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基因融合技术及其应用 被引量：1
1
作者 刘苗 沈立新 段康民 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第2期94-96,共3页
随着基因组学的发展和完善，进而推动了科学家们对后基因组学的研究.基因融合技术作为一种快速、便捷的研究方法，已被广泛的应用于分子生物学，研究基因的转录调控、表达及功能.该文主要概述了基因融合技术的原理、近年来使用的技术方... 随着基因组学的发展和完善，进而推动了科学家们对后基因组学的研究.基因融合技术作为一种快速、便捷的研究方法，已被广泛的应用于分子生物学，研究基因的转录调控、表达及功能.该文主要概述了基因融合技术的原理、近年来使用的技术方法和特点，以及在分子生物学中的主要应用. 展开更多
关键词 基因融合 接头序列 融合蛋白
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铜绿假单胞菌铁与群体感应系统的调节 被引量：3
2
作者 卫阳 张亚妮 段康民 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期828-832,共5页
目的分析总结铜绿假单胞菌铁调节机理及其与群体感应系统之间的调节关系。方法汇总实验室有关铁调节和群体感应系统的研究结果,并结合相关文献资料进行分析总结。结果铜绿假单胞菌可以通过多种途径吸收利用不同来源或状态的铁源,在各种... 目的分析总结铜绿假单胞菌铁调节机理及其与群体感应系统之间的调节关系。方法汇总实验室有关铁调节和群体感应系统的研究结果,并结合相关文献资料进行分析总结。结果铜绿假单胞菌可以通过多种途径吸收利用不同来源或状态的铁源,在各种铁吸收途径中以铁载体介导途径尤为重要。Fur蛋白作为调节中心,与小RNA和ECF sigma因子共同对铁平衡进行精巧调节,而铁调节和群体感应系统相互影响,共同调节着相关基因的表达。结论铜绿假单胞菌中铁和群体感应系统协同作用,形成一个复杂的全局性网络,调节菌体毒性因子的表达等多种生理过程,影响着细菌感染的进程。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 群体感应 铁调节 毒性因子 信号分子 铁吸收调节子 小RNA
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铜绿假单胞菌中新型的β内酰胺酶介导的羧苄青霉素抗性
3
作者 董萌萌 梁清清 +2 位作者 张会群 郭子晟 陈林 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期841-846,共6页
为了探究铜绿假单胞菌抗羧苄青霉素的机制,通过基因敲除以及克拉维酸钾和羧苄青霉素协同实验对羧苄青霉素抗性菌株进行研究。在对羧苄青霉素具有抗性的转座突变体基础上敲除amp C后,其对羧苄青霉素抗性没有变化;8株羧苄青霉素抗性转座... 为了探究铜绿假单胞菌抗羧苄青霉素的机制,通过基因敲除以及克拉维酸钾和羧苄青霉素协同实验对羧苄青霉素抗性菌株进行研究。在对羧苄青霉素具有抗性的转座突变体基础上敲除amp C后,其对羧苄青霉素抗性没有变化;8株羧苄青霉素抗性转座突变体菌株克拉维酸钾协同实验呈阳性。基因组中预测为β内酰胺酶的PA5514基因的敲除突变菌株及过表达菌株对氨苄青霉素以及羧苄青霉素的敏感性也没有变化。结果说明amp C及PA5514表达升高并不是羧苄青霉素抗性转座突变体抗性产生的原因,基因组中存在新的受克拉维酸钾抑制的β内酰胺酶可能是铜绿假单胞菌抗羧苄青霉素的一种新机制。同时,克拉维酸钾与羧苄青霉素联合使用能够提高羧苄青霉素对铜绿假单胞菌抗性菌株的治疗效果。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 羧苄青霉素 Β内酰胺酶 克拉维酸钾
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铜绿假单胞菌多重耐药基因的筛选及鉴定 被引量：4
4
作者 赵兴艳 梁海华 +2 位作者 沈立新 董兆麟 段康民 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1019-1024,共6页
【目的】研究铜绿假单胞菌中与耐药性相关的基因。【方法】筛选转座突变体文库中对多种抗菌药物敏感的突变体,通过随机PCR、核苷酸测序及序列比对确定突变体中转座子的插入位点及其破坏的基因。【结果】筛选得到2株对多种抗菌药物敏感... 【目的】研究铜绿假单胞菌中与耐药性相关的基因。【方法】筛选转座突变体文库中对多种抗菌药物敏感的突变体,通过随机PCR、核苷酸测序及序列比对确定突变体中转座子的插入位点及其破坏的基因。【结果】筛选得到2株对多种抗菌药物敏感的突变体,其中被破坏的基因分别为功能未知的新基因PA2580和PA2800。【结论】PA2580和PA2800可能分别通过参与细胞氧化还原作用和细胞壁合成进而与铜绿假单胞菌耐药性相关。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 转座突变 多重耐药性
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铜绿假单胞菌中Ⅲ型分泌系统受Rhl和PQS群体感应系统调节 被引量：10
5
作者 孔伟娜 梁海华 +1 位作者 沈立新 段康民 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1158-1164,共7页
【目的】研究铜绿假单胞菌中群体感应系统(quorum sensing,QS)与Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)间的关系。【方法】通过基因敲除的方法破坏铜绿假单胞菌QS系统相关基因,将T3SS相关基因exoS、exoY、exoT、exsD-pscA-L启动... 【目的】研究铜绿假单胞菌中群体感应系统(quorum sensing,QS)与Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)间的关系。【方法】通过基因敲除的方法破坏铜绿假单胞菌QS系统相关基因,将T3SS相关基因exoS、exoY、exoT、exsD-pscA-L启动子-报道子luxCDABE融合体整合到野生型菌株及QS系统突变菌株的染色体组上,通过检测启动子活性,比较这些基因在不同菌株中的表达情况。【结果】研究结果表明,T3SS中的exoS与exoT在pqsR基因突变体中的表达有明显的增强,Rhl系统对这四种基因的表达具有抑制作用,而Las系统存在与否对T3SS基本没有影响。【结论】铜绿假单胞菌中的Rhl系统和喹诺酮信号(Pseudomonas quinolone signal,PQS)系统对T3SS相关基因的表达具有重要的调节作用。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 群体感应系统 Ⅲ型分泌系统 基因敲除 整合
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PA2580基因与铜绿假单胞菌环境压力耐受性相关
6
作者 赵琳 李娟 +2 位作者 陈林 沈立新 段康民 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1419-1428,共10页
【目的】研究铜绿假单胞菌PAO1 PA2580基因的功能。【方法】构建了PA2580的敲除突变体及突变体互补体,通过最小抑制浓度测定、基因启动子活性检测、蛋白体外表达纯化等方法,对PA2580基因的功能进行了深入的研究。【结果】PA2580突变体... 【目的】研究铜绿假单胞菌PAO1 PA2580基因的功能。【方法】构建了PA2580的敲除突变体及突变体互补体,通过最小抑制浓度测定、基因启动子活性检测、蛋白体外表达纯化等方法,对PA2580基因的功能进行了深入的研究。【结果】PA2580突变体对羧苄青霉素、氯霉素、环丙沙星的敏感性增强。PA2580基因的表达还受到不同种类的低于抑制浓度的抗生素的调节。PA2580蛋白产物以NADPH为电子供体,能够高效还原多种醌类物质。此外,PA2580突变体对过氧化氢敏感性增加,过氧化氢酶编码基因在PA2580突变体中的表达降低,表明PA2580与铜绿假单胞菌氧化压力耐受性相关。【结论】PA2580产物是NADPH-醌类的还原酶,其功能与铜绿假单胞菌对环境压力的耐受密切相关。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 PA2580 压力耐受 NADPH-醌类还原酶
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