低温胁迫对贵州省云雾贡茶生化指标的影响 被引量：1

1

作者 王莹 李岩 +1 位作者 王姝 赵德刚 《湖北农业科学》 2019年第S1期70-74,共5页

对贵州省云雾贡茶[Camellia Sinensis (L.) Kuntze var. niaowangensis Q.H. Chen]盆栽幼苗进行不同温度处理,测定叶片的细胞质膜透性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、丙二... 对贵州省云雾贡茶[Camellia Sinensis (L.) Kuntze var. niaowangensis Q.H. Chen]盆栽幼苗进行不同温度处理,测定叶片的细胞质膜透性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、丙二醛(MDA)含量、可溶性蛋白质含量、游离脯氨酸含量和可溶性糖含量的变化,探讨贵州省云雾贡茶对不同低温胁迫的响应特性和耐寒适应能力。结果表明,云雾贡茶各温度处理间POD、CAT、PPO的活性差异不显著(P>0.05),细胞质膜透性、SOD活性、可溶性蛋白质含量差异显著(P<0.05),MDA、游离脯氨酸、可溶性糖的含量差异极显著(P<0.01)。各低温处理下,云雾贡茶细胞质膜透性和MDA含量随着胁迫时间的延长呈上升趋势,SOD、POD、CAT、PPO的活性及可溶性蛋白质、游离脯氨酸和可溶性糖的含量随着胁迫时间的延长呈先上升后下降趋势,各指标最高值基本都出现在1℃处理后3 d时。随着胁迫时间的延长,抗氧化酶和渗透调节物质对膜系统的保护作用及调节机制超过一定限度,引起贵州省云雾贡茶不可逆的损伤。 展开更多

关键词 云雾贡茶[Camellia SINENSIS (L.) Kuntze VAR. niaowangensis Q.H. Chen] 低温胁迫 生化特性

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贵州地方稻种来拢小圆粒半矮秆突变体srd-1筛选及鉴定 被引量：2

2

作者 李磊 曾晓芳 赵德刚 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期629-636,共8页

以贵州地方稻种来拢突变体库中能稳定遗传的小圆粒半矮秆突变体srd-1为材料,对其半矮化和小圆粒性状分子机制进行研究。暗形态建成表明srd-1突变体矮化性状与BR无关。srd-1突变体表现对GA敏感,外源GA3对突变体幼苗第2叶鞘有促进生长作用... 以贵州地方稻种来拢突变体库中能稳定遗传的小圆粒半矮秆突变体srd-1为材料,对其半矮化和小圆粒性状分子机制进行研究。暗形态建成表明srd-1突变体矮化性状与BR无关。srd-1突变体表现对GA敏感,外源GA3对突变体幼苗第2叶鞘有促进生长作用,能诱导α-淀粉酶活性,可以使倾斜方向排列的细胞微管骨架恢复至野生型横向排列方向,表明srd-1突变体矮化性状与GA信号传导途径无关。GA合成途径中关键酶基因Os KS1和Os GA2ox1表达相对于野生型差异不显著,Os CPS、Os KO2、Os KAO、Os GA20ox2和Os GA3ox2基因表达下调,初步说明srd-1突变体的矮化性状可能是由活性GA生物合成降低所致。此外,小圆粒调控基因SRS1、SRS3和SRS5表达下调,表明srd-1突变体突变基因同时参与了籽粒大小和株高的调控,突变基因影响了活性GA的生物合成和小圆粒调控关键酶基因的表达,进而导致了矮化和小圆粒表型的产生。该研究为突变体突变基因的定位及利用研究提供了参考。 展开更多

关键词 来拢 srd-1突变体 筛选与鉴定

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高校基因工程实验室建设与管理探讨 被引量：2

3

作者 赵丹 赵德刚 《教育教学论坛》 2016年第41期270-271,共2页

高校实验室是进行教学和科研的重要基地,也是培养学生动手能力和创新精神的重要场所。结合基因工程实验室建设与管理实践,对基因工程实验室的实验内容、教学目标、实验设置以及实验室"物、教师、学生"管理等方面进行了探讨和... 高校实验室是进行教学和科研的重要基地,也是培养学生动手能力和创新精神的重要场所。结合基因工程实验室建设与管理实践,对基因工程实验室的实验内容、教学目标、实验设置以及实验室"物、教师、学生"管理等方面进行了探讨和论述。 展开更多

关键词 基因工程 实验室建设 管理

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双语教学在生物化学课程中的应用 被引量：3

4

作者 赵懿琛 赵德刚 《教育教学论坛》 2018年第48期137-138,共2页

生物化学是一门综合性的学科,也是多种生命科学相关专业的必修课程和基础。随着全球科技日新月异的飞速发展,国际间的沟通日益增强,双语教学对于生物化学在国际间的交流至关重要。本文主要阐述了双语教学在生物化学课程授课方面的重要性... 生物化学是一门综合性的学科,也是多种生命科学相关专业的必修课程和基础。随着全球科技日新月异的飞速发展,国际间的沟通日益增强,双语教学对于生物化学在国际间的交流至关重要。本文主要阐述了双语教学在生物化学课程授课方面的重要性,并结合当前教学环境对生物化学教学中的教材和方法进行了探讨。 展开更多

关键词 生物化学 双语 教学

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低温胁迫下贵州云雾贡茶生长调节剂的变化 被引量：8

5

作者 王莹 李岩 +2 位作者 王姝 向准 赵德刚 《湖北农业科学》 2020年第8期99-102,共4页

以贵州云雾贡茶[Camellia sinensis(L.)Kuntze var.niaowangensis Q.H.Chen]一年生幼苗茶树为试验材料,用酶联免疫法(ELISA)测定不同低温胁迫下茶树叶片生长调节剂含量的变化,以探讨低温胁迫下茶树生长调节剂变化规律。结果显示,1、4℃... 以贵州云雾贡茶[Camellia sinensis(L.)Kuntze var.niaowangensis Q.H.Chen]一年生幼苗茶树为试验材料,用酶联免疫法(ELISA)测定不同低温胁迫下茶树叶片生长调节剂含量的变化,以探讨低温胁迫下茶树生长调节剂变化规律。结果显示,1、4℃处理云雾贡茶IAA、GA含量大部分显著低于对照,ABA含量、ABA/GA明显高于对照;10℃处理ABA、IAA、GA含量大部分显著高于对照,ABA/GA与对照无明显变化。随胁迫时间延长,1、4℃处理ABA、IAA含量随时间变化呈先上升后下降的趋势,GA含量呈下降趋势,ABA/GA呈上升趋势;10℃处理ABA和GA含量呈先上升后下降的趋势,IAA含量呈下降趋势。低温条件下,云雾贡茶能提高ABA类生长抑制物质,降低IAA、GA等生长促进类物质,通过调节植物体内生长调节剂平衡来应对低温胁迫。 展开更多

关键词 云雾贡茶[Camellia sinensis(L.)Kuntze var.niaowangensis Q.H.Chen] 低温胁迫 生长调节剂

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3个贵州薏苡品种农艺性状及光合特性研究 被引量：5

6

作者 徐剑 李建容 +1 位作者 赵懿琛 赵德刚 《山地农业生物学报》 2019年第5期65-69,共5页

为探究贵州薏苡农艺性状及光合生理特性,以兴仁小白壳、黔薏苡1号、黔薏苡2号进行田间小区试验,测量其农艺性状并测定光合特性日变化,以期为发掘高产的薏苡品种提供理论依据。结果表明:黔薏苡1号的茎粗、分蘖数、单株产量、主茎产量均... 为探究贵州薏苡农艺性状及光合生理特性,以兴仁小白壳、黔薏苡1号、黔薏苡2号进行田间小区试验,测量其农艺性状并测定光合特性日变化,以期为发掘高产的薏苡品种提供理论依据。结果表明:黔薏苡1号的茎粗、分蘖数、单株产量、主茎产量均显著高于黔薏苡2号和兴仁小白壳;黔薏苡2号的株高、茎节数、分蘖数显著低于兴仁小白壳。3个薏苡品种之间的净光合速率、气孔导度及胞间CO2浓度日变化趋势均不同,兴仁小白壳和黔薏苡1号各自在13:00、14:00出现午休现象,表现为黔薏苡1号、黔薏苡2号净光合速率显著高于兴仁小白壳,黔薏苡1号净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度及蒸腾速率均显著低于其它两个品种,此后逐渐升高,16:00时达到峰值并显著高于其它两个薏苡品种。蒸腾速率兴仁小白壳在10:00~11:00、14:00~15:00时间段高于黔薏苡1号、黔薏苡2号。 展开更多

关键词 薏苡 农艺性状 光合作用

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生物学研究生专业英语教学研究 被引量：4

7

作者 赵懿琛 《教育教学论坛》 2019年第1期94-95,共2页

在国际化交流日益增多的今日,英语在国际间的学术交流中起到了重要的作用。正因如此,对于生物学专业的研究生而言,专业英语是一项非常重要的课程。本文通过对生物学研究生进行专业英语教学中所获得的经验,对专业英语的教学方法进行研究... 在国际化交流日益增多的今日,英语在国际间的学术交流中起到了重要的作用。正因如此,对于生物学专业的研究生而言,专业英语是一项非常重要的课程。本文通过对生物学研究生进行专业英语教学中所获得的经验,对专业英语的教学方法进行研究和探讨,以期通过词汇、听、说、读、写这五个方面的教学帮助生物学专业的研究生提高专业英语能力。 展开更多

关键词 生物学 专业英语 教学

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杜仲性别相关EST-SSR标记的开发 被引量：6

8

作者 林开勤 赵德刚 +2 位作者 李岩 何选泽 王韶敏 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第10期146-152,共7页

【目的】杜仲为雌雄异株多年生木本植物,具有重要的药用价值与经济价值,其利用价值因植株性别而异,尤其是杜仲胶含量及其他次生代谢产物在雌雄植株中都存在差别,但杜仲在开花前采用形态学和细胞学方法很难分辨其性别,且需要7年以上才能... 【目的】杜仲为雌雄异株多年生木本植物,具有重要的药用价值与经济价值,其利用价值因植株性别而异,尤其是杜仲胶含量及其他次生代谢产物在雌雄植株中都存在差别,但杜仲在开花前采用形态学和细胞学方法很难分辨其性别,且需要7年以上才能开花。因此,本研究应用EST-SSR标记开发杜仲性别相关的分子标记,以期能在早期鉴定出雌雄植株,提高杜仲资源利用率。【方法】根据杜仲雌雄植株转录组文库中EST-SSR的两翼序列设计引物,利用来源于7个产地的杜仲雌雄植株各6份DNA样品筛选引物,PCR扩增获得具性别差异的扩增产物,将扩增产物进行克隆及序列分析,应用雌雄植株各12份DNA样品检验性别标记的可靠性。【结果】从140对EST-SSR引物中筛选出1对引物EST-Eu059,在雌、雄植株中产生差异条带,雌、雄植株均有1条约160 bp的序列(分别命名为Eu-f160和Eu-m160),而雄株多1条约120 bp的序列(Eu MSM)。序列分析发现,Eu-f160与Eu-m160均为156 bp,具有重复单元(GT)6,且仅有1个碱基不相同,即雌株重复单元内第3个G碱基变成了A,可能发生了突变;Eu MSM为112 bp,缺失了(GT)6重复单元。经Blastn比对,Eu MSM序列与Gen Bank数据库中的现有序列没有同源性。用杜仲雌、雄植株基因组DNA各12份进行验证表明,在所有雄株中都有1条雄性特异序列。【结论】本研究筛选出了1对可以鉴别杜仲雌雄株性别的引物EST-Eu059,该标记在雄株中具有1条特异序列片段Eu MSM。该标记可在杜仲生长早期快速、可靠地鉴定其性别。 展开更多

关键词 杜仲 EST-SSR 雄性特异序列 性别鉴定

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杂交水稻毕粳优210及其亲本光合特性研究 被引量：11

9

作者 张笑寒 赵德刚 +2 位作者 何友勋 张时龙 余本勋 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2016年第3期381-386,共6页

利用LI-6400XT便携式光合作用测量系统研究了杂交水稻毕粳优210及其亲本毕粳2A、NR210抽穗期剑叶的光合特性。结果表明:毕粳优210剑叶的叶绿素a含量比毕粳2A和NR210分别高20.28%和7.99%,同时,其叶绿素b含量比毕粳2A高53.70%,比NR210高12... 利用LI-6400XT便携式光合作用测量系统研究了杂交水稻毕粳优210及其亲本毕粳2A、NR210抽穗期剑叶的光合特性。结果表明:毕粳优210剑叶的叶绿素a含量比毕粳2A和NR210分别高20.28%和7.99%,同时,其叶绿素b含量比毕粳2A高53.70%,比NR210高12.16%。毕粳优210的平均净光合速率(Pn)比毕粳2A和NR210分别高19.88%和21.87%,平均水分利用效率(WUE)比毕粳2A和NR210分别高58.98%和16.34%。叶绿素荧光动力学参数测定表明:毕粳优210的初始荧光产量(Fo)、最大荧光产量(Fm)、光合电子传递速率(ETR)和PSII的光化学效率(ΦPSII)均比其亲本毕粳2A和NR210显著提高,且毕粳优210最大光合效率(Fv/Fm)、非光化学淬灭(NPQ)分别比毕粳2A高15.87%和18.18%。毕粳2A和NR210杂交产生的毕粳优210能通过增强光合能力来显著提高水稻的光合生产率。 展开更多

关键词 水稻 杂交 光合特性

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杜仲EuCHIT1基因表达载体构建及在大肠杆菌中的表达 被引量：5

10

作者 董旋 丁延庆 +1 位作者 冉昕 赵德刚 《山地农业生物学报》 2016年第5期9-12,共4页

构建了T7启动子驱动杜仲几丁质酶基因EuCHIT1的原核表达载体pET-EuCHIT1和pMCSG-EuCHIT1,其表达产物分别含6个组氨酸（6His）标签和6个组氨酸连接的麦芽糖结合蛋白（his6-tag–maltose-binding pro-tein, MBP）标签,分别将重组载体遗传... 构建了T7启动子驱动杜仲几丁质酶基因EuCHIT1的原核表达载体pET-EuCHIT1和pMCSG-EuCHIT1,其表达产物分别含6个组氨酸（6His）标签和6个组氨酸连接的麦芽糖结合蛋白（his6-tag–maltose-binding pro-tein, MBP）标签,分别将重组载体遗传转化大肠杆菌细胞BL21（DE3）,在37℃、150 rpm条件下培养至菌液OD值为0.4~0.8后,转到16℃、150 rpm条件下以1 mM IPTG诱导培养12 h,表达产物经SDS-PAGE分析,pET-Eu-CHIT1/BL21（ DE3）表达以包涵体形式存在36.03 kD融合蛋白,pMCSG-EuCHIT1/ BL21（ DE3）成功表达可溶形式存在的77.21 kD融合蛋白。故可以使用pMCSG-EuCHIT1/ BL21（ DE3）获得可溶的融合蛋白,为之后的EuCH-IT1的多克隆抗体的制备和及功能研究奠定基础。 展开更多

关键词 杜仲 几丁质酶基因( EuCHIT1) 原核表达 可溶性蛋白

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农杆菌介导McCHIT1基因遗传转化水稻茎尖研究 被引量：5

11

作者 张笑寒 仇志浪 赵德刚 《中国农学通报》 2016年第27期114-120,共7页

为了提高农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化效率,笔者以贵州特有的地方水稻品种‘平塘黑糯’茎尖为材料,以含有Ubiqutin启动子驱动苦瓜几丁质酶基因McCHIT1表达的植物表达载体p Cambia-UbiMcCHIT1为转化载体,采用正交试验设计,系统研究了菌... 为了提高农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化效率,笔者以贵州特有的地方水稻品种‘平塘黑糯’茎尖为材料,以含有Ubiqutin启动子驱动苦瓜几丁质酶基因McCHIT1表达的植物表达载体p Cambia-UbiMcCHIT1为转化载体,采用正交试验设计,系统研究了菌液OD600值、真空处理时间和真空渗透压强对水稻茎尖遗传转化效率的影响。结果表明:在3个因素中,真空处理时间是影响水稻转化效率和死亡率的最关键因素。农杆菌介导‘平塘黑糯’茎尖遗传转化的最优条件为农杆菌菌液浓度OD600为1.0、真空处理时间为7 min、真空渗透压强为15 k Pa。GUS组织化学染色和PCR分子鉴定表明,通过本研究优化的农杆菌介导水稻茎尖遗传转化体系,已将苦瓜的几丁质酶基因McCHIT1已整合到水稻基因组中,获得转McCHIT1基因‘平塘黑糯’新种质。 展开更多

关键词 水稻 茎尖 遗传转化 McCHIT1基因

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高羊茅黔草1号和黔草2号LEA3基因克隆与苗期干旱胁迫表达 被引量：3

12

作者 杨琴琴 胡江 +7 位作者 牛熙 黄世会 冉雪琴 王嘉福 王江岚 令狐绍进 吕婷 李骋 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第12期2736-2744,共9页

【目的】克隆贵州本地高羊茅品种黔草1号和黔草2号的第三组晚期胚胎发生丰富蛋白(Late Embryogenesis Abundant Protein,Group 3,LEA3)基因,分析其生物信息学及其苗期干旱胁迫的表达量变化,为进一步探讨LEA3基因的功能和高羊茅抗旱分子... 【目的】克隆贵州本地高羊茅品种黔草1号和黔草2号的第三组晚期胚胎发生丰富蛋白(Late Embryogenesis Abundant Protein,Group 3,LEA3)基因,分析其生物信息学及其苗期干旱胁迫的表达量变化,为进一步探讨LEA3基因的功能和高羊茅抗旱分子机制提供理论基础。【方法】参照NCBI已登录大麦LEA3基因序列,利用RT-PCR获得黔草1号和黔草2号LEA3基因cDNA序列,应用相关软件对氨基酸序列进行分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析苗期干旱胁迫的表达量。【结果】黔草1号和黔草2号LEA3基因完整的ORF框长度分别为609和642 bp,分别编码203个氨基酸和213个氨基酸;黔草1号LEA3蛋白比黔草2号缺失1个基元序列(包含11个氨基酸),且两者LEA3基因编码的氨基酸序列存在12个位点的氨基酸差异;黔草1号LEA3基因编码蛋白分子量为20.72 kDa,等电点8.55,总平均亲水性为-0.971;黔草2号LEA3基因编码蛋白分子量为22.01 kDa,等电点8.99,总平均亲水性为-1.069;两者的LEA3蛋白均没有跨膜结构,且均以α-螺旋结构占主导,与大麦、山羊草、冰草和小麦的LEA3具有高度的同源性,与小麦、旱麦草、大麦、山羊草、无芒雀麦、冰草的LEA3蛋白聚为一类;苗期干旱胁迫下黔草1号LEA3基因的表达量在整个胁迫过程中总体高于黔草2号,2个品种高羊茅在-2.5 MPa PEG 6000胁迫下的LEA3基因表达量高于-1.5 MPa PEG 6000胁迫。【结论】黔草1号和黔草2号的抗旱性与LEA3基因的表达量呈正相关,相同干旱胁迫条件下,黔草1号LEA3的表达量高于黔草2号,推测在受到干旱胁迫时,黔草1号更能适应干旱环境。 展开更多

关键词 高羊茅 LEA3基因 基因克隆 干旱 表达分析

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猪蛋白质二硫化物异构酶A4基因克隆及密码子偏好性分析 被引量：4

13

作者 张小丹 牛熙 +8 位作者 许瑶 阮亦麒 李大鹏 冉雪琴 王嘉福 吴娟 杨镜 田兰 龙艳霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第4期1074-1085,共12页

试验旨在研究猪蛋白质二硫化物异构酶(protein disulfide isomerase A4,PDIA4)基因的密码子使用特性及其与其他物种密码子使用的差异。试验以香猪子宫组织为试验材料,采用RT-PCR方法扩增获得猪PDIA4基因,参考从NCBI数据库中下载的18个... 试验旨在研究猪蛋白质二硫化物异构酶(protein disulfide isomerase A4,PDIA4)基因的密码子使用特性及其与其他物种密码子使用的差异。试验以香猪子宫组织为试验材料,采用RT-PCR方法扩增获得猪PDIA4基因,参考从NCBI数据库中下载的18个不同物种PDIA4基因序列,对猪PDIA4基因的密码子使用特性及其与其他物种密码子的使用差异和进化关系进行分析,同时对猪PDIA4基因与4个模式生物密码子使用偏性进行比较。结果表明,猪PDIA4基因编码区长1 941 bp,共编码646个氨基酸。与NCBI数据库公布的野猪PDIA4基因(GenBank登录号:NM_001267834.1)的相似性达99%。猪PDIA4基因偏好使用G/C结尾的密码子,27种密码子为猪PDIA4基因的偏好密码子(RSCU>1),其中使用频率最高的前3个密码子分别为CTG(RSCU=3.69)、GCC(RSCU=2.31)和CGC(RSCU=2.29)。比较19个物种PDIA4基因发现,不同物种间PDIA4基因的有效密码子数(ENc)、密码子适应指数(CAI)、GC含量以及T、C、A、G、G+C在密码子第3位含量(T3s、C3s、A3s、G3s、GC3s)均存在差异,且密码子偏好以G/C结尾;聚类分析发现,基于CDS序列的系统进化树更符合19个物种的真实分类系统。在密码子使用频率上,猪PDIA4基因与小鼠基因组间密码子使用偏好程度更为接近,故小鼠更适合作为猪PDIA4基因的遗传转化和异源表达的受体系统。 展开更多

关键词 猪 PDIA4基因 克隆 密码子偏好性

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黔中喀斯特地区典型次生林内凋落叶化学计量特征 被引量：3

14

作者 舒利贤 皮发剑 +2 位作者 喻理飞 罗俊 袁丛军 《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第5期60-64,共5页

为了研究退化喀斯特森林养分循环特征,以黔中喀斯特常绿落叶阔叶次生林内的10个优势种凋落叶为对象,开展化学计量学特征研究。研究结果表明:凋落叶中C、N、P元素与凋落叶的质量比分别为(497.88±12.97)mg/g、(12.19±0.54)mg/g... 为了研究退化喀斯特森林养分循环特征,以黔中喀斯特常绿落叶阔叶次生林内的10个优势种凋落叶为对象,开展化学计量学特征研究。研究结果表明:凋落叶中C、N、P元素与凋落叶的质量比分别为(497.88±12.97)mg/g、(12.19±0.54)mg/g和(0.89±0.05)mg/g。m(C)∶m(N)、m(C)∶m(P)和m(N)∶m(P)值分别为43.17±2.07、620.03±42.33和14.60±0.81。不同生活型树种凋落叶中C和P元素与凋落叶的质量比及m(C)∶m(P)均表现为常绿树种大于落叶树种(P<0.05)。凋落叶中N、P与凋落叶的质量比呈正相关。同其他研究结果相比,喀斯特地区树种凋落叶中C、N、P元素与凋落叶的质量比具有地域差异。黔中次生森林凋落叶中C、N、P与凋落叶的质量比普遍较高,凋落叶的分解速率较快,N、P元素成比例矿化释放,但是矿质养分和凋落叶的分解不受有机物与凋落叶质量比的影响。 展开更多

关键词 生态化学计量特征 凋落叶 次生林 喀斯特 黔中

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转基因杜仲再生体系的优化 被引量：2

15

作者 王玲 董旋 +2 位作者 谭艾娟 赵德刚 赵懿琛 《种子》 北大核心 2019年第5期18-22,27,共6页

为了提高杜仲不定芽的获得率及生根率,选用B5、MS和WPM 3种培养基,以杜仲下胚轴为外植体,利用农杆菌介导pGM 626-Act1-EuDIR3和pSH 737-35S-EuDIR1遗传转化杜仲,并将浸染后的各外植体分别接种于3种不同培养基上,观察记录各培养基上外植... 为了提高杜仲不定芽的获得率及生根率,选用B5、MS和WPM 3种培养基,以杜仲下胚轴为外植体,利用农杆菌介导pGM 626-Act1-EuDIR3和pSH 737-35S-EuDIR1遗传转化杜仲,并将浸染后的各外植体分别接种于3种不同培养基上,观察记录各培养基上外植体的生长情况,通过GUS染色检测和PCR验证统计得到阳性芽数。结果表明:转化质粒在B5、MS和WPM培养基上的平均出芽率分别为(14.79±6.20)%、(7.68±2.37)%和(4.05±0.64)%,相较于MS和WPM培养基,B5培养基上的愈伤组织生长旺盛,色泽鲜艳呈绿色,质地紧密脆嫩,平均出芽率显著高于另外2种培养基,但是WPM培养基的生根率显著高于另外2种培养基,WPM和B5培养基的生根率分别为53.85%和3.57%,在MS培养基上的阳性芽并未生根。因此,在杜仲遗传转化过程中,B5培养基更适合诱导不定芽,WPM培养基利于不定芽生根。本研究优化了转基因杜仲再生体系,为杜仲基因功能研究提供技术支持。 展开更多

关键词 转基因 杜仲 再生体系 培养基

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超量表达NtHAK1基因烟草农艺性状及光合特性研究 被引量：2

16

作者 朱娜 张沙沙 +2 位作者 杜致辉 秦利军 赵德刚 《种子》 北大核心 2018年第11期16-21,共6页

以共转化法获得的不含筛选标记的超量表达钾离子高亲和转运蛋白(high-affinity potassiumion transporter protein,HAK)基因烟草为材料,分析了各材料不同时期的形态学指标、光合特性参数和钾离子含量。田间种植结果表明,团棵期转基因烟... 以共转化法获得的不含筛选标记的超量表达钾离子高亲和转运蛋白(high-affinity potassiumion transporter protein,HAK)基因烟草为材料,分析了各材料不同时期的形态学指标、光合特性参数和钾离子含量。田间种植结果表明,团棵期转基因烟草株系59-10、100-23的各形态学指标均值均显著低于野生型烟草;但在旺长期转基因株系59-10(23.05%)、100-23(18.95%)除叶片数指标极显著(p<0.01)高于野生型植株外,其余各指标与野生型相比较差异不显著;成熟期株系100-23的茎围均值比野生型低7.81%,差异达到极显著水平。光合特征指标测定结果表明,转基因株系59-10、100-23的净光合速率的均值分别比野生型高3.51%和7.83%,气孔导度的均值比野生型高10.61%和27.72%,胞间CO_2浓度的均值比野生型高9.49%和2.15%,蒸腾速率的均值比野生型高11.94%和10.86%。在团棵期,转基因株系59-10的钾离子含量比野生型高21.15%,开花期转基因株系100-23比野生型高3.49%,差异也均达到极显著水平。 展开更多

关键词 烟草 NtHAK1 形态指标 光合特性 钾含量

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棉花水浸提液对西瓜、大豆的化感作用研究 被引量：2

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作者 庄宇 赵德刚 赵懿琛 《种子》 北大核心 2019年第9期24-29,35,共7页

为探究“瓜、棉、豆”套作体系在农业生产中可行性利用的生理基础,通过盆栽试验,研究陆地棉根部水浸提液对白菜、西瓜和大豆种子萌发及幼苗生长的化感效应。结果表明:100g·L^-1的棉花根部浸提液原液,显著抑制了3种作物的种子萌发... 为探究“瓜、棉、豆”套作体系在农业生产中可行性利用的生理基础,通过盆栽试验,研究陆地棉根部水浸提液对白菜、西瓜和大豆种子萌发及幼苗生长的化感效应。结果表明:100g·L^-1的棉花根部浸提液原液,显著抑制了3种作物的种子萌发。稀释4倍的根部水浸提液对白菜种子萌发的抑制作用显著,萌发率相比水处理下降了10.54%,但该浓度下大豆、京欣西瓜和新小玉西瓜的种子萌发率分别为86.6%、86.7%和87.53%,对比水处理无显著变化。原液浓度的棉花根部浸提液极显著抑制了白菜幼苗的生长,并使白菜植株体内的SOD、POD和CAT等保护酶活性显著下降,大豆和西瓜的POD等保护酶活性并无显著影响。不同浓度的棉花根系浸提液对白菜和大豆表现出低浓度促进而高浓度抑制现象,不同浓度的棉花根系浸提液对西瓜表现出低浓度促进而高浓度不抑制现象。 展开更多

关键词 棉花 根部水浸提液 西瓜 大豆 幼苗生长

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农杆菌介导EuABP2基因遗传转化杜仲下胚轴研究 被引量：6

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作者 周舒婷 董旋 +1 位作者 赵懿琛 赵德刚 《山地农业生物学报》 2018年第3期33-39,共7页

为提高农杆菌介导的杜仲下胚轴遗传转化效率,本研究以杜仲种子为材料,采用正交试验设计,研究了NAA浓度、种子切割方式及光照强度对杜仲萌发及下胚轴直径和长度的影响;获得筛选标记草铵膦用于杜仲遗传转化的适宜浓度,并对杜仲抗性芽生根... 为提高农杆菌介导的杜仲下胚轴遗传转化效率,本研究以杜仲种子为材料,采用正交试验设计,研究了NAA浓度、种子切割方式及光照强度对杜仲萌发及下胚轴直径和长度的影响;获得筛选标记草铵膦用于杜仲遗传转化的适宜浓度,并对杜仲抗性芽生根方式进行了优化。结果表明:NAA(0.5 mg/L),正中横切,暗培养15 d,能有效的促进杜仲种子萌发及下胚轴的生长。本试验条件下杜仲种子萌发率可达95%,下胚轴直径1.21 mm,长度22.5 mm;以0.25 mg/L的草铵膦能够对杜仲转基因抗性芽进行有效筛选;成功获得转EuABP2基因表达的杜仲转基因植株12株。 展开更多

关键词 杜仲 EuABP2基因 遗传转化 下胚轴

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农杆菌介导黎平杂边禾优化遗传转化体系的研究 被引量：1

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作者 黄仁权 刘怒安 +1 位作者 曾晓芳 赵德刚 《山地农业生物学报》 2018年第3期7-13,共7页

为了提高农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化效率,建立黎平杂边禾遗传转化体系。本研究以贵州地方水稻品种黎平杂边禾茎尖为材料,遗传转化苦瓜几丁质酶基因McCHIT1,以β-葡萄糖苷酶基因(GUS)作为报告基因,通过正交试验设计方法,研究菌液OD_(6... 为了提高农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化效率,建立黎平杂边禾遗传转化体系。本研究以贵州地方水稻品种黎平杂边禾茎尖为材料,遗传转化苦瓜几丁质酶基因McCHIT1,以β-葡萄糖苷酶基因(GUS)作为报告基因,通过正交试验设计方法,研究菌液OD_(600)值、真空处理时间和真空渗透压强对黎平杂边禾茎尖遗传转化体系的影响。结果表明:影响植株GUS基因表达率和植株死亡率的主要因素分别为真空处理时间和菌液浓度;农杆菌介导黎平杂边禾茎尖遗传转化的最优条件是真空处理时间为11 min、农杆菌菌液OD_(600)为0.8和真空渗透压强为8kPa。通过优化影响遗传转化体系的条件,初步建立了建立黎平杂边禾遗传转化体系。 展开更多

关键词 黎平杂边禾 茎尖 遗传转化 GUS基因

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NtQPT基因对烟草形态及光合特性影响的研究

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作者 杜致辉 秦利军 +1 位作者 赵丹 赵德刚 《种子》 北大核心 2018年第6期20-26,30,共8页

本研究以含CaMV 35S启动子启动烟草QPT超量表达载体pSH-35S-QPT和含CaMV 35S驱动烟草QPT干涉表达的植物表达载体pSH-35S-QPTi的工程农杆菌分别对烟草进行遗传转化。通过对不同生育期2种转基因烟草形态及光合测定发现,QPT干涉表达烟草的... 本研究以含CaMV 35S启动子启动烟草QPT超量表达载体pSH-35S-QPT和含CaMV 35S驱动烟草QPT干涉表达的植物表达载体pSH-35S-QPTi的工程农杆菌分别对烟草进行遗传转化。通过对不同生育期2种转基因烟草形态及光合测定发现,QPT干涉表达烟草的株高、茎围等形态指标均显著低于QPT超量表达和野生型植株。其中,以旺长期转干涉片段35 S∷QPTi转基因烟草植株的株高、茎围指标差异最为显著(p<0.01),分别比野生型和超量表达植株低31.77%、27.51%和42.0%、36.78%。此外,干涉植株的开花时间比野生型和超量表达烟草延迟10~15d。干涉植株的最大净光合速率分别比野生型和超量表达植株低40.26%和44.51%,差异均达到显著水平(p<0.05)。另外,干涉植株的叶绿素a和类胡萝卜素含量也出现显著降低,为野生型的71.07%和72.80%。 展开更多

关键词 烟草 喹啉酸核糖基转移酶 形态 光合特性

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