运用学会平台开展微生物学兴趣小组活动探讨 被引量：1

1

作者 黎志东 徐志凯 +1 位作者 王斐斐 王平忠 《基础医学教育》 2013年第1期6-8,共3页

以学会为平台、以兴趣为导向、以学生为主体,开展观摩实践、科技服务、科技下乡、科普宣传、学术活动等兴趣小组活动,并通过互联网扩大活动效果,通过长期扶持关注学生长远发展,从而充分调动学生学习的积极性和主动性,使学生丰富知识、... 以学会为平台、以兴趣为导向、以学生为主体,开展观摩实践、科技服务、科技下乡、科普宣传、学术活动等兴趣小组活动,并通过互联网扩大活动效果,通过长期扶持关注学生长远发展,从而充分调动学生学习的积极性和主动性,使学生丰富知识、开阔视野、锻炼思维、培养创新,提高发现问题、分析问题和解决问题的能力,提高创新精神和创新水平。 展开更多

关键词 微生物学 教学方法 兴趣小组

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循证医学理念引入医学微生物学教学探讨

2

作者 王丽梅 姜泓 《基础医学教育》 2011年第9期787-789,共3页

在微生物学教学过程中引入循证医学理念、原则和方法,形成以问题为中心,变学生被动学习为主动学习的一种新的教学模式,有利于培养学生的创新思维能力和自我更新医学知识的能力,提高教学效果和医学生的综合素质。

关键词 微生物学 教学方法 循证医学

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执业医师资格考试与本科教学衔接模式探讨 被引量：12

3

作者 黎志东 吴兴安 +3 位作者 鲍向红 王平忠 王媛 徐志凯 《基础医学教育》 2013年第5期547-548,共2页

执业医师资格考试是评价申请医师资格者是否具备从事医师工作所必须的专业知识与技能的考试,是衡量医科大学本科教学质量的重要指标。PBL教学法是提高学生综合能力、有效衔接教考两方面的教学模式,它将不同学科、不同知识点融会贯通到... 执业医师资格考试是评价申请医师资格者是否具备从事医师工作所必须的专业知识与技能的考试,是衡量医科大学本科教学质量的重要指标。PBL教学法是提高学生综合能力、有效衔接教考两方面的教学模式,它将不同学科、不同知识点融会贯通到疾病诊、防、治这个医学学习的中心主题和核心目标上来,使学生密切联系临床提出问题、分析问题和解决问题,在提高学生综合知识和实践技能的同时,也提高学生执业医师资格考试通过率。 展开更多

关键词 高等教育 本科教学 PBL教学法 执业医师考试

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HBV截短core基因融合preS1基因在BCG中的表达及其免疫应答 被引量：2

4

作者 尹文 吕欣 +5 位作者 雷迎峰 杨敬 孙梦宁 马玉 兰海云 汪爱勤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期28-30,共3页

目的:探讨HBV相关抗原在卡介苗(BCG)中的有效表达及其刺激产生的体液和细胞免疫应答效果。方法:将带有HBV截短C基因和preS1基因片段的穿梭载体转化BCG菌株,筛选重组菌,SDS-PAGE和Western blot实验分析其抗原表达特性;分别以生理盐水、BC... 目的:探讨HBV相关抗原在卡介苗(BCG)中的有效表达及其刺激产生的体液和细胞免疫应答效果。方法:将带有HBV截短C基因和preS1基因片段的穿梭载体转化BCG菌株,筛选重组菌,SDS-PAGE和Western blot实验分析其抗原表达特性;分别以生理盐水、BCG、BCG-pDE22、BCG-pDE22-CS1皮下注射BALB/c小鼠,进行连续抗体测定和细胞毒性T细胞杀伤实验。结果:与对照组相比,重组BCG可表达Mr为24000的新生蛋白,与CS1融合蛋白大小相符,Westernblot实验分析显示出良好的抗原结合特性;带有HBVCS1抗原基因的重组BCG免疫组抗体滴度显著升高,特异性杀伤能力更强。结论:BCG可以作为HBV相关抗原的活载体,为研制HBV新型疫苗提供了实验依据。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 细胞毒性T细胞 BCG 抗体

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调控型表达丙型肝炎病毒NS3／4A蛋白酶转基因小鼠的建立 被引量：1

5

作者 孙梦宁 兰海云 +9 位作者 马玉 赵亚 吕欣 杨敬 雷迎峰 姚敏 康健 招明高 汪爱勤 尹文 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第1期76-80,共5页

目的建立调控因素存在下表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A丝氨酸蛋白酶的转基因小鼠。方法采用分子克隆技术构建可受Tet-On调控系统和Cre-LoxP基因敲除系统双重调控表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的真核表达质粒PBI-Ⅲ/LoxP-Luc-PolyA-LoxP-NS3... 目的建立调控因素存在下表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A丝氨酸蛋白酶的转基因小鼠。方法采用分子克隆技术构建可受Tet-On调控系统和Cre-LoxP基因敲除系统双重调控表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的真核表达质粒PBI-Ⅲ/LoxP-Luc-PolyA-LoxP-NS3/4A。该重组质粒线性化后,经显微注射制备转基因小鼠。首建鼠及经PCR检测阳性的子代鼠与C57BL/6小鼠交配传代。选择部分F2鼠与已经稳定建系的转基因小鼠Lap杂交,利用在体生物发光成像系统(BLI)检测肝脏稳定表达荧光素酶(Luc)报告基因的经盐酸强力霉素(Dox)诱导的双转基因子代鼠,并选择性针对稳定表达系传代扩群。结果酶切鉴定和测序分析显示重组载体构建成功。经PCR检测得到6只转基因首建鼠,其中3只可繁殖传代并持续检测到阳性子代鼠。BLI结果显示,由其中1只首建鼠传代而来的不同F2鼠与Lap鼠杂交得到的部分双转基因鼠肝脏部位发光信号强烈,表明这些小鼠肝细胞内报告基因Luc特异高效表达。结论建立了转基因小鼠NS3/4A,并筛选到调控因素存在时转入外源基因特异稳定表达的转基因小鼠,为进一步建立严格调控型表达NS3/4A蛋白酶的小鼠模型奠定基础。 展开更多

关键词 肝炎病毒属 模型 动物 小鼠 转基因

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Tet-on和Cre／loxP双调控肝靶向表达Cre重组酶转基因小鼠的制备和功能评价 被引量：1

6

作者 赵亚 马玉 +10 位作者 黄豫晓 兰海云 孙梦宁 吕欣 杨敬 雷迎峰 张建敏 康健 招明高 汪爱勤 尹文 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第1期81-83,共3页

目的制备Tet-on和Cre/loxP系统双重调控下肝靶向性表达Cre重组酶的转基因小鼠rtTALAP-1/LC-1并评价其功能,为最终建立可突破胚胎期免疫耐受的双调控型HCV转基因小鼠模型奠定基础。方法选取适龄rtTALAP-1转基因小鼠与LC-1转基因小鼠交配,... 目的制备Tet-on和Cre/loxP系统双重调控下肝靶向性表达Cre重组酶的转基因小鼠rtTALAP-1/LC-1并评价其功能,为最终建立可突破胚胎期免疫耐受的双调控型HCV转基因小鼠模型奠定基础。方法选取适龄rtTALAP-1转基因小鼠与LC-1转基因小鼠交配,PCR法检测子代rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠基因组中是否插入了rtTA元件和Cre基因片段。双阳性rtTALAP-1/LC-1小鼠dox诱导1周后,以小动物活体成像系统检测小鼠肝脏的Luc萤光素酶信号,免疫组化检测Cre重组酶在小鼠肝脏等组织中的表达状况。结果 rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠在dox诱导后,仅在其肝脏检测到清晰的Luc萤光素酶信号,而其他脏器均未检测到萤光信号;免疫组化法也仅在小鼠肝细胞核中检测到Cre重组酶的表达,心脏、肾脏和骨骼肌等其他组织均未检测到Cre重组酶的表达。结论成功制备了rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠,其靶基因表达的诱导反应性和肝靶向性均良好,为最终制备双调控型丙型肝炎病毒(HCV)转基因小鼠模型奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 肝炎病毒属 小鼠 转基因 免疫耐受

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艾滋病PBL教学法的案例设计探讨 被引量：5

7

作者 黎志东 《基础医学教育》 2013年第4期407-409,共3页

以问题为中心的教学法(PBL,problem-based learning),是以学生为中心探究现实问题的教育方式,案例的设计是PBL的关键。在艾滋病PBL教学案例设计中,强调情景立意、问题驱动、学习应用、拓展延伸四个环节,注意联系实验、开放思考两个方面... 以问题为中心的教学法(PBL,problem-based learning),是以学生为中心探究现实问题的教育方式,案例的设计是PBL的关键。在艾滋病PBL教学案例设计中,强调情景立意、问题驱动、学习应用、拓展延伸四个环节,注意联系实验、开放思考两个方面,将既往研究发现的不感染案例、耐药案例、长期感染不进展案例进行糅合,以疾病的生物学特性、致病性、免疫性、诊防治方法为线索,设计5个主题,每个主题又包括1-2个场景、提出5-8个问题,已达到激发学生兴趣、探究问题答案、讨论激发灵感、拓展创新思想的目的。 展开更多

关键词 艾滋病 教学方法 PBL教学

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寄生虫的默默“奉献”

8

作者 赵亚 李英辉 +3 位作者 黄豫晓 刘忠湘 梁姣 徐志凯 《医学争鸣》 CAS 北大核心 2011年第6期23-24,共2页

在生物界中，为了寻求食物或逃避敌害，各种生物之间形成各种错综复杂的关系。任何生物，在其生命中的某一阶段或终生与另一种生物之间存在着共同生活的关系，就称为共生（symbiosis）。按照传统的分类标准，根据生物之间利害关系的不... 在生物界中，为了寻求食物或逃避敌害，各种生物之间形成各种错综复杂的关系。任何生物，在其生命中的某一阶段或终生与另一种生物之间存在着共同生活的关系，就称为共生（symbiosis）。按照传统的分类标准，根据生物之间利害关系的不同，可将共生分为三种类型：共栖（commensalism）、互利共生（mutualism）和寄生（parasitism）。 展开更多

关键词 寄生虫 生物界 共同生活 分类标准 共生

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乙型肝炎病毒核心启动子下游克隆入Teto序列后其在不同细胞系中转录活性的变化

9

作者 易军 雷俊川 +4 位作者 宫卫东 赵亚 姜河 刘忠湘 王岭 《生物技术通讯》 CAS 2010年第6期771-774,共4页

目的:探讨将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子(Cp)下游后对该启动子在不同细胞系中转录活性的影响。方法:利用PCR从质粒pTL-8中扩增7个Teto序列,并将其克隆入T载体pMD19-T/Simple中,测序正确后将7个Teto序列亚克隆入pGL3-Basic/Cp... 目的:探讨将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子(Cp)下游后对该启动子在不同细胞系中转录活性的影响。方法:利用PCR从质粒pTL-8中扩增7个Teto序列,并将其克隆入T载体pMD19-T/Simple中,测序正确后将7个Teto序列亚克隆入pGL3-Basic/Cp萤光素酶报告基因质粒中Cp启动子的下游,以构建质粒pGL3-Basic/Cp/x7t。将能表达TetR的质粒pTL-8的萤光素酶编码基因切除后,与pGL3-Basic/Cp/x7t共转染肝癌细胞系HepG2、宫颈癌细胞系HeLa、绿猴肾细胞系COS-7、乳腺癌细胞系MDA-MB-231和结肠癌细胞系HT-29,通过双萤光素酶检测系统检测萤光素酶在这些不同细胞系中的活性,以分析将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子下游后对Cp在不同细胞系中转录活性的影响。结果:构建了质粒pGL3-Basic/Cp/x7t,将其转染HeLa、COS-7、HepG2、MDA-MB-231和HT-29细胞后其相对萤光素酶活性分别为56.14、171.52、211.03、6.11和34.24。结论:将Teto序列克隆入Cp下游并不能明显提高Cp的转录活性,而且破坏了Cp的组织特异性转录活性。 展开更多

关键词 四环素调控系统 核心启动子 乙型肝炎病毒 肝细胞特异性 萤光素酶

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中华眼镜蛇α-神经毒的纯化及其在烟碱型乙酰胆碱受体纯化上的应用 被引量：1

10

作者 李佳 徐江 +6 位作者 林烨 沈佑晓 刘毅 张芳琳 吴兴安 徐志凯 李柱一 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第4期296-300,共5页

目的从中华眼镜蛇粗毒中分离纯化其α-神经毒组分,并将此α-神经毒作为亲和层析的配基纯化烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)。方法采用凝胶过滤层析、阳离子交换层析逐步分离纯化中华眼镜蛇粗毒,通过125I-α-银环蛇毒素(αBtx)-nAChR结合抑制... 目的从中华眼镜蛇粗毒中分离纯化其α-神经毒组分,并将此α-神经毒作为亲和层析的配基纯化烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)。方法采用凝胶过滤层析、阳离子交换层析逐步分离纯化中华眼镜蛇粗毒,通过125I-α-银环蛇毒素(αBtx)-nAChR结合抑制实验检测蛋白活性,SDS-PAGE检测蛋白的相对分子质量和纯度;亲和层析纯化nAChR,放射免疫沉淀法测nAChR活性。结果从5g中华眼镜蛇粗毒中共纯化得到约20mg眼镜蛇α-神经毒,该眼镜蛇α-神经毒有一定的125I-αBtx-nAChR结合抑制活性,其半数抑制浓度(IC50)约为αBtx的28倍。以纯化的α-神经毒制备的亲和介质,可吸附大鼠骨骼肌肌膜提取物中约84%的125I-αBtx结合活性,且此活性可以被0.2mol/L卡巴胆碱洗脱。结论用简单的液相色谱方法可从中华眼镜蛇毒中分离纯化α-神经毒,并且可以以其为配体从大鼠骨骼肌中纯化nAChR。 展开更多

关键词 眼镜蛇神经毒素蛋白质类 受体 层析

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MISⅡR启动子的克隆及其组织特异性鉴定 被引量：1

11

作者 雷俊川 刘忠湘 +1 位作者 赵亚 韩骅 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第11期823-826,共4页

目的克隆苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子(mullerian inhibiting substance typeⅡreceptor promoter,MISⅡRpr)并鉴定其在卵巢器官中的特异性表达活性。方法利用PCR从C57BL/6小鼠基因组中扩增苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子并将其克隆入载... 目的克隆苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子(mullerian inhibiting substance typeⅡreceptor promoter,MISⅡRpr)并鉴定其在卵巢器官中的特异性表达活性。方法利用PCR从C57BL/6小鼠基因组中扩增苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子并将其克隆入载体pMD18-T,测序正确后将其亚克隆入pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体。将重组质粒pGL3-Basic/MISⅡRpr分别转染卵巢癌细胞系SKOV3、HT-8910,宫颈癌细胞系Hela、Si Ha,绿猴肾细胞系COS-7,乳腺癌细胞系MDA-MB-231和结肠癌细胞系HT-29,通过双荧光素酶检测系统检测荧光素酶在上述细胞系中的活性,以确定克隆的苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子是否具有卵巢特异性活性。结果构建的pGL3-Basic/MISⅡRpr质粒用SacⅠ和EcoRⅠ双酶切,片段大小分别为600 bp和1 000 bp,证明MISⅡRpr插入正确。重组质粒转染卵巢细胞系SK-OV3、HT-8910,荧光素酶高表达;对照细胞HT-29等转染后,荧光素酶低表达。结论克隆得到的MISⅡRpr具有明显的卵巢特异性活性。可以利用MISⅡRpr进行相关基因的卵巢特异性表达。 展开更多

关键词 苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子 (MISⅡRpr) 组织特异性 荧光素酶

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Tet-on和Cre/loxP系统双重调控HCV NS5B真核表达载体的设计与构建

12

作者 马玉 赵亚 +7 位作者 孙梦宁 兰海云 吕欣 杨敬 雷迎峰 姚敏 尹文 汪爱勤 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第19期3606-3608,共3页

目的:构建可受Tet-on和Cre/loxP系统双调控的HCV NS5B真核表达载体,为建立可严格调控HCVNS5B蛋白表达的转基因小鼠奠定基础。方法:以真核表达载体pBI-3为载体构建骨架,在其启动子下游依次插入luc报告基因、BGHpA和NS5B基因片段,并分别在... 目的:构建可受Tet-on和Cre/loxP系统双调控的HCV NS5B真核表达载体,为建立可严格调控HCVNS5B蛋白表达的转基因小鼠奠定基础。方法:以真核表达载体pBI-3为载体构建骨架,在其启动子下游依次插入luc报告基因、BGHpA和NS5B基因片段,并分别在luc报告基因上游和BGHpA尾下游引入一个loxP位点。结果:成功构建了可受Tet-on和Cre/loxP系统双调控的HCV NS5B真核表达载体pBI-3/luc-BGHpA-NS5B。结论:pBI-3/luc-BGHpA-NS5B真核表达载体的成功构建为可严格调控HCV NS5B蛋白表达转基因小鼠的建立打下了良好的基础。 展开更多

关键词 HCV NS5B 转基因小鼠 TET-ON Cre/loxP

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