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乙肝免疫球蛋白抗体的多样性 被引量：1
1
作者 周世权 周吉航 +4 位作者 徐岳军 庄晓玲 李翊卫 李世波 刘晓光 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期479-484,共6页
目的基于重链可变区的编码基因序列对乙肝免疫球蛋白(HBIG)中的IgG抗体进行分类。方法借用文献提供的引物,以HBsAb强阳性健康个体外周血中的总RNA为模板进行RT-PCR和Nested-PCR扩增,通过将产物克隆到T载体、随机挑选测序,分析并统计出... 目的基于重链可变区的编码基因序列对乙肝免疫球蛋白(HBIG)中的IgG抗体进行分类。方法借用文献提供的引物,以HBsAb强阳性健康个体外周血中的总RNA为模板进行RT-PCR和Nested-PCR扩增,通过将产物克隆到T载体、随机挑选测序,分析并统计出插入子的VH-D-JH-Cγ组合方式。结果共获得56个有效克隆,全部为人VH3-D-JH-Cγ序列,可分成49种序列,其中5种序列有2或3个序列完全相同的克隆。4个Cγ功能基因也全部出现,其中IGHG2频率最高(28次);23个VH3功能基因有11个出现,其中频率最高的是IGHV3-23(29次);23个D功能基因有16个出现,其中频率最高的是IGHD1-26(8次);6个JH功能基因则全部出现,其中频率最高的是IGHJ4(33次)。VH3-D-JH组合有33种,频率最高的是IGHV3-23/IGHD1-26/IGHJ4(8次),其中5种与IGHG2拼接,但这5种VH3-D-JH-Cγ2序列仍有明显的差异。结论成功地从HBsAb强阳性健康个体外周血中克隆到由VH3亚家族参与重排的IgG重链可变区序列;初步证实可变区序列不仅在VH3-D-JH-Cγ组合方式上具有极大的多样性,而且在序列上也具有明显的差异性;基于可变区测序对IgG抗体或B细胞进行分类是可行的,但需大大提高挑取克隆的数量或改用新一代大规模测序技术。 展开更多
关键词 乙肝免疫球蛋白 重链 可变区 反转录一聚合酶链反应 DNA测序 人
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从兔外周血直接克隆B细胞κ轻链的可变区 被引量：1
2
作者 周吉航 周世权 +3 位作者 王晔恺 曾芳 马利娜 刘晓光 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期479-483,共5页
目的从兔外周血总RNA中直接扩增出B细胞κ轻链的可变区序列。方法首先从IMGT/GENE-DB数据库中获取大耳白兔Ig胚系基因Vκ(IGKV)、Jκ(IGKJ)和Cκ(IGKC)的cDNA序列、设计引物,然后以非免疫兔外周血总RNA为模板进行RT-PCR扩增,回收产物并... 目的从兔外周血总RNA中直接扩增出B细胞κ轻链的可变区序列。方法首先从IMGT/GENE-DB数据库中获取大耳白兔Ig胚系基因Vκ(IGKV)、Jκ(IGKJ)和Cκ(IGKC)的cDNA序列、设计引物,然后以非免疫兔外周血总RNA为模板进行RT-PCR扩增,回收产物并克隆到T载体,随机挑选单克隆测序,最终将序列提交到IMGT/V-QUEST,分析出每个克隆的Vκ-Jκ组合,并利用BioEdit的本地Blast程序比较出Cκ的基因型。结果共设计出4对引物,其中引物对RK.C1[4-5-9]无产物,引物对RK.C1[1-2-7]、RK.C1[3-6-8]和RK.C2[1-2-3-4]有产物,分别回收、克隆到T载体后各挑取20个克隆,共获得51个克隆的插入子序列。没有任何2个克隆的插入子序列完全相同,每个克隆均包含完整的兔Vκ、Jκ及Cκ的5’端序列,其中Vκ-Jκ-IGKC1组合的克隆33个,Vκ-Jκ-IGKC2组合的克隆18个;68个Vκ胚系基因中有22个出现,其中频率最高的是IGKV1S10*01(12次),其次是IGKV1S36*01、IGKV1S37*01和IGKV1S4*01(各5次),其余均为3次以下;8个Jκ胚系基因中只有1个出现,为IGKJ1-2*01;2个Cκ基因的等位基因分别为IGKC1*01和IGKC2*03。33个Vκ-[IGKJ1-2*01]-[IGKC1*01]克隆中有17种不同的组合方式,其中频率最高的为[IGKV1S10*01]-[IGKJ1-2*01]-[IGKC1*01](7次)。18个Vκ-[IGKJ1-2*01]-[IGKC2*03]克隆中有11种不同的组合方式,频率最高的为[IGKV1S10*01]-[IGKJ1-2*01]-[IGKC2*03](5次)。Vκ-Jκ-Cκ组合方式相同的克隆,序列仍具有明显的差异。结论利用自行设计的兼并引物,成功并特异地从兔外周血总RNA中直接扩增出了κ轻链的可变区,且产物具有良好的多样性,但所有Vκ-Jκ-Cκ组合中只出现了1种Jκ基因。 展开更多
关键词 外周血 免疫球蛋白 轻链 可变区 反转录聚合酶链式反应 兔
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从兔外周血直接克隆IgG重链可变区 被引量：1
3
作者 周世权 廖智 +2 位作者 杨林 周吉航 刘晓光 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期762-766,共5页
目的从兔外周血总RNA中直接扩增出IgG重链可变区基因。方法先从IMGT/GENE-DB数据库中获取编码大耳白兔免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)的3个胚系基因片段VH(IGHV)、D(IGHD)和JH(IGHJ),以及编码γ重链恒定区(CH)基因Cγ(IGHG)的cDNA序列,... 目的从兔外周血总RNA中直接扩增出IgG重链可变区基因。方法先从IMGT/GENE-DB数据库中获取编码大耳白兔免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)的3个胚系基因片段VH(IGHV)、D(IGHD)和JH(IGHJ),以及编码γ重链恒定区(CH)基因Cγ(IGHG)的cDNA序列,然后设计嵌套引物,以兔外周血总RNA为模板,进行RT-PCR和Nested-PCR扩增,产物经胶回收后克隆到T载体,随机挑选白色克隆测序,最后将序列用Bioedit软件的Local Blast功能比对出Cγ的基因型,同时提交到IMGT/V-QUEST分析出所属的VH、D和JH胚系基因。结果获得25个克隆的插入子序列,每个克隆均为兔IgG重链可变区的编码基因,且包含了完整的VH、D、JH胚系基因片段,以及Cγ基因第1个外显子(CH1)序列的5’端部分,但没有任何2个克隆的序列完全相同。37个IGHV功能基因出现了2个;11个IGHD功能基因出现了8个;11个IGHJ功能基因出现了4个。VH-D-JH组合方式共出现18种,即使VH-D-JH组合方式相同,序列仍具有明显的差异。结论从兔外周血总RNA中直接扩增出了IgG重链可变区,自行设计的引物显示出了高度的特异性和良好的兼并性。 展开更多
关键词 外周血 免疫球蛋白 重链 可变区 反转录-聚合酶链反应 序列分析 兔
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舟山群岛嵊山镇渔民甲状腺健康状况和碘摄入量的流行病学调查 被引量：2
4
作者 周世权 王晔恺 +5 位作者 竺王玉 胡晓斐 郑笑娟 赵臣银 刘晓光 张永奎 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2011年第6期354-357,共4页
[目的]调查全民食盐加碘计划后舟山群岛嵊山镇渔民甲状腺健康的现状和碘摄入水平。并分析可能的影响因素。[方法]对社区362名渔民进行甲状腺健康普查，内容包括调查问卷和体格检查，甲状腺B超和血清促甲状腺素（TSH）、游离三碘甲状腺... [目的]调查全民食盐加碘计划后舟山群岛嵊山镇渔民甲状腺健康的现状和碘摄入水平。并分析可能的影响因素。[方法]对社区362名渔民进行甲状腺健康普查，内容包括调查问卷和体格检查，甲状腺B超和血清促甲状腺素（TSH）、游离三碘甲状腺原氨酸（隅）、游离甲状腺素（FT4）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）检测以及尿碘测定。尿碘水平的组间比较采用非参数检验，甲状腺异常的影响因素分析采用logistie回归。[结果]362名渔民中甲状腺B超异常率为40．3％（146／362），TPOAb阳性率为9．7％（35／362），甲状腺功能异常率为3．3％（12／362），合并后总甲状腺异常率44．5％（161／362）。碘盐覆盖率为86．7％（314／362），尿碘中位数为193．6μg/L，男性、食碘盐、肥胖组的尿碘水平较高（x2=5．459，P〈0．05；x2=7．05），P〈0．01；x2=7．725，P〈0．05），但甲状腺异常与否其尿碘水平差异元统计学意义（x2=0．110，P〉0．05）。甲状腺异常的危险因素有年龄大和高舒张压，OR值分别为1．266（95％CI：1．001-1．600）和6．066（95％CI：2．176-16．909）；而男性则为甲状腺异常的保护性因素，其OR值为0．442（95％CI：0．282～0．694）.[结论]嵊山镇渔民的碘摄入量处于WHO推荐的“适宜”范围，但甲状腺异常率较高。碘盐、性别、肥胖程度对碘摄入量有影响；年龄大、女性和高舒张压可能是影响嵊山镇渔民甲状腺健康的影响因素。 展开更多
关键词 甲状腺 碘 流行病学
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非小细胞肺癌Stathmin mRNA的表达及临床意义
5
作者 周世权 周吉航 +4 位作者 刘晓光 曾芳 王晔恺 陈冬冬 乐涵波 《浙江医学》 CAS 2011年第9期1285-1288,共4页
目的 探讨Stathmin mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.方法 成对收集非小细胞肺癌手术切除的癌和癌旁组织,抽提总RNA,利用半定量RT-PCR技术检测Stathmin mRNA的表达,对其与临床病理指标的关系进行统计学分析.结果 共收集癌和癌旁组... 目的 探讨Stathmin mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.方法 成对收集非小细胞肺癌手术切除的癌和癌旁组织,抽提总RNA,利用半定量RT-PCR技术检测Stathmin mRNA的表达,对其与临床病理指标的关系进行统计学分析.结果 共收集癌和癌旁组织43对,癌组织中Stathmin mRNA表达的阳性率为76.7%,癌旁组织中为60.5%,癌组织的Stathmin相对表达量明显高于癌旁组织（Z=5.359,P=0.000）;无论是癌还是癌旁组织,男性中Stathmin的相对表达量明显高于女性（χ^2=5.059、5.799,P=0.024、0.016）.癌组织中,鳞癌中Stathmin的相对表达量高于腺癌（χ^2=5.821,P=0.016）、中央型明显高于周围型（χ^2=4.308,P=0.038）.结论 非小细胞肺癌中Stathmin mRNA的表达具有较高的阳性率,其中鳞癌、中央型肺癌和男性患者中增高最明显. 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 STATHMIN MRNA
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泡膜蛋白1在非小细胞肺癌组织中的表达及其预后价值 被引量：9
6
作者 周世权 周吉航 +3 位作者 邓涛 曾芳 王晔恺 刘晓光 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第40期2828-2831,共4页
目的探讨泡膜蛋白1（VMP1）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其预后价值。方法收集NSCLC组织蜡块78例并进行随访，订制兔抗人VMP1抗体并通过免疫组化检测VMP1蛋白的表达，分析其与临床病理指标、术后生存率的关系。结果VMP1只表达于... 目的探讨泡膜蛋白1（VMP1）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其预后价值。方法收集NSCLC组织蜡块78例并进行随访，订制兔抗人VMP1抗体并通过免疫组化检测VMP1蛋白的表达，分析其与临床病理指标、术后生存率的关系。结果VMP1只表达于肿瘤细胞且定位于胞质，阳性率为35．9％（28／78），VMP1表达与临床分期关系密切，分期越晚，阳性率越高（χ^2=6．829，P〈0．05），但号陛别、年龄、组织类型、大体类型和分化程度等均无关（P〉0．05）。患者术后1年和3年的累积生存率分别为94．9％和66．3％，平均生存期为37．2个月（95％CI：33．7～40．8）。VMP1表达对生存曲线分布有影响，其中阳性者预后较差（χ^2=6．192，P〈0．05），平均生存期仅为29．0个月（95％CI：25．0～33．0）；VMP1表达和临床分期是影响患者术后生存的危险因素（P〈0．05）。结论NSCLC组织中VMP1的表达具有较好的预后价值，VMP1阳性提示预后不良。 展开更多
关键词 癌 非小细胞肺 膜蛋白质类 自噬 预后
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癌蛋白18表达与肺癌抗微管化疗的关系 被引量：1
7
作者 乐涵波 张永奎 +4 位作者 周吉航 陈志军 张斌杰 刘晓光 周世权 《中华胸心血管外科杂志》 CSCD 北大核心 2011年第12期738-741,共4页
目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中癌蛋白18（stathmin）的表达对抗微管化疗效果的影响。方法收集78例NSCLC患者肺组织蜡块并随访，通过免疫组化检测stathmin蛋白的表达，分析其与临床病理指标及抗微管化疗效果的关系。结果Stathmin... 目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中癌蛋白18（stathmin）的表达对抗微管化疗效果的影响。方法收集78例NSCLC患者肺组织蜡块并随访，通过免疫组化检测stathmin蛋白的表达，分析其与临床病理指标及抗微管化疗效果的关系。结果Stathmin只表达于肿瘤细胞且定位于胞浆，阳性率51．3％（40／78例），其中男性、中央型、累及胸膜和死亡患者的阳性率较高（P〈0．05），在年龄、分化程度、淋巴结转移和临床分期等分组中差异不明显。Stathmin的表达对生存曲线的分布有影响，阴性者预后较好（X2=4．348，P〈0．05）。不同化疗方案与未化疗组生存曲线的分布差异无统计学意义。Stath—min阴性者采用长春碱方案生存期较短，但差异无统计学意义（P=0．06）；阳性者中长春碱方案和紫杉醇方案差异无统计学意义。分化程度、淋巴结转移和stathmin表达是影响患者术后生存期的危险因素（P〈0．05）。结论通过免疫组化检测NSCLC手术切除标本中stathmin的表达对患者的预后估计有一定的价值，其中stathmin阴性者预后较好，但对抗微管化疗药物的选择意义不大。分化程度高、无淋巴结转移、stathmin阴性患者的预后较好。 展开更多
关键词 癌 非小细胞肺 癌蛋白18 化学疗法 辅助 预后
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