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鉴别ASFV野毒株与CD2v缺失株抗体检测方法的建立及应用 被引量：1
1
作者 王新凯 杨芷翊 +5 位作者 朱忠武 林彦星 黄超华 王友令 曹琛福 贾伟新 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期545-551,共7页
本研究通过建立两种不同包被抗原的间接ELISA方法,旨在对ASFV野毒株与CD2v缺失株进行鉴别诊断。通过优化后的EP402R基因序列进行原核表达重组蛋白,纯化后作为包被抗原建立基于CD2v重组蛋白的间接ELISA方法;参考WOAH方法对灭活后的ASFV... 本研究通过建立两种不同包被抗原的间接ELISA方法,旨在对ASFV野毒株与CD2v缺失株进行鉴别诊断。通过优化后的EP402R基因序列进行原核表达重组蛋白,纯化后作为包被抗原建立基于CD2v重组蛋白的间接ELISA方法;参考WOAH方法对灭活后的ASFV进行纯化,并作为包被抗原建立基于全病毒蛋白的间接ELISA方法。通过对抗原包被浓度等条件的优化,建立的基于CD2v重组蛋白的间接ELISA方法灵敏性可达1∶1280,批内变异系数小于4.15%,批间变异系数小于9.48%;建立的基于ASFV全病毒蛋白的间接ELISA方法灵敏性可达1∶2560,批内变异系数小于3.83%;批间变异系数小于5.04%。这两种方法均不与PRRSV、CSFV、PCV2等常见猪病阳性血清发生反应,特异性强。在96份临床猪血清样本中检出79份阴性血清、12份野毒株感染阳性血清和5份CD2v缺失株感染的阳性血清,与商品化试剂盒符合率分别达到87.5%与97.9%。本试验基于CD2v重组蛋白和ASFV全病毒蛋白建立了两种特异性强、敏感度高的间接ELISA方法,两者结合使用可以从血清学方法上区分ASFV野毒株感染和CD2v缺失株感染的临床样本,对非洲猪瘟的流行病学调查与精准防控提供了技术支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 ELISA 鉴别诊断
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