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AAV-GDNF/TH双基因载体的构建及表达
被引量:
1
1
作者
张敏
杨慧
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2008年第6期543-548,共6页
目的探讨构建于同一个重组腺相关病毒(rAAV)载体上的酪氨酸羟化酶(TH)基因和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因是否能够同时表达。方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测双基因在HEK293包装细胞中的转录;通过免疫细胞化学荧光染色...
目的探讨构建于同一个重组腺相关病毒(rAAV)载体上的酪氨酸羟化酶(TH)基因和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因是否能够同时表达。方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测双基因在HEK293包装细胞中的转录;通过免疫细胞化学荧光染色和免疫组织化学染色技术分别检测双基因在体外培养大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)和大鼠脑中的表达。结果在HEK293包装细胞和BMSCs中分别同时检测到了GDNF和TH基因RNA和蛋白的表达。对照LacZ在HEK293包装细胞和骨髓基质细胞中的表达率分别为50%和15%。大鼠脑组织切片中注射AAV-GDNF/TH病毒的部位与注射PBS的对侧相比无论是GDNF还是TH的表达均显著增加(P<0.01)。结论构建于同一个rAAV载体上的TH基因和GDNF基因体内体外都能够同时表达,此结果为PD的基因治疗提供了新的依据。
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关键词
腺相关病毒
帕金森病
酪氨酸羟化酶(TH)
胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)
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职称材料
题名
AAV-GDNF/TH双基因载体的构建及表达
被引量:
1
1
作者
张敏
杨慧
机构
首都医科大学附属北京口腔医院口腔医学院北京口腔医学研究所
首都医科大学
北京
神经科学
研究所
北京
神经再生修复
研究
重点实验室教育部神经变性病学重点实验室
出处
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2008年第6期543-548,共6页
基金
国家自然科学基金(30670655)
北京市教委科技发展计划项目(KM200610025002)
+1 种基金
教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目(20060025004)
国家重点基础研究发展计划(2006CB500706)
文摘
目的探讨构建于同一个重组腺相关病毒(rAAV)载体上的酪氨酸羟化酶(TH)基因和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因是否能够同时表达。方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测双基因在HEK293包装细胞中的转录;通过免疫细胞化学荧光染色和免疫组织化学染色技术分别检测双基因在体外培养大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)和大鼠脑中的表达。结果在HEK293包装细胞和BMSCs中分别同时检测到了GDNF和TH基因RNA和蛋白的表达。对照LacZ在HEK293包装细胞和骨髓基质细胞中的表达率分别为50%和15%。大鼠脑组织切片中注射AAV-GDNF/TH病毒的部位与注射PBS的对侧相比无论是GDNF还是TH的表达均显著增加(P<0.01)。结论构建于同一个rAAV载体上的TH基因和GDNF基因体内体外都能够同时表达,此结果为PD的基因治疗提供了新的依据。
关键词
腺相关病毒
帕金森病
酪氨酸羟化酶(TH)
胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)
Keywords
adeno-associated virus
Parkinson' s disease
TH
GDNF
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
AAV-GDNF/TH双基因载体的构建及表达
张敏
杨慧
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2008
1
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