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GLP-1受体激动剂对心血管作用的研究进展 被引量：2
1
作者 柯志强 马倩倩 +3 位作者 李丹 赵辛元 刘超 苏正定 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期426-430,共5页
胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)由肠道内分泌细胞产生。GLP-1受体激动剂(GLP-1 receptor agonists,GLP-1RAs)促进葡萄糖相关的胰岛素分泌和抑制胰高血糖素分泌。GLP-1RAs还能抑制胃排空、食物摄入和限制体质量增加。... 胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)由肠道内分泌细胞产生。GLP-1受体激动剂(GLP-1 receptor agonists,GLP-1RAs)促进葡萄糖相关的胰岛素分泌和抑制胰高血糖素分泌。GLP-1RAs还能抑制胃排空、食物摄入和限制体质量增加。在过去的十年中,GLP-1RAs对心血管系统影响的研究已经取得重大进展。口服小分子GLP-1RAs具有潜在优势,可以提高该类药物的应用。该文综述了GLP-1RAs在心血管疾病治疗中的多种作用,为GLP-1RAs的心血管获益提供新见解。 展开更多
关键词 2型糖尿病 GLP-1 心血管疾病 GLP-1受体激动剂 口服GLP-1受体激动剂 小分子GLP-1受体激动剂
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基于fQRS波构建的列线图模型对急性前壁ST段抬高型心肌梗死PCI术后近期MACE的预测价值 被引量：8
2
作者 孙慧荣 柯志强 +2 位作者 王艺烨 王欢 王曲解 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第7期1255-1260,共6页
目的:构建基于体表心电图的碎裂QRS(fQRS)波列线图模型,评估该模型对急性前壁ST段抬高型心肌梗死行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术病人近期发生主要心脑血管不良事件(MACE)的预测价值。方法:回顾性选取2017年8月—2020年7月于湖北科技学... 目的:构建基于体表心电图的碎裂QRS(fQRS)波列线图模型,评估该模型对急性前壁ST段抬高型心肌梗死行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术病人近期发生主要心脑血管不良事件(MACE)的预测价值。方法:回顾性选取2017年8月—2020年7月于湖北科技学院附属第一医院急诊行PCI术的急性前壁ST段抬高型心肌梗死病人218例的临床资料。根据入院时心电图是否存在fQRS波分为fQRS波组(69例)和非fQRS波组(149例);根据病人PCI术后12个月内是否发生MACE事件分为MACE组(98例)和非MACE组(120例)。采用LASSO与多因素Logistic回归分析法分析fQRS波与急性前壁ST段抬高型心肌梗死PCI术后病人12个月内发生MACE的相关性,并评估其独立危险因素,通过R语言构建基于fQRS波的列线图模型并对该模型进行验证。结果:fQRS波组MACE发生情况较非fQRS波组高(P<0.05)。单因素分析结果显示,MACE组与非MACE组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、左心室收缩末期内径(LVESD)及氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油、心肌肌钙蛋白I(cTnI)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。LASSO结合多因素Logistics回归分析显示,血红蛋白浓度、LVEF与MACE发生呈负相关(P<0.05),NT-proBNP、fQRS波、白细胞计数、三酰甘油与MACE发生呈正相关(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,列线图预测MACE发生风险的曲线下面积(AUC)为0.85,95%CI(0.73,0.91);采用Bootstrap方法重复抽样1000次验证列线图,校准曲线的平均绝对误差为0.019,说明校准曲线与理想曲线贴合良好;且临床决策曲线显示,当MACE的发生阈值为0.08~0.88时该模型图的适用性佳。结论:基于体表心电图的碎裂QRS波构建的列线图模型能较好地预测急性前壁ST段抬高型心肌梗死行PCI术治疗病人近期发生MACE的风险,具有较好的临床适用性。 展开更多
关键词 急性ST段抬高型心肌梗死 心电图 碎裂QRS波 主要心血管不良事件 预后
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一种GLP-1受体激动剂高通量筛选细胞模型
3
作者 王芮 杨紫鑫 +2 位作者 柯志强 成细瑶 苏正定 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1793-1798,共6页
目的构建GLP-1受体激动剂高通量筛选细胞模型。方法构建pEGFP-GLP-1R-3C重组质粒,转染HEK293T细胞,用G418和流式细胞仪进行筛选。所构建的细胞系命名为HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞系。Western blot和激光共聚焦检测GLP-1R-3C-eGFP蛋白... 目的构建GLP-1受体激动剂高通量筛选细胞模型。方法构建pEGFP-GLP-1R-3C重组质粒,转染HEK293T细胞,用G418和流式细胞仪进行筛选。所构建的细胞系命名为HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞系。Western blot和激光共聚焦检测GLP-1R-3C-eGFP蛋白的表达。将环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)响应元件报告基因转染HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞,不同浓度的GLP-1刺激后,用一步法荧光素酶报告基因检测试剂盒检测发光值反映细胞cAMP水平,采用cAMP试剂盒(ELISA)进行验证。结果成功构建HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞系。不同浓度GLP-1刺激后,发光值变化趋势与细胞cAMP水平变化趋势相似。本实验中Z′因子的值为0.52。结论本研究建立了基于重组HEK293T细胞株,其可用于GLP-1受体激动剂高通量筛选。 展开更多
关键词 2型糖尿病 GLP-1 GLP-1受体激动剂 小分子GLP-1受体激动剂 cAMP响应元件 荧光素酶报告基因 Z′因子
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星形胶质细胞U251稳转FOXO1基因细胞系构建及其蛋白互作生物素验证
4
作者 曾挺 郭媛媛 +2 位作者 郭婕妤 刘超 刘武 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期799-800,共2页
蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interactions,PPIs)是细胞生命活动的基础,以BioID和APEX为代表的蛋白质邻近标记技术逐渐被应用于蛋白质相互作用研究[1,2]。由于蛋白的相互作用大多是依靠氢键、盐键和疏水相互作用力进行,它们的空... 蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interactions,PPIs)是细胞生命活动的基础,以BioID和APEX为代表的蛋白质邻近标记技术逐渐被应用于蛋白质相互作用研究[1,2]。由于蛋白的相互作用大多是依靠氢键、盐键和疏水相互作用力进行,它们的空间距离都非常的短,所以通常认为互作的蛋白必定相互邻近[3]。TurboID是一种比BioID或APEX具有更高催化效率的蛋白质(标记时间从18 h缩短至10 min),由于很多蛋白发挥的结合与催化作用是很短暂的,理论上利用这个技术可以找到一些比较新颖的结合蛋白[4]。大量研究表明,FOXO1调控许多靶点,如参与细胞凋亡和自噬的基因、抗氧化酶、细胞周期阻滞基因以及代谢和免疫调节因子[5-6],被认为是一种具有复杂活性的超级转录因子。因此,我们将利用TurboID的高效性来寻找FOXO1的互作蛋白。 展开更多
关键词 FOXO1 TurboID 稳转细胞系 蛋白互作 生物素 银染色法
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西格列汀通过调控自噬和凋亡减轻棕榈酸诱导的心肌细胞损伤 被引量：6
5
作者 尧青 赵辛元 +1 位作者 李丹 柯志强 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2021年第23期2423-2427,共5页
目的:观察西格列汀是否通过调节心肌细胞自噬来减轻棕榈酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡。方法:棕榈酸和西格列汀处理H9c2细胞24 h后,CCK-8试剂盒检测细胞存活率;共聚焦和Western blotting检测自噬标志蛋白LC3的表达情况;TUNEL试剂盒检测细胞... 目的:观察西格列汀是否通过调节心肌细胞自噬来减轻棕榈酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡。方法:棕榈酸和西格列汀处理H9c2细胞24 h后,CCK-8试剂盒检测细胞存活率;共聚焦和Western blotting检测自噬标志蛋白LC3的表达情况;TUNEL试剂盒检测细胞凋亡情况;Western blotting分析凋亡相关蛋白C-Casp3、C-PARP和Cyt C以及相关调控因子AMPK和mTOR等的表达。结果:棕榈酸抑制H9c2细胞活性,减少LC3的蛋白表达,增加TUNEL阳性的凋亡细胞比率,增加凋亡相关蛋白的表达,抑制AMPK的磷酸化;而西格列汀可抑制PA对H9c2的这些作用,促进LC3蛋白表达,减少凋亡蛋白表达和凋亡细胞比率,增加AMPK的磷酸化。结论:本研究显示西格列汀可能通过促进自噬和减轻细胞凋亡来对抗棕榈酸诱导的细胞损伤,且这种作用可能是通过AMPK信号通路介导的。 展开更多
关键词 西格列汀 凋亡 自噬 AMPK 心肌细胞
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GIPR在棕色脂肪细胞分化中的表达及功能分析 被引量：2
6
作者 李广森 戴婧 +5 位作者 李吉 蔡莉 柯孟婷 李杨 孙家忠 刘超 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期857-861,共5页
采用葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽（ GIP）干预诱导分化成熟的棕色脂肪细胞,以Western印迹分析GIP受体（GIPR）、解耦联蛋白1（UCP-1）、cAMP反应元件结合蛋白（CREB）等的蛋白表达,ELISA检测细胞内cAMP浓度变化。结果显示,分离培养的大... 采用葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽（ GIP）干预诱导分化成熟的棕色脂肪细胞,以Western印迹分析GIP受体（GIPR）、解耦联蛋白1（UCP-1）、cAMP反应元件结合蛋白（CREB）等的蛋白表达,ELISA检测细胞内cAMP浓度变化。结果显示,分离培养的大鼠脂肪细胞光镜下呈典型棕色脂肪细胞形态,油红O染色可见细胞内大量脂滴聚集；免疫组化检测可见细胞内UCP-1表达；在棕色脂肪细胞分化后期GIPR mRNA表达量呈上升趋势,免疫组化检测可见棕色脂肪细胞内GIPR蛋白表达。1和100 nmol/L的GIP显著升高棕色脂肪细胞GIPR、UCP-1和CREB的蛋白表达,10 nmol/L时明显降低；各种浓度GIP干预24 h后棕色脂肪细胞内cAMP浓度均显著升高（P〈0.05）。结果提示GIPR可能参与棕色脂肪细胞的分化。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 棕色脂肪细胞 葡萄糖依耐性胰岛素释放多肽受体 DIABETES mellitus type 2
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应用pCMV3-MdmX-RFP表达载体建立H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)稳转细胞系
7
作者 周婷 李丹 +3 位作者 王芮 宋士奎 柯志强 苏正定 《生物技术》 CAS 2023年第6期683-688,696,共7页
[目的]探索应用pCMV3-MdmX-RFP表达载体构建H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)稳转细胞系。[方法]用KpnⅠ和NotⅠ双酶切后连接,构建pCMV3-MdmX-RFP表达载体并测序。重组质粒转染H1299p53R^(2)13X细胞,用100μg/mL的潮霉素B筛选2 w。将筛选出的... [目的]探索应用pCMV3-MdmX-RFP表达载体构建H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)稳转细胞系。[方法]用KpnⅠ和NotⅠ双酶切后连接,构建pCMV3-MdmX-RFP表达载体并测序。重组质粒转染H1299p53R^(2)13X细胞,用100μg/mL的潮霉素B筛选2 w。将筛选出的细胞无限稀释后分到96孔板中,每孔一个单细胞,并扩增成单细胞群,选出荧光较强的3个细胞克隆(C1、C2和B4)采用Western Blotting和基因组PCR验证。将建立的稳定细胞系命名为H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)细胞系,用荧光显微镜观察稳转细胞系的第10代细胞,并用Western Blotting检测MdmX-RFP蛋白的表达情况。G418处理H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)细胞后,Western Blotting检测全长p53(full-length p53,FL-p53)和截断的p53(Truncated p53,TR-p53)蛋白表达水平。[结果]测序结果显示,重组质粒pCMV3-MdmX-RFP与数据库中的基因序列相同。稳定细胞系中MdmX-RFP蛋白的高表达,在第10代仍然如此。与对照组相比,用G418处理H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)细胞后,FL-p53蛋白水平升高1.6±0.12倍(P<0.05),TR-p53蛋白水平升高3±0.17倍(P<0.01)。[结论]构建的H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)稳转细胞系过表达效率高,可直接用于后续实验。 展开更多
关键词 H1299 P53 MDMX G418 潮霉素B 稳转细胞系
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