贵州优异白肉火龙果B7的离体快繁技术研究 被引量：8

1

作者 刘小翠 文晓鹏 +1 位作者 夏道强 乔光 《种子》 北大核心 2017年第1期121-124,共4页

贵州优异白肉火龙果B 7具有较强的抗寒性,适宜在喀斯特地区推广种植。本研究以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA、IAA、IBA、KT、ZT和TDZ,优化最佳增殖、生根培养基,建立并优化火龙果的离体快繁体系,为工厂化育苗奠定基础。结果... 贵州优异白肉火龙果B 7具有较强的抗寒性,适宜在喀斯特地区推广种植。本研究以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA、IAA、IBA、KT、ZT和TDZ,优化最佳增殖、生根培养基,建立并优化火龙果的离体快繁体系,为工厂化育苗奠定基础。结果表明:最优增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L,平均增殖系数为4.6,增殖苗健壮,长势好;最适生根培养基为MS+IBA 1.5mg/L,根长势较好,平均生根系数为7.6;经炼苗移栽后,成活率达96%。 展开更多

关键词 火龙果 组织培养 快速繁殖

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贵州黑糯稻半矮秆突变体bgsd-2的鉴选及性状表现 被引量：2

2

作者 曾晓芳 廖宣峰 赵德刚 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2014年第5期1-6,共6页

为增加黑糯种质材料,以甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理的贵州地方稻种平塘黑糯得到的半矮秆突变体,并对突变体相关性状进行观察测定。结果表明:1)筛选的黑糯稻半矮秆突变体bgsd-2株高为65.20cm、剑叶长22.24cm、总穗粒数166粒、有效粒数147... 为增加黑糯种质材料,以甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理的贵州地方稻种平塘黑糯得到的半矮秆突变体,并对突变体相关性状进行观察测定。结果表明:1)筛选的黑糯稻半矮秆突变体bgsd-2株高为65.20cm、剑叶长22.24cm、总穗粒数166粒、有效粒数147粒,与平塘黑糯差异极显著;千粒重25.76g,与平塘黑糯差异显著;其余性状两者无显著性差异。2)突变体bgsd-2对外源GA敏感,微管免疫荧光定位检测发现外源GA3能恢复突变体bgsd-2根尖倾斜排列的微管至平塘黑糯排列方式。3)突变体bgsd-2与9311、平塘黑糯杂交的F1代均表现为高秆,显示bgsd-2为隐性突变体。 展开更多

关键词 水稻 半矮秆 突变体 贵州

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ChIFN-γ酿酒酵母工程菌粉的毒性与营养分析

3

作者 刘宗 宋莉 赵德刚 《山地农业生物学报》 2015年第3期14-18,30,共6页

从感官特性、微生物和重金属含量及营养成分等方面,对具有抗禽病毒活性的Ch IFN-γ酿酒酵母工程菌粉进行毒性和营养品质分析。结果表明,Ch IFN-γ酿酒酵母工程菌粉具有酵母的正常特性,含水量低,复水后活细胞率高;其细菌、霉菌、铅和总... 从感官特性、微生物和重金属含量及营养成分等方面,对具有抗禽病毒活性的Ch IFN-γ酿酒酵母工程菌粉进行毒性和营养品质分析。结果表明,Ch IFN-γ酿酒酵母工程菌粉具有酵母的正常特性,含水量低,复水后活细胞率高;其细菌、霉菌、铅和总砷含量均符合国标卫生学要求。工程菌粉的灰分、总糖、总磷和总钙含量高于野生型菌粉,粗脂肪含量与野生型菌粉接近,但粗蛋白质和粗纤维含量显著低于野生型菌粉;工程菌粉的总必需氨基酸和总非必需氨基酸含量较高,赖氨酸、甲硫氨酸和亮氨酸3种必需氨基酸的含量高于野生型菌粉;第一限制性氨基酸为苯丙氨酸+酪氨酸,第二限制性氨基酸为缬氨酸。工程菌粉的蛋白模式不符合蛋白质饲料要求。 展开更多

关键词 酿酒酵母工程菌 鸡γ干扰素 毒性 营养分析

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不同种源马尾松幼苗对低磷胁迫的生理响应 被引量：17

4

作者 乔光 崔博文 +1 位作者 文晓鹏 丁贵杰 《种子》 北大核心 2017年第8期32-36,41,共6页

对四川眉山(SM)、贵州孟关(GM)、广西桐棉(GT)、福建龙岩(FL)、福建武平(FW)、江西崇义(JC)及湖南汝城(HR)等7个种源的马尾松幼苗在轻度、中度和重度低磷胁迫下生理生化响应进行了研究。结果表明,在低磷胁迫下,不同种源马尾松幼苗叶绿素... 对四川眉山(SM)、贵州孟关(GM)、广西桐棉(GT)、福建龙岩(FL)、福建武平(FW)、江西崇义(JC)及湖南汝城(HR)等7个种源的马尾松幼苗在轻度、中度和重度低磷胁迫下生理生化响应进行了研究。结果表明,在低磷胁迫下,不同种源马尾松幼苗叶绿素(a+b)含量呈下降趋势,其中FW下降幅度最大(65.0%),FL降幅最小(20.5%),而类胡萝卜素含量在低磷胁迫下变化较小;随低磷胁迫程度的增加,整体上马尾松幼苗可溶性糖含量逐渐增加,可溶性蛋白含量逐渐减少,游离脯氨酸含量则变化较复杂。其中,在重度低磷胁迫下,GT可溶性糖含量增加最大,较对照增加了38.9%,GM种源可溶性蛋白含量降幅最大,降低了49.5%,FW种源脯氨酸含量增加最大,为对照处理的3.5倍;MDA含量、POD、SOD及CAT活性等均在低磷胁迫下呈上升趋势,其中,SM种质在不同低磷胁迫间MDA含量无显著差异。除GT、JC及HR外,其余种源马尾松在轻度和中度低磷胁迫下根系活力上升。以上结果表明,马尾松通过降低叶绿素和可溶性蛋白含量以及根系活力,增加MDA、可溶性糖和游离脯氨酸含量,提高POD、SOD、CAT活性来应对低磷胁迫。 展开更多

关键词 马尾松 低磷胁迫 生理响应

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从江香猪IFN-β基因的序列分析及原核表达 被引量：6

5

作者 温贵兰 张升波 +6 位作者 李昌红 徐丽 田浪 文明 王开功 程振涛 赵德刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期10-19,共10页

试验旨在探明从江香猪β-干扰素(interferon-beta,IFN-β)基因编码区分子序列及原核表达产物特征。以从江香猪为研究对象,提取肝脏总RNA并反转录为cDNA,设计特异性引物扩增IFN-β基因编码区,将目的基因片段克隆至原核表达质粒pET-28a上... 试验旨在探明从江香猪β-干扰素(interferon-beta,IFN-β)基因编码区分子序列及原核表达产物特征。以从江香猪为研究对象,提取肝脏总RNA并反转录为cDNA,设计特异性引物扩增IFN-β基因编码区,将目的基因片段克隆至原核表达质粒pET-28a上,获得重组质粒pET28a-CJpoIFN-β,并利用生物学软件对江香猪IFN-β基因编码区进行序列分析;将鉴定正确的重组质粒pET28a-CJpoIFN-β转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE与Western blotting分析原核表达蛋白。结果表明,从江香猪IFN-β基因编码区长为561bp,编码186个氨基酸;该蛋白为分泌性蛋白,前21个氨基酸为信号肽序列;二级结构主要以α-螺旋(77.42%)和无规则卷曲(17.74%)为主。从江香猪与其他猪源IFN-β基因核苷酸序列同源性为99.5%～100.0%,与禽的同源性最低(35.2%);从江香猪与巴马猪、梅山猪IFN-β氨基酸同源性均为100.0%,但与贵州白香猪IFN-β同源性为99.5%,存在E43Q、K73R和C161R3处氨基酸的差异。Western blotting结果显示,带His标签的重组表达蛋白能被His单抗识别,条带大小约为24ku。本试验结果为进一步研究IFN-β基因生物学活性及加快从江香猪这一品种资源的有效利用提供参考依据。 展开更多

关键词 从江香猪 IFN-β基因 序列分析 原核表达

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木豆抗旱相关基因CcGST1克隆与表达分析 被引量：6

6

作者 乔光 文晓鹏 洪怡 《西南林业大学学报（自然科学）》 CAS 北大核心 2017年第4期1-7,共7页

为探讨谷胱甘肽转移酶(GST)的抗逆机理,克隆木豆中的抗旱谷胱甘肽转移酶基因,基于木豆干旱胁迫c DNA文库中1个GST基因相关的EST片段,利用RACE技术从木豆幼苗中克隆了该基因,命名为CcGST1,研究其在不同组织及不同干旱时期的表达特性。结... 为探讨谷胱甘肽转移酶(GST)的抗逆机理,克隆木豆中的抗旱谷胱甘肽转移酶基因,基于木豆干旱胁迫c DNA文库中1个GST基因相关的EST片段,利用RACE技术从木豆幼苗中克隆了该基因,命名为CcGST1,研究其在不同组织及不同干旱时期的表达特性。结果表明:该基因含1个669 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸残基,含有保守的谷胱甘肽-S-转移酶的N端和C端结构域;系统进化树分析结果表明木豆CcGST1与大豆、宽叶菜豆等豆科植物的GST亲缘关系较近;亚细胞定位预测CcGST1蛋白可能定位于叶绿体;荧光定量PCR分析表明,CcGST1在木豆幼苗根、茎和叶中均有表达,但根中的表达水平最高,同时该基因受干旱胁迫诱导表达。据此推测木豆CcGST1基因可能与木豆应激干旱胁迫相关。 展开更多

关键词 木豆 谷胱甘肽转移酶 克隆 基因 生物信息学 表达分析

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火龙果MSAP体系的优化及组培苗DNA甲基化检测 被引量：3

7

作者 刘鹏飞 乔光 +3 位作者 刘涛 彭志军 蔡永强 文晓鹏 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期34-40,共7页

以火龙果组培苗为材料,采用正交实验设计,优化了适用于火龙果的MSAP体系.结果表明,基因组DNA约300ng,采用EcoRI 10U和MspI/HpaII 2.5U两步酶切法,酶切较充分;使用20μL预扩增体系,含酶连产物1.0μL,Mix 10μL,上下游引物E+A/HM+T各2.0... 以火龙果组培苗为材料,采用正交实验设计,优化了适用于火龙果的MSAP体系.结果表明,基因组DNA约300ng,采用EcoRI 10U和MspI/HpaII 2.5U两步酶切法,酶切较充分;使用20μL预扩增体系,含酶连产物1.0μL,Mix 10μL,上下游引物E+A/HM+T各2.0μL;选择性扩增反应体系20μL,含稀释50倍的预扩增产物3.0μL,Mix 5μL,上下游引物E+ANN/HM+TNN各2.0μL.选用17对引物检测发现,组培苗CCGG位点的甲基化程度约为24%,平均多态性比率为1.8%,表明火龙果组培苗在短期无性系繁殖中,存在一定程度的DNA甲基化差异. 展开更多

关键词 火龙果 组培苗 MSAP DNA甲基化

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丹参不同愈伤组织诱导及遗传转化体系优化 被引量：5

8

作者 张林甦 邵芬娟 秦利军 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期102-108,共7页

为了获得满足不同目的组织培养材料和稳定高效的遗传转化体系,该研究以丹参叶片和茎段为外植体,采用含不同浓度的植物激素(植物生长物质)的Murashige Skoog(MS)培养基,探索诱导丹参产生不同愈伤的条件;采用正交法考察浸染时间、共培养... 为了获得满足不同目的组织培养材料和稳定高效的遗传转化体系,该研究以丹参叶片和茎段为外植体,采用含不同浓度的植物激素(植物生长物质)的Murashige Skoog(MS)培养基,探索诱导丹参产生不同愈伤的条件;采用正交法考察浸染时间、共培养时间、筛选压等对农杆菌介导的丹参遗传转化体系的影响,并根据出芽率及转化阳性率优化丹参遗传转化体系。结果表明:(1)能较快诱导丹参叶片产生愈伤的是MS+0.5mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)2,4-D;诱导茎较快产生愈伤的是MS+0.1mg·L^(-1)NAA+0.5 mg·L^(-1)6-BA;1 mg·L^(-1)反式玉米素(ZR)可能有利于诱导产生含有丹参酮的愈伤组织;1.0 mg·L^(-1)2,4-D较易诱导丹参愈伤组织生根。(2)以卡那霉素为筛选剂时农杆菌GV3101介导的丹参遗传转化的条件为浸染5 min、共培养1 d、卡那霉素30 mg·L^(-1)筛选,经PCR鉴定转基因阳性率为60%;而用10 mg·L^(-1)链霉素筛选阳性率达70%。该研究结果确定了丹参不同愈伤组织诱导条件,明确了以卡那霉素为筛选剂时农杆菌GV3101介导的丹参遗传转化的条件,换用10 mg·L^(-1)链霉素筛选时体系更加稳定、更易操作、更易重复。 展开更多

关键词 丹参 愈伤 诱导 遗传转化

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木豆GDSL脂肪酶基因的克隆及表达分析 被引量：4

9

作者 乔光 文晓鹏 丁贵杰 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1720-1725,共6页

【目的】为探明GDSL家族脂肪酶的抗逆机理,【方法】在前期研究基础上,利用RACE技术克隆木豆GDSL脂肪酶基因,并通过荧光定量PCR技术检测其表达特性。【结果】获得1条木豆GDSL脂肪酶基因,命名为Cc GDSL1,该基因含开放阅读框全长1107 bp,编... 【目的】为探明GDSL家族脂肪酶的抗逆机理,【方法】在前期研究基础上,利用RACE技术克隆木豆GDSL脂肪酶基因,并通过荧光定量PCR技术检测其表达特性。【结果】获得1条木豆GDSL脂肪酶基因,命名为Cc GDSL1,该基因含开放阅读框全长1107 bp,编码369个氨基酸;经同源性分析,Cc GDSL1编码的氨基酸序列与豆科植物中GDSL脂肪酶具有较高的相似性。该基因在叶、茎和根中均表达,且叶和茎中表达量显著高于根;干旱胁迫能提高Cc GDSL1的表达量,随干旱的持续表现出先降后升随后趋于稳定的表达模式。【结论】推测Cc GDSL1基因参与木豆应激干旱胁迫。 展开更多

关键词 木豆 GDSL脂肪酶 克隆 表达

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拟南芥PGK基因家族功能的初步分析 被引量：4

10

作者 黄小贞 赵懿琛 《山地农业生物学报》 2017年第1期12-17,35,共7页

磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase)是一类进化上非常保守的蛋白家族,因而利用模式植物拟南芥研究PGK家族基因功能具有普遍意义。拟南芥基因组中含有三个PGK基因家族成员(PGK1,PGK2和PGK3),但是对于它们的基因表达模式和蛋白定位... 磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase)是一类进化上非常保守的蛋白家族,因而利用模式植物拟南芥研究PGK家族基因功能具有普遍意义。拟南芥基因组中含有三个PGK基因家族成员(PGK1,PGK2和PGK3),但是对于它们的基因表达模式和蛋白定位的研究还不是很清楚。本文利用实时荧光定量PCR技术检测了PGK基因家族的表达模式,结果表明三个PGK基因在拟南芥的各个组织器官和发育阶段中都有表达。利用拟南芥原生质体瞬时转化系统对三个PGK蛋白进行亚细胞定位,结果显示PGK1和PGK3定位于细胞基质,而PGK2定位于叶绿体。另外,我们分离得到了PGK2基因的T-DNA插入敲除突变体pgk2。pgk2在正常条件下表现出叶片黄化,PR1基因上调表达和H_2O_2过量积累等类似于超敏反应的细胞死亡表型。进一步的遗传分析表明pgk2的细胞死亡表型和T-DNA插入位点紧密连锁,暗示着pgk2的细胞死亡表型是由于PGK2的基因缺失造成的,因此PGK2可能在调控植物细胞程序化死亡过程中有重要作用。以上研究结果对于进一步探讨PGK基因家族的功能具有重要的参考价值。 展开更多

关键词 拟南芥 PGK基因家族 蛋白定位 细胞死亡

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不同施肥处理对玛瑙红樱桃生长发育的影响 被引量：3

11

作者 乔光 《现代园艺》 2017年第6期12-13,共2页

研究了不同施肥处理对玛瑙红樱桃生长发育的影响。结果表明:施肥处理有利于提高玛瑙红樱桃年生长量、叶片光合速率及花芽数量,其中处理3(腐熟有机肥30kg/株,复合肥0.6kg/株)第二年相对生长量最大,达到31.5%;在处理2中(腐熟有机肥20 kg/... 研究了不同施肥处理对玛瑙红樱桃生长发育的影响。结果表明:施肥处理有利于提高玛瑙红樱桃年生长量、叶片光合速率及花芽数量,其中处理3(腐熟有机肥30kg/株,复合肥0.6kg/株)第二年相对生长量最大,达到31.5%;在处理2中(腐熟有机肥20 kg/株,复合肥0.4 kg/株)光合速率最高(8.6μmol·m^(-2)·s^(-1))、花芽数最多,达237.4个/株。由此可见,处理2较利于玛瑙红樱桃生长发育。 展开更多

关键词 施肥 玛瑙红樱桃 生长发育

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从江香猪源切除信号肽β干扰素原核载体的构建

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作者 温贵兰 陈绍品 +7 位作者 张升波 李昌红 徐丽 田浪 文明 王开功 程振涛 赵德刚 《贵州畜牧兽医》 2018年第5期1-4,共4页

β干扰素(IFN-β)具有重要的抗病毒生物学功能,为了研究从江香猪源IFN-β生物活性,试验设计1对扩增切除信号肽序列的香猪源IFN-β编码区引物,以pUCm-T-IFN-β为模板进行PCR扩增,经菌液PCR筛选、测序鉴定后,获得重组质粒pColdⅠ-CJ-poIFN... β干扰素(IFN-β)具有重要的抗病毒生物学功能,为了研究从江香猪源IFN-β生物活性,试验设计1对扩增切除信号肽序列的香猪源IFN-β编码区引物,以pUCm-T-IFN-β为模板进行PCR扩增,经菌液PCR筛选、测序鉴定后,获得重组质粒pColdⅠ-CJ-poIFN-β,将其转入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE蛋白电泳,Western blot方法对重组表达蛋白进行分析。结果:切除信号肽序列的从江香猪源IFN-β序列编码区长为498 bp,表明该片段已正确插入原核表达质粒pColdⅠ中;SDS-PAGE蛋白电泳在预期位置未见蛋白条带,但Western blot检测显示带His标签的重组表达蛋白能被His单抗识别,显色后条带为18.26 ku,与预期大小相符。结果显示:试验成功构建了携带切除信号肽序列的香猪源IFN-β基因的原核表达质粒,但重组蛋白表达量极低,试验结果为进一步研究从江香猪源-β干扰素的生物活性奠定基础。 展开更多

关键词 从江香猪 Β干扰素 信号肽 原核表达

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湄潭茶园土壤养分特征及肥力质量评价 被引量：26

13

作者 柳书俊 姚新转 +1 位作者 赵德刚 吕立堂 《草业学报》 CSCD 北大核心 2020年第11期33-45,共13页

为探明湄潭茶园土壤养分特征及肥力质量现状,选用pH、有机质、全氮、碱解氮、有效磷和速效钾6个指标,应用主成分分析法对湄潭6种类型茶园土壤养分特征及肥力质量状况进行评价。结果表明:1)湄潭茶园土壤pH为3.73~7.26,均值为5.01,61.11%... 为探明湄潭茶园土壤养分特征及肥力质量现状,选用pH、有机质、全氮、碱解氮、有效磷和速效钾6个指标,应用主成分分析法对湄潭6种类型茶园土壤养分特征及肥力质量状况进行评价。结果表明:1)湄潭茶园土壤pH为3.73~7.26,均值为5.01,61.11%的茶园土壤达到优质茶园的标准,湄潭茶园土壤pH整体适宜,16.67%的茶园土壤有酸化趋势。2)湄潭茶园土壤有机质、全氮、碱解氮、有效磷和速效钾含量整体丰富,均值分别为22.84 g·kg-1、1.43 g·kg-1、124.50 mg·kg-1、44.16 mg·kg-1和135.61 mg·kg-1,分别有61.11%、70.37%、61.11%、55.56%和59.26%的茶园土壤达到优质茶园的标准,但各养分指标之间存在着明显的空间差异。3)湄潭茶园土壤肥力综合指标值(IFI)为0.179~0.989,均值为0.683,分别有51.85%和31.48%的茶园土壤处于Ⅰ和Ⅱ级水平,土壤养分状况整体良好;各类型茶园IFI之间存在明显的空间差异,其由大到小分别为:中山黄壤>丘陵黄壤>丘陵石灰土>低山黄壤>中山石灰土>低山石灰土。4)pH与有机质、全氮、有效磷之间呈极显著负相关关系,与碱解氮呈显著负相关关系;各养分指标之间存在着显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)的正相关关系,各养分之间关系比较密切且具有同源性。pH与IFI呈极显著(P<0.01)负相关关系,其他养分指标均与IFI呈极显著(P<0.01)正相关关系。 展开更多

关键词 湄潭茶园 土壤养分 土壤肥力质量 土壤肥力综合指标值 主成分分析

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蔗糖、硼、钙离子和γ-氨基丁酸对烟草花粉萌发的影响 被引量：8

14

作者 周小利 杨诗怡 +4 位作者 陈志芸 廖菊够 顾菁 吕立堂 陈穗云 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期10-14,共5页

采用液体培养法研究了蔗糖、硼酸、钙离子和γ-氨基丁酸(GABA)对4个烟草种(N.alata、N.tabacum L.cv.K326、N.repanda和N.stocktonii)花粉离体萌发的影响。结果表明:适宜浓度的蔗糖、硼酸、钙离子和GABA对花粉的萌发有较大的促进作用,... 采用液体培养法研究了蔗糖、硼酸、钙离子和γ-氨基丁酸(GABA)对4个烟草种(N.alata、N.tabacum L.cv.K326、N.repanda和N.stocktonii)花粉离体萌发的影响。结果表明:适宜浓度的蔗糖、硼酸、钙离子和GABA对花粉的萌发有较大的促进作用,超过最适浓度则起抑制作用。4个烟草种花粉离体培养的最适硼酸和钙离子浓度都为0.05 g/L,N.alata和N.tabacum L.cv.K326花粉萌发的最适蔗糖浓度为10%,N.repanda和N.stocktonii的最适蔗糖浓度为12%。N.alata和N.tabacum L.cv.K32花粉在10%蔗糖+0.05 g/L+H_3BO_3+0.05 g/L Ca^(2+)培养基上,花粉萌发率分别为92%和90%;N.repanda和N.stocktonii在12%蔗糖+0.05 g/L H_3BO_3+0.05 g/L Ca^(2+)培养基上,花粉萌发率分别为85%和87%。在上述有钙离子培养基中添加不同浓度的GABA,结果表明:N.tabacum L.cv.K326、N.repanda和N.stocktonii在加入0.7~1 mmol/L GABA后花粉萌发率与不加入GABA时没有显著差异,GABA高于该浓度花粉萌发显著受抑制;而在培养基中加入0.7 mmol/L GABA后,N.alata花粉萌发受到抑制,花粉萌发率为81%。而在无钙离子培养基(10%蔗糖+0.05 g/L硼酸+1 mmol/L GABA)中培养N.alata花粉,花粉萌发率达到91%,表明适宜浓度的GABA具有促进花粉萌发的作用,而GABA和Ca^(2+)在促进花粉萌发过程中可能具有协同作用。 展开更多

关键词 烟草 花粉萌发 蔗糖 硼酸 钙离子 Γ-氨基丁酸

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高表达花烟草防御素1基因K326烟草叶片总蛋白的提取及其生物活性分析

15

作者 龚伟伟 黄小贞 赵懿琛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期800-804,共5页

目的 提取高表达花烟草防御素1(Nicotiana alata defensin 1,NaD1)基因的K326烟草叶片总蛋白,并分析其生物活性。方法 从花烟草花、野生型(WT)和高表达NaD1基因(转基因)K326烟草叶片中提取总蛋白,Bardford法测定蛋白浓度。滤纸片法检测... 目的 提取高表达花烟草防御素1(Nicotiana alata defensin 1,NaD1)基因的K326烟草叶片总蛋白,并分析其生物活性。方法 从花烟草花、野生型(WT)和高表达NaD1基因(转基因)K326烟草叶片中提取总蛋白,Bardford法测定蛋白浓度。滤纸片法检测总蛋白对真菌的抑菌活性,CCK-8法检测对癌细胞(HeLa细胞)的抑制活性。结果 花烟草花、WT及转基因K326烟草叶片总蛋白浓度分别为11.25、10.33和10.14 mg/mL。转基因K326烟草叶片总蛋白对白色念珠菌的抑菌活性为(85.68±3.08)%,分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.33和1.14倍(F=15 339,P <0.05);对尖孢镰刀菌的抑菌活性为(148.48±2.47)%,分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.09和1.08倍(F=4 927,P <0.05)。转基因K326烟草叶片总蛋白对HeLa细胞的IC_(50)最小(6.11 mg/mL),抑制活性分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.56和1.21倍(F=89 748,P <0.05)。结论 高表达NaD1基因的K326烟草总蛋白具有良好的抑菌和抗癌生物活性,本研究为以烟草作为生物反应器生产抑菌和抗癌生物制剂提供了实验依据。 展开更多

关键词 K326烟草 花烟草防御素1 转基因 生物活性

原文传递

转玉米ZmSDD1基因烟草降低气孔密度提高抗旱性 被引量：9

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作者 刘延波 项阳 +1 位作者 秦利军 赵德刚 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1889-1898,共10页

为了培育抗旱的烟草新品种并研究玉米SDD1基因(Zm SDD1)的功能,从玉米中同源克隆到Zm SDD1,构建了含有玉米Ubiquitin启动子驱动的Zm SDD1基因的植物表达载体p GM626-Ubi-Zm SDD1-ABt,并利用叶盘转化法遗传转化烟草,筛选获得转基因植株... 为了培育抗旱的烟草新品种并研究玉米SDD1基因(Zm SDD1)的功能,从玉米中同源克隆到Zm SDD1,构建了含有玉米Ubiquitin启动子驱动的Zm SDD1基因的植物表达载体p GM626-Ubi-Zm SDD1-ABt,并利用叶盘转化法遗传转化烟草,筛选获得转基因植株。经反复干旱处理发现,转Ubiquitin::Zm SDD1基因烟草存活率比野生型高80%,转基因植株中PRO含量以及POD和SOD活性均显著高于野生型烟草植株,MDA含量则低于野生型植株。转Zm SDD1基因烟草植株和野生型植株的气孔导度、细胞间二氧化碳浓度和蒸腾速率在干旱后都有所下降,但转基因植株的净光合速率极显著高于野生型。转Ubiquitin::Zm SDD1烟草植株叶片表面气孔数较野生型相比减少50%。Real-time PCR结果显示转基因烟草和野生型相比负调控气孔密度的Zm SDD1基因和MAPK3基因表达量均极显著上调,正调控气孔密度的FAMA基因极显著下调。结果说明,转Zm SDD1植株比野生型植株抗旱的原因是由于Zm SDD1基因负调控了气孔发育相关基因的表达从而使气孔密度降低,减少蒸腾作用,减少水分散失从而提高抗旱性。 展开更多

关键词 烟草 气孔密度 ZmSDD1 抗旱

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fliY基因失活减弱沙福芽孢杆菌ST7菌株的锰氧化能力

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作者 朱忠梅 吴莉丹 +5 位作者 张心仪 方争林 牛熙 黄世会 王嘉福 冉雪琴 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期107-117,共11页

【背景】沙福芽孢杆菌ST7菌株具有较强的锰氧化能力,但其分子机制不清楚。【目的】着重研究鞭毛马达开关蛋白基因(fliY)对沙福芽孢杆菌锰氧化能力的影响。【方法】根据同源重组原理,以沙福芽孢杆菌ST7菌株为起始菌株,构建fliY基因敲除... 【背景】沙福芽孢杆菌ST7菌株具有较强的锰氧化能力,但其分子机制不清楚。【目的】着重研究鞭毛马达开关蛋白基因(fliY)对沙福芽孢杆菌锰氧化能力的影响。【方法】根据同源重组原理,以沙福芽孢杆菌ST7菌株为起始菌株,构建fliY基因敲除的突变株ΔfliY,测定菌落迁徙、细菌生物膜和锰氧化率等,研究fliY基因突变后菌株的运动能力、生物膜生成和锰氧化能力是否发生变化。【结果】经克隆测序,证实突变株ΔfliY中fliY基因的后半段被卡纳霉素抗性基因取代,fliY基因失活;与野生型菌株ST7相比,突变株ΔfliY在全营养的LB培养基中生长变化不大,但在含锰的PYCM培养基中,突变株的生长速度减慢、菌落较小、生物膜生成量显著下降,运动性和锰氧化能力分别下降65%和20%。【结论】fliY基因不仅影响菌株的生长和运动,而且参与细菌的趋化和锰氧化等生物学过程。 展开更多

关键词 沙福芽孢杆菌 鞭毛马达开关蛋白基因 生物膜 鞭毛 锰氧化

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