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牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌和牛结核分枝杆菌三重PCR快速检测方法的建立
被引量:
13
1
作者
杨莉
余波
+10 位作者
张涛
姜玲玲
刘镜
杨丽娟
孙启跃
徐景峨
龙玲
唐远江
余国富
邹茂华
吴位珩
《贵州农业科学》
CAS
2020年第5期92-96,共5页
为建立快速、准确的检测牛呼吸道主要病原菌牛支原体(Mycoplasma bovis)、牛多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)及牛结核分枝杆菌(M.tuberculosis)的方法,对牛支原体oppD基因序列、牛多杀性巴氏杆菌Pm-kmt基因序列、牛结核分枝杆菌I...
为建立快速、准确的检测牛呼吸道主要病原菌牛支原体(Mycoplasma bovis)、牛多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)及牛结核分枝杆菌(M.tuberculosis)的方法,对牛支原体oppD基因序列、牛多杀性巴氏杆菌Pm-kmt基因序列、牛结核分枝杆菌IS6110基因序列分别设计特异性引物,对单一PCR检测方法进行优化后建立三重PCR检测方法。结果表明:三重PCR的最佳扩增条件为94℃预变性10min;94℃1min,60℃50s,72℃1min,循环30次;72℃延伸10min。建立的三重PCR方法能对同一样本中的3种病原菌进行扩增,特异性强。牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌和牛结核分枝杆菌的最低检测DNA浓度分别为5.306×10^-3ng/μL、3.075×10^-2ng/μL和1.605×10^-4ng/μL。建立的三重PCR方法临床检测牛支原体肺炎鼻拭子、牛结核分枝杆菌、结核菌素与单一PCR检测方法的阳性符合率为100%。三重PCR检测方法可用于牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌、牛结核分枝杆菌的单一和混合感染鉴别诊断,具有快速、准确、简便的特点。
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关键词
牛支原体
牛多杀性巴氏杆菌
牛结核分枝杆菌
三重PCR
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职称材料
题名
牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌和牛结核分枝杆菌三重PCR快速检测方法的建立
被引量:
13
1
作者
杨莉
余波
张涛
姜玲玲
刘镜
杨丽娟
孙启跃
徐景峨
龙玲
唐远江
余国富
邹茂华
吴位珩
机构
贵州省
农业科学院畜牧兽医研究所
贵州省清镇市动物疫病疫防控制中心
贵州省
黔西县农业农村局
出处
《贵州农业科学》
CAS
2020年第5期92-96,共5页
基金
贵州省农业攻关计划项目“肉牛支原体病防控关键技术研究”[黔科合支撑(2016)2503]
贵州省农业农村厅项目“贵州省现代肉牛产业技术体系建设”(GZCYTX-0301)
+3 种基金
贵州省科技厅项目“贵州省肉牛养殖工程技术研究中心建设项目”[黔科合平台人才(2016)5201]
贵州省科技厅项目“牛羊产业高值化配套技术集成应用与科技帮扶行动计划”[黔科合服企(2019)4010]
贵州省科学科技重点项目“贵州优质专用肉牛品种选育”[黔科合NY(2015)3002]
贵州省科技计划项目“贵州肉牛标准化养殖关键技术示范与推广”[黔科合成果(2019)4295]。
文摘
为建立快速、准确的检测牛呼吸道主要病原菌牛支原体(Mycoplasma bovis)、牛多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)及牛结核分枝杆菌(M.tuberculosis)的方法,对牛支原体oppD基因序列、牛多杀性巴氏杆菌Pm-kmt基因序列、牛结核分枝杆菌IS6110基因序列分别设计特异性引物,对单一PCR检测方法进行优化后建立三重PCR检测方法。结果表明:三重PCR的最佳扩增条件为94℃预变性10min;94℃1min,60℃50s,72℃1min,循环30次;72℃延伸10min。建立的三重PCR方法能对同一样本中的3种病原菌进行扩增,特异性强。牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌和牛结核分枝杆菌的最低检测DNA浓度分别为5.306×10^-3ng/μL、3.075×10^-2ng/μL和1.605×10^-4ng/μL。建立的三重PCR方法临床检测牛支原体肺炎鼻拭子、牛结核分枝杆菌、结核菌素与单一PCR检测方法的阳性符合率为100%。三重PCR检测方法可用于牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌、牛结核分枝杆菌的单一和混合感染鉴别诊断,具有快速、准确、简便的特点。
关键词
牛支原体
牛多杀性巴氏杆菌
牛结核分枝杆菌
三重PCR
Keywords
Mycoplasma bovis
Pasteurella multocida
Mycobacterium tuberculosis
triple PCR
分类号
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌和牛结核分枝杆菌三重PCR快速检测方法的建立
杨莉
余波
张涛
姜玲玲
刘镜
杨丽娟
孙启跃
徐景峨
龙玲
唐远江
余国富
邹茂华
吴位珩
《贵州农业科学》
CAS
2020
13
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