5℃但按药典规定一次性判断为符合规定的药品进行复试或重检 ,结果发现不符合规定 ,与鲎试剂检验结论一致。表明 ,内毒素人致热阈剂量由 10 0EU/kg改变为 5 0EU/kg时 ,药品热原实验中新西兰兔升温临界值应由 0 6℃调至 0 5℃ ,以提高药品安全性检查的可靠性 ,减少药品不良反应的发生。 展开更多
关键词 人致热阈剂是 兔法热原实验 内毒素 促肝细胞生长系
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多肽及蛋白质类药物的研究进展 被引量：1
11
作者 张海松 邹晓军 《黑龙江医药》 CAS 1996年第6期336-337,共2页
介绍了目前多肽及蛋白质类药物口服制剂的研究概况。
关键词 多肽 蛋白质 口服给药
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促肝细胞生长素注射液的临床前实验研究 被引量：2
12
作者 胡军高 张海松 +2 位作者 刘晓玲 秦爱华 朱伦秀 《广东药学》 2004年第1期34-36,共3页
目的 对促肝细胞生长素注射液(Injection of PHGF)进行临床前实验研究,为新剂型的研究提供依据。方法 3批促肝细胞生长素注射液在室温下进行加速实验,用高效液相色谱仪对其组分分析、用H3-掺入法和E花环法对3批注射液的生物学和免疫学... 目的 对促肝细胞生长素注射液(Injection of PHGF)进行临床前实验研究,为新剂型的研究提供依据。方法 3批促肝细胞生长素注射液在室温下进行加速实验,用高效液相色谱仪对其组分分析、用H3-掺入法和E花环法对3批注射液的生物学和免疫学活性研究;新西兰兔耳缘静脉注射促肝细胞生长素注射液,肉眼观察和显微镜检注射部位血管及其周围组织的病理改变,研究促肝细胞生长素注射液的血管刺激性;以生理盐水为阴性对照,注射用水为阳性对照,加入适量2％红细胞悬液,促肝细胞生长素注射液为实验组,进行溶血实验研究;常规方法进行过敏实验研究。结果 室温下加速实验6个月的3批促肝细胞生长素注射液与粉针剂的组分一致;生物学活性分别为8.6、5.6、5.0,免疫学活性分别为15.7％、12.9％、12.4％,与3批粉针剂比较均P>0.05,结果无显著性差异;促肝细胞生长素注射液无血管刺激性;无溶血现象;过敏实验结果符合规定。结论 促肝细胞生长素注射液室温下放置6个月稳定性好,无血管刺激性,不溶血,不致敏。 展开更多
关键词 促肝细胞生长素注射液 促肝细胞生长素粉针剂 H.一掺入法 E花环法 血管刺激性溶血实验 过敏实验
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促肝细胞生长素活性测定方法的研究 被引量：1
13
作者 张海松 陈阳述 《广东药学》 2005年第2期19-21,共3页
目的　研究促肝细胞生长素活性测定的新方法。方法　用SMMC -7721细胞株,MTT(溴化四唑蓝)染色法测定该药的活性。结果　该法结果与现行标准方法的结果无显著性差异。结论　该法可用于促肝细胞生长素活性的测定。
关键词 促肝细胞生长素 活性 MTT染色法
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注射用促肝细胞生长素细菌内毒素检测方法的研究 被引量：1
14
作者 张海松 刘卫红 许可 《广东药学》 2005年第3期23-24,共2页
目的建立注射用促肝细胞生长素的细菌内毒素检测方法。方法参照《中国药典》2000版二部附录方法。结果供试品稀释到0.025mg/ml时无干扰现象。结论建立了该品细菌内毒素检查的方法。
关键词 注射用促肝细胞生长素 细菌内毒素检查法 干扰试验
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促肝细胞生长素颗粒剂在人体内的生物利用度研究
15
作者 张海松 张宜俊 +1 位作者 孔祥平 陈阳述 《中国药房》 CAS CSCD 1996年第6期270-271,共2页
本文报道８名健康志愿者口服和静注促肝细胞生长素的生物利用度研究。单剂量口服促肝细胞生长素颗粒剂１８００ｍｇ，静注１２０ｍｇ。用高效液相色谱法测定人血浆中ＰＨＧＦ的浓度。口服药物后体内过程符合单室模型，达峰时间１５９... 本文报道８名健康志愿者口服和静注促肝细胞生长素的生物利用度研究。单剂量口服促肝细胞生长素颗粒剂１８００ｍｇ，静注１２０ｍｇ。用高效液相色谱法测定人血浆中ＰＨＧＦ的浓度。口服药物后体内过程符合单室模型，达峰时间１５９±１６ｍｉｎ，峰浓度２．７±０．８２μｇ／ｍｌ，曲线下面积为６２０±１１０μｇ·ｍｉｎ／ｍｌ。ＰＨＧＦ颗粒剂对静脉注射剂的生物利用度为４．８％。 展开更多
关键词 促肝细胞生长素 颗粒剂 人体生物利用率 色谱法
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国产胸腺肽对人T淋巴细胞E受体和CD_2抗原表达的影响 被引量：9
16
作者 张宜俊 陈阳述 +2 位作者 尤玉琴 陈文吟 李灼亮 《广东医学》 CAS CSCD 1997年第12期829-830,共2页
关键词 胸腺肽 T淋巴细胞E受体 CD2 抗原
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人源性抗HBsAg抗体Fab段噬菌体呈现文库的构建、筛选及阳性克隆核苷酸序列测定 被引量：6
17
作者 高辉 杨安钢 +2 位作者 高磊 任向荣 余宙耀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期308-311,共4页
目的 :构建一个经HBsAg主动免疫的人lgG1抗体噬菌体展示文库 ,通过特异的淘筛 (panning)获得与HBsAg有较高亲和力的Fab抗体 ,并测定其编码序列。方法 :从一经乙肝疫苗免疫的自愿者的外周血分离淋巴细胞提取RNA ,逆转录合成cDNA。PCR扩... 目的 :构建一个经HBsAg主动免疫的人lgG1抗体噬菌体展示文库 ,通过特异的淘筛 (panning)获得与HBsAg有较高亲和力的Fab抗体 ,并测定其编码序列。方法 :从一经乙肝疫苗免疫的自愿者的外周血分离淋巴细胞提取RNA ,逆转录合成cDNA。PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物克隆进载体pComb3H相应的位点 ,构建成噬菌体呈现库 ,并以HBsAg包被的 96孔板对抗体库进行 3轮淘筛 ,将所获克隆分别与HBsAg进行ELISA反应 ,挑取显色大于对照 2 0倍以上的阳性克隆进行DNA测序。结果 :lgG1的Fd段和κ轻链cDNA得到扩增 ,构建了一实际库容量为 1 8× 10 5 的噬菌体呈现文库。通过特异性淘筛 ,获得与HBsAg有较高新合力的 3株Fab抗体并测定其编码序列。DNA序列测定结果表明 ,3株抗体中两株的Fd段完全一样 ,且 3株的轻链完全一样。结论 :成功构建了一个经HBsAg抗原免疫的人源抗体Fab段噬菌体抗体库 ,筛选得到了 3株特异性抗体的Fab片段。 展开更多
关键词 乙型肝炎抗原 抗体 分子克隆 DNA 噬菌体呈现文库
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含CpG motifs的乙肝表面抗原载体的构建及表达(英文) 被引量：1
18
作者 吴虹 陈光明 +1 位作者 宗敏华 杨汝德 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期19-22,共4页
构建了编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒 pVAX_CpGS2 S ,其中通过PCR克隆了若干个CpGmotifs到质粒载体中 .经酶切鉴定和测序正确后将重组质粒体外转染COS7细胞 ,ELISA法检测上清液中的HBsAg呈阳性 ,说明重组质粒 pVAX_... 构建了编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒 pVAX_CpGS2 S ,其中通过PCR克隆了若干个CpGmotifs到质粒载体中 .经酶切鉴定和测序正确后将重组质粒体外转染COS7细胞 ,ELISA法检测上清液中的HBsAg呈阳性 ,说明重组质粒 pVAX_CpGS2 S在体外能够有效表达HBsAg ,为探讨CpGmotifs克隆入DNA疫苗载体后对体内免疫反应的影响打下基础 . 展开更多
关键词 CPG MOTIFS 乙肝表面抗原 载体 表达
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重组乙肝表面抗原真核表达质粒pVAX-S_2S的构建及DNA免疫 被引量：1
19
作者 吴虹 陈光明 +3 位作者 杨汝德 丘力功 黄明 李治刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期832-835,共4页
目的 :为探索更安全的乙型肝炎病毒 (HBV)DNA疫苗 ,构建编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒 ,并观察其诱导BALB c小鼠产生体液免疫应答情况。方法 :采用限制性内切酶从重组的真核表达质粒pcDNA S2 S中分离出乙肝表面抗... 目的 :为探索更安全的乙型肝炎病毒 (HBV)DNA疫苗 ,构建编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒 ,并观察其诱导BALB c小鼠产生体液免疫应答情况。方法 :采用限制性内切酶从重组的真核表达质粒pcDNA S2 S中分离出乙肝表面抗原中蛋白 (preS2 +S)基因片段 ,将其亚克隆于pVAX1真核表达载体 ,酶切鉴定 ,按不同剂量一次性肌内注射免疫小鼠 ,ELISA法检测小鼠血清抗 HBs。结果 :酶切鉴定重组质粒pVAX S2 S为正向插入的阳性克隆。HBVDNA疫苗 (pVAX S2 S)高 (10 0 μg 只 )、中 (5 0 μg 只 )、低 (10 μg 只 )三组剂量一次性免疫健康BALB c小鼠 ,均能在 2w诱导抗 HBs产生 ,抗体效价随时间延长而增长。血清抗体水平比较 ,高剂量组 (97 83± 38 78)mU ml较中剂量组 (45 13± 2 1 12 )mU ml、低剂量组 (19 74±11 92 )mU ml差异均具显著性 (P <0 0 5 ) ,以后的 4,8w高、中剂量组间差别缩小 ,但两者较低剂量组差异均具显著性 (P <0 0 5 )和非常显著性 (P <0 0 1)。结论 :卡那霉素抗性的重组质粒pVAX S2 S能有效诱导正常小鼠产生体液免疫应答。 展开更多
关键词 DNA疫苗 乙型肝炎表面抗原 体液免疫 动物实验 免疫应答
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重组乙肝表面抗原真核表达质粒的构建及表达 被引量：1
20
作者 吴虹 罗民新 +2 位作者 陈光明 宗敏华 杨汝德 《广东药学院学报》 CAS 2001年第4期257-259,共3页
采用限制性内切酶从重组的真核表达质粒pcDNA S2 S中分离出经过测序鉴定的乙肝表面抗原中蛋白 (preS2 +S)基因片段 ,将其亚克隆于pVAX1真核表达载体 ,构建编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒 pVAX S2 S ,酶切鉴定后将重... 采用限制性内切酶从重组的真核表达质粒pcDNA S2 S中分离出经过测序鉴定的乙肝表面抗原中蛋白 (preS2 +S)基因片段 ,将其亚克隆于pVAX1真核表达载体 ,构建编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒 pVAX S2 S ,酶切鉴定后将重组质粒体外转染COS7细胞 ,ELISA法检测上清液中的HBsAg呈阳性 ,说明重组质粒pVAX S2 S在体外能够有效表达HBsAg。 展开更多
关键词 DNA疫苗 乙型肝炎表面抗原 表达
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