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CGRP减轻高氧诱导的早产鼠肺泡Ⅱ型细胞损伤及对Gli1表达的影响 被引量：2
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作者 党红星 杨林 +2 位作者 王少华 方芳 许峰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第1期49-54,共6页
目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高氧致早产鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)损伤的保护作用及对Sonichedgehog(Shh)通路Gli1蛋白表达的影响和意义。方法分离纯化早产鼠AECⅡ,分为空气、空气+CGRP、空气+CGRP+CGRP拮抗剂(CGRP8-37)、高氧(95%O2... 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高氧致早产鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)损伤的保护作用及对Sonichedgehog(Shh)通路Gli1蛋白表达的影响和意义。方法分离纯化早产鼠AECⅡ,分为空气、空气+CGRP、空气+CGRP+CGRP拮抗剂(CGRP8-37)、高氧(95%O2)、高氧+CGRP及高氧+CGRP+CGRP8-37组。培养24 h后观察AECⅡ形态,流式细胞术检测凋亡率,荧光分子探针法检测细胞内活性氧(ROS),分光光度法检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD);RT-qPCR检测表面活性蛋白C(SPC)mRNA,Western blot检测Gli1蛋白表达。结果95%O2诱导24 h后,AECⅡ凋亡率比空气对照增加3.6倍,ROS水平增加1.5倍,MDA增加65%,SOD降低近一半,SPC mRNA和Gli1蛋白表达显著降低(均P<0.05);CGRP干预后可显著减轻上述变化(P<0.05)。结论CGRP可减轻高氧诱导的AECⅡ损伤,其机制可能与Shh信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 高氧症 肺泡Ⅱ型上皮细胞 GLI1蛋白
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氧化应激诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡时NF-κB和Bak的表达变化
2
作者 符跃强 刘成军 +4 位作者 陈应富 李静 胡兰 卢仲毅 许峰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1207-1210,共4页
目的:探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型(alveolar typeⅡ,ATⅡ)上皮细胞的凋亡情况及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65和Bak表达变化。方法:原代培养大鼠ATⅡ细胞,用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)500μmol/L处理不同时间,建立... 目的:探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型(alveolar typeⅡ,ATⅡ)上皮细胞的凋亡情况及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65和Bak表达变化。方法:原代培养大鼠ATⅡ细胞,用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)500μmol/L处理不同时间,建立氧化损伤性细胞模型。相差显微镜下观察细胞形态变化。流式细胞仪检测H2O2刺激后细胞凋亡率的变化。蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测ATⅡ细胞受H2O2刺激后NF-κB p65和Bak的表达变化。免疫荧光染色后,激光共聚焦显微镜下观察NF-κB p65的变化和细胞内分布情况。结果:受H2O2刺激3 h后,ATⅡ细胞体积减小,胞内颗粒数目减少,细胞核固缩。与正常对照组比较,受H2O2刺激1 h和3 h后,ATⅡ细胞的凋亡率明显上升(P=0.000,P=0.000)。Western blot检测发现H2O2刺激3 h后,细胞核内NF-κB p65的表达明显增加(P=0.000),ATⅡ细胞Bak蛋白的表达增加(P=0.000)。激光共聚焦显微镜观察发现正常细胞NF-κB p65表达微弱,H2O2刺激3 h后,NF-κB p65表达明显增强,主要集中分布于细胞核。结论:氧化应激能诱导ATⅡ细胞凋亡,在此过程中NF-κB p65在细胞核内的表达增加,Bak的表达也增加,两者参与了ATⅡ细胞的凋亡。 展开更多
关键词 肺泡Ⅱ型上皮细胞 凋亡 BAK 核因子ΚB
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